桃枝枯病病原菌鉴定及品种(种质)室内抗病性评价

【目的】明确桃枝枯病的病原菌以及不同桃品种(种质)对枝枯病的抗性。【方法】观察桃枝枯病田间症状。通过组织分离法对病样进行分离培养,观察分离物的形态特征,通过扩增测序其ITS、EF-1α和TUB基因序列进行分子鉴定,并对分离物进行致病性验证。选取优势病原菌种类,采用离体有伤接种枝条的方法测定37个桃品种(种质)对其的抗性,并根据病斑长度利用系统聚类方法对不同桃品种(种质)对枝枯病的抗性进行分级和评价。【结果】通过组织分离和纯化,获得54株分离物,经形态学观察和多基因系统发育分析结果显示,这些分离物有3个种,其中:35株为桃拟茎点霉(Diaporthe amygdali),5株为甜樱间座壳(Diaporthe eres),14株为葡萄座腔菌(Botryosphaer dothidea)。致病性测定试验表明,对接种后发病的病斑再分离鉴定,均能得到与原病原菌一致的菌株。抗性测定结果表明,根据病斑长度利用聚类分析将37个桃品种(种质)分为4类,类型Ⅰ有5个、类型Ⅱ有11个、类型Ⅲ有15个、类型IV有6个。抗性评价结果表明:供试品种(种质)中,免疫3个(光核桃、红花山桃和帚形山桃),占8.10%;抗病2个(白根甘肃桃和红根甘肃桃),占5.40%;中抗11个,占29.73%;感病15个,占40.54%;高感6个,占16.22%。【结论】无锡桃枝枯病的病原菌有3种分别为:D.amygdali、D.eres和B.dothidea,其中D.amygdali为优势种,分离频率为64.81%,不同桃品种(种质)对桃拟茎点霉菌的抗性不同,筛选到2个免疫品种(种质)、3个抗性品种(种质)。

砖红镰刀菌菌株Pa2对草莓黑斑病菌的抑制活性分析

【目的】探究内生真菌砖红镰刀菌(Fusarium lateritium)菌株Pa2对草莓黑斑病菌(Alternaria alternata)的抑制效果,为开发草莓黑斑病生防菌剂奠定理论基础。【方法】以草莓黑斑病为防治对象,通过菌丝生长速率法、孢子萌发法以及SYTOX绿菁染色法分析菌株Pa2对草莓黑斑病菌的菌丝生长、孢子萌发、细胞膜通透性的影响,通过离体果实与叶片测定砖红镰刀菌菌株Pa2对草莓黑斑病菌的防治效果,初步探讨砖红镰刀菌Pa2对草莓黑斑病的抑制活性与防效。【结果】平板对峙试验表明,菌株Pa2对草莓黑斑病菌生长抑制效果达80.96%。菌株Pa2上清液不仅可以破坏菌丝细胞膜,而且对病菌菌丝生长以及孢子萌发的抑制能力随上清液浓度的升高而增强。同时,菌株Pa2能够显著抑制草莓黑斑病菌在果实与叶片上的侵染能力。【结论】砖红镰刀菌菌株Pa2对草莓黑斑病菌具有很好的抑制作用,在草莓黑斑病的生物防治方面具有潜在的应用价值。

砖红镰刀菌菌株Pa2对草莓灰霉病的抑制作用

由灰葡萄孢菌Botrytis cinerea引起的草莓灰霉病是草莓栽培中最具破坏性的病害之一,严重降低食用以及经济价值。本研究以“红颜”草莓为试验材料,测定砖红镰刀菌Fusarium lateritium Pa2对草莓灰霉病菌的抑菌活性、防治效果以及草莓病程相关基因表达水平的影响。结果表明,菌株Pa2对草莓灰霉病菌具有显著的抑菌活性,其上清液可以破坏草莓灰霉病菌菌丝细胞膜,导致细胞内容物泄露。离体接种试验结果表明菌株Pa2对草莓叶片灰霉病、草莓果实灰霉病防治效果分别为79.13%、54.29%。经菌株Pa2上清液处理24h后草莓果实病程相关基因FaPR1、FaPR4、FaGR分别上升19.05、24.64、3.69倍。综上所述,砖红镰刀菌菌株Pa2是一种防治草莓灰霉病的新型生防菌资源。

苹果白粉病发生情况调查及田间药剂筛选

为寻找有效防控苹果白粉病的措施,采用普查和定点调查相结合的方法,定期调查苹果园内白粉病的发生时期、为害程度。通过田间防治试验,对生物制剂、诱抗剂和高效化学药剂的防治效果进行评价。结果表明,苹果白粉病春季于4—5月发病,秋季于9月左右发病;且‘华硕’发病较‘富士’重。防治苹果白粉病,生防制剂8%嘧啶核苷酸类抗菌素可湿性粉剂防治效果较好(75.27%),其次是10%多抗霉素可湿性粉剂,防效为62.09%。3种诱抗剂对苹果白粉病防治均有一定的效果,50μg/mL水杨酸处理效果最好,达66.85%;草酸仅高浓度处理的防治效果超过50%;5%氨基寡糖素水剂2000倍处理效果与50μg/mL水杨酸处理效果接近,为65.26%。供试的5种常用化学制剂中,50%丙环唑乳油防治白粉病效果最好(98.59%),其次是10%苯醚甲环唑水分散粒剂(92.80%),5%己唑醇悬浮剂、30%啶氧菌酯悬浮剂和40%腈菌唑悬浮剂防治效果也均在80%以上。试验结果可对后期苹果病虫害综合防治技术体系的集成与示范提供技术指导。

苹果轮纹病菌对吡唑醚菌酯的敏感性及Cytb基因序列分析

为了明确苹果轮纹病菌Botryosphaeria dothidea对吡唑醚菌酯的敏感性和吡唑醚菌酯的靶标基因序列,采用菌丝生长速率法测定了水杨肟酸对B.dothidea菌丝生长的作用,探讨了添加或不添加水杨肟酸的情况下病原菌对吡唑醚菌酯敏感性的变化;并测定了不同产区的80株B.dothidea对吡唑醚菌酯的敏感性以及440株B.dothidea对吡唑醚菌酯的抗性;然后,扩增并分析了具有不同敏感性的菌株的细胞色素b基因(Cytb)序列。结果表明:不同浓度水杨肟酸对菌丝生长的抑制作用不同。添加40μg/mL水杨肟酸不影响吡唑醚菌酯的EC 50。菌株的敏感性频率符合近似正态分布,各产区菌株对吡唑醚菌酯的敏感性没有显著差异,吡唑醚菌酯平均EC 50为(2.95±2.11)μg/mL,没有检测到抗性菌株。靶标基因序列分析表明,Cytb基因在F129、G137和G143位密码子上没有产生点突变,首次发现在143位密码子后有内含子插入。

猕猴桃膏药病病原菌初步鉴定及防治建议

为了初步明确猕猴桃膏药病的病原菌,通过病害症状观察、病原菌形态特征观察和分子技术测序分析对猕猴桃膏药病进行了病原菌鉴定。根据病害症状特征、病原菌形态特征和系统发育分析,将引起猕猴桃膏药病的病原菌初步鉴定为假柄隔担菌Septobasidium pseudopedicellatum。同时对病原菌的研究现状进行了讨论,并对膏药病防治措施予以阐述,以期为猕猴桃膏药病的研究和防治提供参考。

草莓病害拮抗细菌的筛选及其对草莓褐色叶斑病的防效

通过组织分离法和稀释分离法从草莓根、茎、叶和根际土壤中分离内生细菌183株及根际细菌55株,其中9株拮抗菌对草莓褐色叶斑病病原菌(Pilidium concavum)、灰葡萄孢菌(Botrytis cinerea)、尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)、链格孢菌(Alternaria alternate)4种草莓病原菌具有广谱拮抗效果。结合病原菌形态学特征、生理生化特性和分子生物学鉴定结果,将拮抗菌株G3-23、J3-20、G3-29鉴定为贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis),J6-1、J1-4、G2-12、G3-k2和J1-11鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),G3-20鉴定为耐盐芽孢杆菌(Bacillus halotolerans),G3-17鉴定为蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)。菌株G3-23能够分泌蛋白酶和纤维素酶,对由P.concavum引起的草莓褐色叶斑病具有良好的防治效果,并且该菌株能在离体草莓叶片上成功定殖,表现出较好的生防潜力。

贝莱斯芽胞杆菌菌株P2-1对草莓褐色叶斑病菌的抑制活性及其促生作用

【目的】探究内生菌贝莱斯芽胞杆菌菌株P2-1对草莓褐色叶斑病的防治效果,以及对草莓的促生作用,为该拮抗菌在草莓病害生物防治中的应用奠定基础。【方法】通过平板对峙实验分析菌株P2-1对草莓褐色叶斑病菌落生长以及菌丝形态的影响,并利用离体草莓叶片鉴定菌株P2-1对草莓褐色叶斑病的防治效果。同时,分析菌株P2-1对草莓植株生长的影响。【结果】菌株P2-1对草莓褐色叶斑病菌具有强烈的拮抗活性,抑制率达到66.38%,抑菌带为0.76 cm。菌株P2-1代谢产物具有蛋白酶和纤维素酶活性。菌株P2-1能在草莓叶片定殖,处理10 d后仍可维持在4.07×10^(8)CFU左右。菌株P2-1对草莓褐色叶斑病具有良好的防治效果,同时能促进草莓植株生长,使草莓株高、根长、湿质量和干质量分别提高24.83%、40.74%、28.88%和55.69%。【结论】贝莱斯芽胞杆菌菌株P2-1对草莓褐色叶斑病具有较好的防治效果,并具有草莓促生作用,表现出潜在的应用价值。

河南草莓褐色叶斑病病原菌的鉴定及防治药剂筛选

为明确河南草莓主产区草莓褐色叶斑病的病原菌种类,筛选安全有效的杀菌剂,利用组织分离法从河南草莓病株上分离纯化得到草莓褐色叶斑病的病原菌,并对6种杀菌剂进行筛选和防效评价。经形态学和分子生物学鉴定该病原菌为Pilidium concavum。6种杀菌剂中以450 g·L^(-1)咪鲜胺水乳剂抑菌效果最好,对草莓褐色叶斑病的防效达到83%,其EC50为2.4497 mg·L^(-1),可作为河南草莓褐色叶斑病田间防治的候选药剂。

中国橘小实蝇不同地理种群遗传多样性分析

【目的】为推测中国橘小实蝇Bactrocera dorsalis向北方扩散的路径和北方地区的传播来源。【方法】本研究对橘小实蝇15个地理种群的144个样本的mtDNA COⅠ序列进行测定;依据mtDNA COⅠ序列利用相关软件对橘小实蝇不同地理种群的遗传多样性、遗传分化等进行分析。【结果】在橘小实蝇144个样本的mtDNA COⅠ序列中获得了75个单倍型,其中单倍型H_7为7个地理种群所共享,北方地理种群与原发生地区种群间存在共享单倍型,绝大部分为种群独享单倍型。15个橘小实蝇地理种群总体表现出高水平的核苷酸多样性(Pi=0.02076)和单倍型多样性(Hd=0.99413),不同橘小实蝇地理种群间遗传分化较大。系统进化树显示,橘小实蝇各地理种群中的单倍型分布格局较为混杂,未形成明显的系统地理结构;系统进化树分为2支,湖北武汉、重庆北碚、福建福州、湖南衡阳、江苏南京、海南海口、河北保定、河南郑州、广东广州的地理种群聚为一支,海南三亚、广西南宁、云南丽江、湖南邵阳、山东泰安、山东临沂的地理种群聚为一支,北方新发生地理种群在两个分支中均有分布。橘小实蝇整体错配分析结果显示为单峰,表明橘小实蝇有过大规模的种群扩张。【结论】橘小实蝇可能以海南、广西和广东为地理源头向中部地区扩散,再从湖南、江苏等地向北方地区扩散。根据遗传多样性、遗传分化和单倍型分析,推测广西、广东和湖南为橘小实蝇北方地理种群较为有影响力的地理源头,海南海口地区与北方地区有着频繁的果品贸易往来,从而导致橘小实蝇随着运输扩散至北方地区。

BTH和水杨酸(SA)对甜瓜抗白粉病的诱导作用

研究了BTH和水杨酸(SA)作为诱导剂在不同浓度,不同时期对甜瓜抗白粉病的诱导作用。采用盆栽甜瓜植株,喷施诱导剂,然后接种甜瓜白粉菌的方法测定这2种诱导剂对甜瓜的诱导效果。结果表明2种诱导剂均对甜瓜有明显的诱导作用。BTH最佳诱导浓度为50μg／mL,SA为25μg/mL,平均诱导效果分别为86,6％和83．7％。在最佳诱导浓度下,2种诱导剂诱抗的持效期至少可达17 d。在2—8叶期,BTH和SA处理均有良好的诱导效果,且差异不显著。诱导剂本身对甜瓜白粉病菌分生孢子萌发及菌丝生长无明显影响。

枯草芽孢杆菌对番茄茎基腐病菌和葡萄灰霉病菌的抑制作用研究

利用枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)在室内对番茄茎基腐病和葡萄灰霉病进行了防效测定。结果表明,枯草芽孢杆菌对番茄茎基腐病和葡萄灰霉病均有较好的防效,分别为:93.37 % 和93.07 %。同时还对枯草芽孢杆菌的抑菌机理进行了初步研究,结果表明该拮抗菌可以溶解致病菌菌丝。

多种杀菌剂对苹果斑点落叶病的田间防治效果

为筛选对苹果斑点落叶病具有良好防治效果的杀菌剂,以‘首红’苹果为材料,对苹果斑点落叶病进行14种药剂的田间药效试验。结果表明:10%苯醚甲环唑WG、430 g/L戊唑醇SC和70%丙森锌WP防治苹果斑点落叶病的效果最好,明显高于其他药剂。2013和2014年春梢期的防效分别为81.65%、81.24%、79.97%和82.36%、86.14%、83.42%,秋梢期防效分别为76.22%、77.83%、73.84%和81.80%、82.18%、75.58%。其次为50%克菌丹WP、50%嘧菌环胺WP和10%多抗霉素WP,在防治苹果斑点落叶病上也表现出较好的效果。春梢期防效分别为78.35%、78.17%、77.34%和81.89%、82.03%、81.88%,秋梢期的防效分别为73.47%、72.58%、74.45%和78.73%、74.69%、77.44%。80%代森锰锌WP对苹果斑点落叶病的防治效果较差,均低于其他药剂。方差分析表明,三唑类杀菌剂苯醚甲环唑与保护性杀菌剂代森锰锌处理间的防效差异在2年的试验结果中均显著。

戊唑醇与代森锰锌对苹果3种主要病菌的联合毒力

为了弄清戊唑醇与代森锰锌混配对苹果轮纹病菌等3种苹果主要病菌的抑制作用,找出2种药剂混配的最佳配比,为田间使用提供依据,采用共毒系数法测定了戊唑醇与代森锰锌不同配比对苹果轮纹菌、苹果炭疽菌和苹果腐烂菌的联合毒力。结果表明,戊唑醇∶代森锰锌以1∶4比例混配对苹果轮纹病菌和苹果炭疽病菌的抑制效果最好,共毒系数分别为351.42和405.82;戊唑醇∶代森锰锌以4∶1比例混配对苹果腐烂病菌的抑制效果最好,共毒系数为169.49,增效作用显著。

草酸、水杨酸及BTH对甜瓜体内几种防御酶活性的影响

为研究叶面喷施草酸、水杨酸（SA）和BTH对甜瓜植株防御酶活性的影响,在甜瓜二叶期用不同浓度的草酸、水杨酸（SA）和BTH对甜瓜植株进行处理。结果表明：经草酸处理后,甜瓜植株体内的β-1,3-葡聚糖酶和POD活性均较对照植株有明显升高,在处理后9天达到高峰,β-1,3-葡聚糖酶活性与对照相比提高了2.7～3.9倍,POD活性比对照提高了3.5～4.8倍。但草酸处理并没有引起PAL活性的提高。用水杨酸（SA）和BTH处理植株,甜瓜植株体内的β-1,3-葡聚糖酶、POD和PAL活性较对照植株也有明显的提高,在处理后7天均达到高峰,其中β-1,3-葡聚糖酶活性比对照提高了1.9～3.8倍;POD活性提高了3～5.5倍;PAL活性提高了1.8～5.2倍。

生长季葡萄主要病虫害防治技术

近年来，随着葡萄种植面积的不断增大，病虫害的发生种类也随之增多，直接影响到葡萄的产量、品质和市场供应，所以在扩大葡萄种植面积的同时，也要注意病虫害的防治工作。

三唑类杀菌剂对苹果轮纹病菌超微结构的影响

为了研究三唑类杀菌剂对苹果轮纹病菌形态和结构的影响,选择在生产上常用的防治苹果轮纹病的三唑类杀菌剂:戊唑醇和苯醚甲环唑,对苹果轮纹病菌进行处理。用光学显微镜和扫描电镜技术研究新型三唑类杀菌剂对苹果轮纹病菌发育的组织学和超微形态结构的影响。结果表明:光学显微镜和扫描电镜观察发现三唑类杀菌剂处理能导致苹果轮纹病菌发生一系列变化:菌丝的生长明显受到抑制,不再匍匐生长,而是向上生长。菌丝干瘪、畸形,分枝增多,分枝有长有短,很不规则,且不均匀膨大。一些菌丝出现不同程度的龟裂现象。这些变化会导致苹果轮纹病菌菌丝的生长严重受阻,最终菌丝细胞解体死亡。

无公害葡萄的病虫害防治技术

在葡萄生产过程中,防治葡萄病虫害通常采用化学农药,虽然防治效果明显,但易产生抗药性,杀伤天敌,污染环境,尤其是农药残留问题较为突出。因此在无公害葡萄病虫害防治过程中,应始终贯彻预防为主,综合治理的植保方针,多侧重于农业防治、物理防治和生物防治，合理适当的运用化学农药防治，以达到提高产量、质量。及保护环境的目的。

大棚桃树穿孔病的防治技术

随着大棚桃种植面积的不断增大．大棚挑已成为一项新的种植产业．给果农带来的收益也是相当可观的。但随之而来的病虫害种类也不断增多．直接影响到大棚桃的产量、品质和市场供应。仅桃树穿孔病常见的就有三种：细菌性穿孔病、褐斑穿孔病及霉斑穿孔病，其中以细菌性穿孔病最重。穿孔病可引起桃树大量落叶．严重的可导致枝梢枯死。产量降低．并影响花芽的形成。因此分清3种穿孔病．采用适当的防治方法进行防治是桃农需要掌握的一项技术。

水杨酸诱导苹果抗轮纹病差异表达基因分析

以对苹果轮纹病抗病性不同的两个苹果品种‘北之幸’和‘礼泉短富’为材料,利用高通量测序技术对水杨酸(SA)处理后的苹果叶片cDNA文库进行差异基因表达谱分析。结果表明,经SA诱导后,抗病品种‘北之幸’的差异表达基因有257个;感病品种‘礼泉短富’的差异表达基因有150个;不同品种间得到差异表达基因828个。经GO分析,大部分差异基因参与代谢过程、应答刺激、生物学调控、免疫系统过程和抗氧化活性等。与抗性相关的功能注释主要涉及信号转导机制、防御机制和能量产生与转导等,但感病品种‘礼泉短富’没有注释到有关防御机制的差异基因。推测这些基因可能在SA诱导苹果抗轮纹病的过程中起重要作用。差异基因参与抗病相关的代谢通路涉及过氧化物酶体途径、苯丙烷生物合成途径、苯丙氨酸代谢途径、植物与病原菌互作途径和植物激素信号转导途径等。且抗性品种产生的差异基因数量、涉及的代谢通路均较感病品种多,说明抗病品种的抗性相关基因更易受到SA的诱导。