基于蛋白组学探讨羟基红花黄色素A对急性肝损伤的作用机制

目的基于蛋白组学的方法探讨羟基红花黄色素A(Hydroxysafflor yellow A,HSYA)对急性肝损伤(acute liver injury,ALI)的作用机制。方法将雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组、四氯化碳(CCl 4)模型组和羟基红花黄色素A低、中、高剂量组[10、20、40 mg/(kg·d)],每组10只。正常对照组、模型组腹腔注射生理盐水,羟基红花黄色素A组按不同浓度腹腔注射给药,持续8天。第8天给药后的1小时,其余组大鼠一次性腹腔注射50%CCl 4花生油溶液(0.1 mL/100 g)建立ALI模型,正常对照组注射等体积的花生油。24小时后解剖计算大鼠肝脏系数;检测大鼠血清肝功能指标[丙氨酸转氨酶(alanine transaminase,ALT)、天冬氨酸转氨酶(aspartate transaminase,AST)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)]含量、氧化指标[超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性、丙二醛(malondialdehyde,MDA)]以及炎症因子[肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)]的表达水平;并采用苏木素—伊红(HE)染色进行组织病理学观察;利用串联质谱标签技术(tandem mass tag,TMT),筛选正常对照组、模型组和羟基红花黄色素A各剂量组之间的差异表达蛋白(differentially expressed proteins,DEPs),并借助Uniprot数据库以及微生信在线工具等对其进行GO和KEGG富集分析。结果(1)与正常对照组相比,模型组大鼠肝脏系数、肝功能指标、MDA含量以及促炎因子表达水平均显著升高(P<0.05),SOD活力显著降低(P<0.05);与模型组相比,羟基红花黄色素A各剂量组大鼠肝脏系数、中高剂量组ALP含量以及各剂量组ALT、AST、MDA含量和促炎因子的表达水平均显著降低(P<0.05),SOD活力显著升高(P<0.05)。(2)模型组与正常对照组共筛选出243个DEPs,其中上调蛋白188个,下调蛋白55个;羟基红花黄色素A各剂量组与模型组共筛选出104个DEPs,其中上调蛋白37个,下调蛋白67个(FC>1.3,P<0.05)。(3)GO分析显示:DEPs主要涉及胞质囊腔、细胞外液、内质网等细胞组分,涉及免疫球蛋白受体结合、抗氧化活性、辅因子结合等分子功能,涉及炎症反应、氧化应激、脂质合成与代谢等生物过程。(4)KEGG分析显示:DEPs主要富集于脂肪酸代谢、PPAR等通路。结论羟基红花黄色素A可以保护CCl 4所致的ALI,其机制可能通过ME1、CYP4A1、PPAR等多个靶点和信号通路来发挥保肝护肝的作用。

内质网应激在急性肝损伤中的研究进展

急性肝损伤(acute liver injury, ALI)是一种起病快、诱因多、症状显著的临床肝疾病,病毒感染、药物滥用或化学物质暴露等因素均可诱导ALI,但其具体的发病机制仍不清楚。有报道称内质网应激(endoplasmic reticulum stress, ERS)参与肝脏疾病的发生,本文就ERS在ALI中的作用机制进行归纳,为临床治疗提供理论依据。