人促卵泡激素光激化学发光免疫分析法的建立及性能评价

目的利用光激化学发光免疫分析法(AlphaLISA)建立人促卵泡激素(hFSH)的快速检测试剂。方法使用2株配对的hFSH单克隆抗体,一株hFSH单克隆抗体用生物素标记,另一株hFSH单克隆抗体包被于受体微球上,与包被有链霉亲合素的供体微球共同构成检测试剂,优化反应体系并对试剂的各项性能指标进行评价。结果自制hFSH试剂分析敏感性和功能敏感性分别为0.09和0.12 U/L,线性测量范围为0.09～192.00 U/L,试剂的分析内变异系数(CV)和分析间CV分别为4.2%～7.1%和7.5%～8.3%,均<10.0%,与人黄体生成素(hLH)、人促甲状腺素(hTSH)和人绒毛膜促性腺激素(hCG)的交叉率分别为0.16%、0.08%和0.02%。100份临床血清样本用本试剂与西门子Immulite 2000促卵泡生成激素化学发光(CLIA)检测试剂盒检测,其相关系数为0.979(P<0.001)。结论自制hFSH AlphaLISA试剂的各项性能指标均能达到临床检测要求,可用于临床血清样本hFSH浓度的测定。

中国南方地区客家人群CYP2C9和VKORC1-1639G>A基因的遗传多态性

目的 探讨华法林药物反应相关基因细胞色素氧化酶P4502C9(cytochrome P450 family 2 subfamily C polypeptide,CYP2C9)和维生素K环氧化物还原酶复合体亚基1(vitamin K epoxide reductase subunit 1,VKORC1)-1639G>A遗传多态性在中国南方客家人群中的分布。方法 本研究共纳入2015年7月至2019年1月来梅州市人民医院门诊及住院口服华法林抗凝治疗的患者1 330例,提取患者外周血基因组DNA,通过聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)和DNA微阵列芯片法检测CYP2C9和VKORC1-1639G>A基因多态性。将中国南方客家人群CYP2C9和VKORC1-1639G>A基因型和基因频率与文献已报道的不同地区人群和民族的频率进行比较。结果 经Hardy-Weinberg Equilibrium遗传平衡定律检验,所有基因型均符合遗传平衡定律(P>0.05),所选取的研究对象具有群体代表性。CYP2C9基因分型结果显示,野生型CYP2C9*1/*1占92.1%(1 225例),杂合突变型CYP2C9*1/*2占0.5%(6例),杂合突变型CYP2C9*1/*3占7.3%(97例)和杂合突变型CYP2C9*2/*3占0.1%(2例)。CYP2C9*1、CYP2C9*2和CYP2C9*3 3种等位基因的频率分别为96.0%、0.3%和3.7%。男性和女性之间CYP2C9基因型(P=0.94)和等位基因频率(P=0.28)分布比较,差异无统计学意义。VKORC1-1639G>A基因分型检测结果显示,野生型VKORC1-1639GG占1.7%(22例),杂合突变型VKORC1-1639GA占19.7%(262例)和纯合突变型VKORC1-1639AA占78.6%(1 046例)。VKORC1-1639G>A位点G和A 2种等位基因频率分别为11.5%和88.5%。男性和女性之间VKORC1-1639G>A基因型(P=0.63)和等位基因频率(P=0.34)分布比较,差异无统计学意义。结论 中国南方客家人群CYP2C9和VKORC1-1639G>A基因遗传多态性与中国不同地区汉族人群和少数民族之间存在差异。基因分型检测可为指导梅州地区客家人群华法林个体化用药治疗提供重要分子遗传依据。

一种新型多元均相时间分辨荧光免疫分析方法的建立

制备出具有光学特异性的3种不同颜色量子点纳米微球和铽螯合物,分别与CEA、AFP和HBsAg的两株抗体偶联,采用双抗体夹心法模式,充分利用两株抗体与抗原的相互作用,通过采集不同量子点发出的荧光信号,根据其信号的强弱判定标记在量子点纳米微球上的抗体结合的抗原的量,从而实现多元待分析物的定性定量分析.结果表明,量子点的荧光信号与CEA、AFP和HBsAg抗原浓度呈线性关系,其函数分别为:lgY=2.791 73+0.915 84lgX(R=0.998 08)、lgY=3.695 43+0.456 44lgX(R=0.998 48)和lgY=4.128 98+0.409 45lgX(R=0.998 45),分析灵敏度分别为:0.44、0.24和0.02ng/mL.

N^(6)-腺苷酸甲基化修饰在心血管疾病中的研究 进展

N^(6)-腺苷酸甲基化(m6A)是真核生物mRNA最常见的转录后修饰,是一种动态可逆的过程。m6A受甲基化酶、去甲基化酶及甲基化阅读蛋白的调节,参与多种基因表达调控和疾病的病理过程。随着测序技术的发展,m6A在心血管疾病中的研究逐渐增多。该文介绍m6A在心血管疾病中的相关研究,探讨其在心血管疾病发生中的作用及可能机制。

胎球蛋白B与心血管疾病的研究进展

随着社会老龄化的进展以及人类疾病谱的不断变化,心血管疾病已经成为威胁人类健康的首要死亡病因之一。胎球蛋白B(Fetuin-B)是一种具有促炎、调节糖脂代谢和胰岛素抵抗等作用的肝分泌细胞因子,其通过参与炎症反应、诱导氧化应激以及调控信号通路等多种机制在动脉粥样硬化性心血管疾病、高血压、心肌缺血再灌注损伤等心血管疾病中发挥重要作用。目前关于Fetuin-B的研究备受广大研究者关注。阐明Fetuin-B的生物学功能与心血管疾病的关系具有重要意义,可为进一步开展Fetuin-B的基础研究和临床转化应用提供新思路和新策略。

中国南方客家人群乙醛脱氢酶2基因多态性与急性心肌梗死的相关性研究

目的探讨中国南方客家人群中乙醛脱氢酶2基因(ALDH2)Glu504Lys多态性与急性心肌梗死(AMI)之间的关系。方法本研究共纳入2016年5月至2018年5月在梅州市人民医院就诊AMI患者252例及同期健康体检者264例,提取外周血基因组DNA,通过聚合酶链反应(PCR)和DNA微阵列芯片法检测ALDH2 Glu504Lys基因多态性。结果AMI组ALDH2GG、GA和AA基因型所占比例分别为45.63%、44.05%和10.32%,G和A等位基因频率分别为67.66%和32.34%。对照组ALDH2GG、GA和AA基因型所占比例分别为56.82%、35.98%和7.20%,G和A等位基因频率分别为74.81%和25.19%。ALDH2基因型和等位基因频率的分布在两组间差异有统计学意义,其中A突变等位基因携带者在AMI组的比例较高(P<0.05)。Logistic回归分析显示,年龄、性别、饮酒、高血压病、糖尿病、高脂血症是AMI的危险因素。此外,ALDH2GA/AA基因型是中国南方客家人群AMI发生的独立危险因素(OR=1.906,95%可信区间:1.278~2.844,P=0.002)。结论ALDH2基因Glu504Lys位点多态性可能与中国南方客家人群AMI相关,其中A等位基因可能是AMI发生的易感等位基因。

急性心肌梗死后心脏破裂的研究进展

心脏破裂(CR)是急性心肌梗死(AMI)极为严重且致命的机械并发症,发病急骤且病死率极高。近年来随着再灌注治疗的广泛开展以及胸痛中心建设,AMI的病死率呈现下降趋势,但CR临床救治成功率仍然很低,其占AMI并发症的死亡率几乎没有改变。因此,积极防治濒临CR者和尽早确诊CR尤为重要。本文通过对AMI患者并发CR流行病学、发病机制、临床表现与诊断以及治疗与预防等进行综述,旨在介绍AMI并发CR的防治研究进展。

人促黄体生成素光激化学发光免疫分析法的建立

目的采用光激化学发光免疫分析技术建立快速定量检测人促黄体生成素(hLH)的方法。方法用2株配对的hLH单克隆抗体,1株hLH单克隆抗体包被受体微球,另1株hLH单克隆抗体先用生物素标记,再与链霉亲合素的供体微球共同组成人促黄体生成素光激化学发光免疫分析试剂,进而优化反应体系并对试剂的各项性能指标进行评价。结果自制hLH试剂分析灵敏度为0.164 U/L,线性测量范围为0.164～135 U/L,分析内和分析间的精密度分别为4.3%～6.1%和7.4%～8.1%,均低于10%,与hTSH、hFSH和hCG无明显交叉反应,158份临床血清样本用本试剂与罗氏电化学发光检测试剂盒平行检测,对所测数值采用配对t检验分析,结果显示两种方法检测结果差异无统计学意义(t=-1.468,P=0.07)。结论自制hLH光激化学发光免疫分析试剂各项指标均能达到临床要求,有望替代国外同类产品。