miR-145-5p调控Survivin通过凋亡通路对食管癌生物学行为的影响

目的:探讨miR-145-5p靶向调控Survivin及凋亡信号通路对食管癌凋亡、侵袭和迁移的影响。方法:采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测食管癌组织和细胞系中miR-145-5p、Survivin mRNA相对表达量。双荧光素酶报告基因分析验证miR-145-5p和Survivin的靶向调控关系。通过RT-qPCR法测定细胞转染后miR-145-5p和Survivin mRNA的相对表达量。Western blot检测凋亡通路中BCL2、MDM2和Caspase-3蛋白的表达。通过MTT、流式细胞术、划痕愈合实验及Transwell小室实验检测TE-1细胞存活能力、凋亡率、迁移率及侵袭能力。结果:与癌旁组织相比,miR-145-5p在癌组织中表达低,而Survivin表达高(P<0.05)。与正常食管黏膜上皮HEEC细胞相比,食管癌TE-1细胞中miR-145-5p低表达,Survivin高表达(P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验证实,miR-145-5p和Survivin间存在靶向调控关系。与未转染和转染miR-145-5p对照物的TE-1细胞相比,转染miR-145-5p模拟物后可显著增加miR-145-5p的表达,抑制Survivin mRNA的表达,同时BCL2和MDM2蛋白的表达下降,Caspase-3表达上升,促进细胞凋亡,抑制了细胞活性、侵袭和迁移能力(P<0.05)。结论:通过miR-145-5p的负向调控,Survivin表达被抑制,凋亡通路被激活,从而促进细胞凋亡,抑制食管癌细胞存活,侵袭和迁移能力。

miR-9-5p对肺腺癌细胞增殖和侵袭迁移能力的调控作用及其机制

目的观察微小RNA(miR)-9-5p对肺腺癌细胞增殖和侵袭迁移能力的调控作用,并基于痉挛性截瘫20(SPG20)基因及Notch信号通路探讨相关机制。方法培养肺腺癌细胞株A549并分为抑制物组、阴性对照组和未转染组,抑制物组和阴性对照组分别转染miR-9-5p抑制物和阴性对照,未转染组不进行转染;采用MTT法检测细胞增殖能力,Transwell小室实验检测细胞侵袭能力,划痕愈合实验检测细胞迁移能力,Western blotting法检测Notch信号通路相关蛋白[E-钙黏蛋白(E-cadherin)、Notch1、Snail和基质金属蛋白酶2(MMP-2)]。采用TargetScan(http://www.targetscan.org/vert_80/)预测miR-9-5p与SPG20基因结合位点,并用双荧光素酶报告基因分析进行验证;检测肺腺癌组织和细胞中的miR-9-5p、SPG20 mRNA和蛋白;将A549细胞分为抑制物组、阴性对照组和未转染组,采用RT-PCR法检测各组细胞中的SPG20 mRNA。结果培养12、24、36、48 h时miR-9-5p抑制物组细胞增殖能力低于阴性对照组和未转染组(P均<0.05)。抑制物组穿模细胞数和细胞迁移距离低于阴性对照组和为转染组(P均<0.05)。抑制物组Notch1、Snail、MMP-2蛋白表达低于阴性对照组和未转染组,E-cadherin蛋白表达高于阴性对照组和未转染组(P均<0.05)。SPG20基因存在连续的可以与miR-9-5p互补的核苷酸序列;共转染SPG20-WT和miR-9-5p质粒的A549细胞相对荧光素酶活性低于其他细胞(P均<0.05)。肺腺癌组织和细胞中miR-9-5p高表达、SPG20mRNA和蛋白低表达(P均<0.05),肺腺癌组织中miR-9-5p与SPG20 mRNA表达呈负相关(r=-0.914,P<0.05)。抑制物组SPG20 mRNA表达高于阴性对照组和未转染组(P均<0.05)。结论miR-9-5p能够抑制肺腺癌细胞的增殖能力及侵袭、迁移能力,作用机制可能与负性调节SPG20基因表达及调控Notch信号通路有关。

乙酰基转移酶KAT2A和Survivin蛋白乙酰化在食管癌中的相关性研究

目的 探讨食管癌组织中乙酰基转移酶2A(KAT2A)表达与Survivin蛋白乙酰化水平,分析二者在食管癌发生过程中的相关性。方法 选取70例食管鳞癌组织及其癌旁正常食管黏膜组织。实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测Survivin和KAT2A mRNA的表达,免疫组化及Western blotting检测Survivin和KAT2A的蛋白表达,免疫荧光验证Survivin和KAT2A在癌组织中的定位及表达;免疫共沉淀检测Survivin乙酰化。分析Survivin蛋白乙酰化与KAT2A的相关性及其二者与食管癌临床病理特征的关系。构建KAT2A RNA干扰序列,脂质体介导法转染至食管癌EC109细胞。应用qRT-PCR和Western blotting检测转染siRNA-KAT2A的食管癌EC109细胞中KAT2A mRNA和蛋白表达水平,免疫共沉淀检测EC109细胞中Survivin蛋白乙酰化水平。结果 食管癌组织中Survivin和KAT2A mRNA相对表达量高于癌旁组织(P<0.05);食管癌组织中Survivin和KAT2A蛋白呈高表达,而癌旁组织则呈低表达。免疫荧光证实Survivin和KAT2A蛋白在癌组织中同时呈现高表达状态,二者主要表达于细胞质中,部分表达于细胞核中。食管癌组织中Survivin蛋白发生了乙酰化,且食管癌组织中的乙酰化率显著高于癌旁组织(P<0.05);在食管癌组织中Survivin乙酰化和KAT2A表达呈正相关(r=0.517,P<0.05);Survivin乙酰化和KAT2A表达与食管癌的TNM分期、分化程度和淋巴结转移有关(P<0.05)。体外实验显示,RNA干扰下调KAT2A对食管癌细胞Survivin mRNA和蛋白表达量均无影响(P>0.05),但Survivin蛋白的乙酰化水平显著降低(P<0.05)。结论 在食管病变过程中KAT2A参与了Survivin乙酰化修饰,其高表达可能是Survivin乙酰化修饰重要的前期分子事件,在食管癌的诊治中具有潜在应用价值。

肺硬化性血管瘤六例误诊分析

目的 探讨肺硬化性血管瘤（pulmonary sclerosing hemangioma,PSH）的临床诊断与外科治疗,及其预后情况,以提高对PSH的认识.方法 对6例PSH患者的诊断和治疗情况进行回顾性分析.结果 6例PSH患者,男3例,女3例,年龄23～68岁,平均46岁,均为体检时发现,肺内放射影像学表现为边界清晰的圆形或椭圆形阴影,术前均未明确诊断,4例行肿瘤摘除,2例行肺叶切除,均未行淋巴结清扫,无术后并发症.1例1.5年后死于全身转移.结论 PSH临床少见,术前多易误诊,需术后病理确诊.手术是治疗PSH的有效措施.

细胞遗传学在急性早幼粒细胞白血病的诊断及预后评估中的作用

目的探讨细胞遗传学在急性早幼粒细胞白血病(APL)的诊断及预后评估中的应用价值。方法应用常规细胞遗传学分析APL初诊患者39例,采用R显带技术进行染色体核型分析。随访分析完全缓解率、复发率。结果39例APL患者中,染色体异常38例,其中30例为典型t(15;17)易位,8例为涉及15和17号染色体的复杂核型。形态学误诊为M2和M5各1例,经核型分析确诊。经全反式维甲酸和(或)化疗联合诱导治疗,37例获完全缓解,2例具有复杂核型者未取得完全缓解,6例具有复杂核型者第1次完全缓解后3年内复发,复发率86%(6/7),其他核型组完全缓解后3年内复发率仅10%(3/31)。结论细胞遗传学对细胞形态不典型APL具有确诊价值,复杂染色体异常者预后不佳。

食醋干预下大鼠血清对食管癌EC109细胞凋亡及Survivin表达的影响

目的研究长期高醋饮食SD大鼠血清诱导食管癌EC109细胞凋亡及其对Survivin蛋白表达的影响。方法采用普通SD大鼠血清和长期高醋饮食条件下SD大鼠血清培养食管癌EC109细胞。I组:以含20%灭活普通SD大鼠血清培养液培养食管癌EC109细胞;II组:以含20%灭活长期高醋饮食干预条件下SD大鼠血清培养液培养食管癌EC109细胞;应用流式细胞仪分别采用Annexin V-EGFP/PI双染法和亚倍体峰法检测两组食管癌细胞早期和中晚期凋亡率;应用Western blot方法检测Survivin蛋白的表达水平。结果 II组细胞凋亡率明显高于I组,有统计学差异(P<0.05);II组细胞中Survivin蛋白的表达水平明显低于I组,差异有统计学显著意义(P<0.05)。结论长期高醋饮食SD大鼠血清能促进食管癌EC109细胞的凋亡并抑制Survivin蛋白的表达。

肺癌患者外周血液端粒酶活性检测结果与预后的关系

目的了解肺癌患者外周血液端粒酶活性（TA）检测结果与预后的关系。方法应用端粒重复序列扩增-微孔板杂交-酶联免疫分析检测肺癌患者外周血液TA，比较TA阳性与阴性患者3年生存情况。结果TA阴性组52例患者1～3年生存例数分别为31例、10例和2例，TA阳性组45例患者1～3年生存例数分别为12例、1例和0例，TA阴性组的1～2年生存例数显著多于阳性组（P〈0．05）。结论检测外周血液TA有助于肺癌预后的评估，TA阴性者的生存情况明显好于阳性者。

食醋对二甲基亚硝胺诱导的大鼠食管癌的抑制作用

目的应用食醋对二甲基亚硝胺(NDMA)诱发大鼠食管癌动物模型进行干预,观察大鼠食管癌患病率,研究食醋对食管癌的抑制作用。方法随机将80只SD大鼠平均分成两组。Ⅰ组:普通饲料、普通饮水饲养,每周一次NDMA皮下注射,10 mg/kg;Ⅱ组:含醋饲料、含醋饮水饲养,每周一次NDMA皮下注射,10 mg/kg。24周后,解剖各组存活大鼠,取食管组织,常规染色切片后行病理组织学观察,记录两组实验鼠食管癌发病数据。以各组实验鼠食管癌发病率数据为对比参数,对数据进行统计学分析。结果Ⅰ组存活34只大鼠中有32只罹患食管癌,患病率为94.12%。Ⅱ组存活38只实验鼠中有28只患食管癌,患病率为73.68%。Ⅱ组大鼠食管癌患病率明显低于Ⅰ组,差异有显著性(P<0.05)。结论食醋对NDMA诱导的SD大鼠食管癌有一定的抑制作用。

胸外伤后左肺内巨大气肿一例

1病例报告患者男,30岁。主因胸外伤后咯血3d,于2009年10月23日入院。患者于入院3d前从行驶车上跳下,伤及头胸,当时胸痛、气短,于咳嗽、活动时加重,伴有咯血,为新鲜血,量不多。当地医院胸CT：肺挫伤,左肺巨大空洞,为进一步诊治而来我院就诊。体格检查：胸廓正常,双肺呼吸音清晰,

大蒜素对肺癌细胞增殖与凋亡的影响

目的探讨大蒜素对人肺癌H460细胞增殖与凋亡的影响。方法体外培养人肺癌H460细胞,分为5组,分别加入0、12.5、25.0、50.0、100.0μmol/L大蒜素,每个浓度分别培养24、48、72 h,酶标仪测量吸光度OD值,计算细胞增殖率;将0、12.5、25.0、50.0、100.0μmol/L大蒜素加入H460细胞,培养24 h后采用碘化丙啶染色,流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果同浓度大蒜素作用的H460细胞,培养时间越长,细胞增殖率越低(P均<0.01);同等培养时间下,H460细胞增殖率随大蒜素浓度增高而降低(P均<0.01);H460细胞增殖率与大蒜素浓度呈负相关(r=-0.18,-0.31,-0.72,P均<0.05)。H460细胞凋亡率随大蒜素浓度增加而增高(P<0.01);H460细胞凋亡率与大蒜素浓度呈正相关(r=0.31,P<0.05)。结论大蒜素能够降低人肺癌H460细胞的增殖率,并促进其细胞凋亡,具有良好的抗肿瘤作用。

黄芪对慢性阻塞性肺病大鼠气道炎症干预作用实验研究

目的探讨黄芪注射液对慢性阻塞性肺病(COPD)大鼠气道炎症的干预作用。方法30只SD大鼠随机分为3组:正常对照组、COPD组、黄芪干预组。观察支气管肺泡灌洗液(BALF)和血清中白细胞总数及百分比,IL-8、TNF-α浓度变化及肺组织形态学改变。结果干预组肺组织形态学改变较COPD组减轻但未恢复正常;干预组BALF和血清中IL-8及TNF-α水平、白细胞总数、中性粒细胞绝对计数、中性粒细胞百分比较COPD组降低(P<0.05)。结论黄芪注射液可降低COPD大鼠血清及BALF中IL-8及TNF-α水平,并使炎症细胞减少,对COPD大鼠气道炎症具有保护作用。

板蓝根多糖促进NKG2D配体表达增强NK细胞对食管癌细胞的杀伤作用及机制研究

目的:研究板蓝根多糖(RIP)影响NK细胞对食管癌细胞杀伤作用的分子机制。方法:MTT法检测细胞增殖率,Western blot检测增殖相关蛋白CyclinD1、p21和p27的表达,ELISA法检测培养上清中IFN-γ和TNF-α的表达,流式细胞术检测NKG2D配体MICA、MICB、ULBP1和ULBP2的表达,钙黄绿素释放法(CARE-LASS)检测NK细胞对食管癌细胞的杀伤率。结果:RIP可促进NK-92细胞增殖,抑制食管癌Eca-109细胞增殖,且具有显著剂量依赖性。食管癌可促进NK细胞中TNF-α和IFN-γ的表达。RIP可促进食管癌细胞Eca-109中NKG2D配体MICA、MICB、ULBP1和ULBP2的表达,促进与食管癌细胞联合作用后NK细胞中TNF-α和IFN-γ表达,提高NK-92细胞对食管癌Eca-109细胞的杀伤活性。结论:RIP通过提高食管癌Eca-109细胞中NKG2D配体表达,促进NK-92细胞中TNF-α和IFN-γ表达,增强NK-92细胞对食管癌细胞的杀伤作用。

洛铂、多西他赛和艾迪注射液联合用药对72例ⅢB期非小细胞肺癌的综合疗效分析

目的:考察由斑蝥、人参、刺五加、黄芪组成的艾迪注射液与洛铂、多西他赛化疗联合运用对72例ⅢB期非小细胞肺癌的疗效。方法:收集2010年10月至2011年5月在我院收治的ⅢB期非小细胞肺癌患者134例,随机分为化疗组63例和艾迪联合组72例。结果:化疗组完全缓解2例,部分缓解24例,稳定5例,进展32例,总有效26例;艾迪联合组完全缓解6例,部分缓解36例,稳定8例、进展22例,总有效42例,艾迪联合组总有效例数显著高于对照组(P<0.05);两组别化疗后主要的不良反应为骨髓抑制,化疗组与艾迪联合组外周血白细胞降低例、血小板下降例及恶心、呕吐的Ⅱ度及以上发生例有显著性差异(P<0.05);血红蛋白降低,肝功能降低的Ⅱ度及以上的发生例无显著性差异(P>0.05)。两组别间化疗顺应性有显著性差异(P<0.05);化疗组1、2、3年生存例(率)分别为43(68.3%)、29(67.4%)和10例(34.5%),艾迪联合组1、2、3年生存例(率)分别为60(83.3%)、45(75.0%)和29例(64.4%),与化疗组比较,艾迪联合组1、3年生存率显著升高(P<0.05)。结论:艾迪注射液联用洛铂与多西他赛化疗可有效提高治疗总有效率、减少毒性反应、提高化疗顺应性和提高远期生存率。

犬肋骨膜肌瓣食管成型术的应用解剖及实验研究

目的：为带血供的骨膜肋间肌瓣食管成型术提供解剖学和形态学基础。方法：取１０条犬的肋骨膜肌瓣标本，将其上的第７肋间血管灌注后观察分布情况。手术先切除部分第７肋骨，然后将保留的骨膜和上下肋间肌修整成一个带血管蒂的骨膜肌瓣。瓣长８５～ １２．５ ｃｍ，宽４．５ ｃｍ，以此肌瓣修复 １／２直径４ｃｍ长的食管缺损。结果：带蒂的骨膜肌瓣由肋间动脉的两条主干分支供血，具有良好的血运。尽管处死犬检查手术修复部位轻度狭窄，但术后实验犬与正常犬在进食与活动上相同。结论：带血供的肋骨膜肌瓣是胸段食管成型的良好组织材料。

老年肺癌患者生存质量的影响因素

目的评估老年肺癌患者生存质量(QOL)影响因素,为进一步改善患者QOL提供参考。方法老年肺癌患者170例,采用QLQ-C30量表评估QOL,其影响因素采用Logistic回归分析。结果年龄>70岁组患者症状领域得分明显高于≤70岁组(P<0.05);有配偶患者总体健康评价和其他6项评价明显优于无配偶(P<0.05);高学历患者各领域评价优于低学历;手术治疗患者总体评价、功能评价、症状和其他6项评价明显优于非手术治疗(均P<0.05)。Logistic回归分析结果显示婚姻状况、手术治疗与总体健康领域评分有关(P<0.05),其中手术治疗对于总体健康影响更大。结论年龄、婚姻状况、学历和是否手术治疗对老年肺癌患者QOL均有影响,多因素分析显示手术治疗可以大大改善患者QOL。

外科治疗伴有多种并发症的老年肺癌患者82例

肺癌是当今世界上对人类健康与生命危害最大的恶性肿瘤,其发病率和病死率增长居恶性肿瘤首位。随着人口老龄化,老年肺癌的发病率也在逐年攀升,且肺癌的发病率随年龄的增大而提高,高峰约在75岁,75岁以后发病率有下降趋势。预计今后在确诊肺癌的患者当中,70岁以上的老年患者将超过40%。目前肺切除术仍是治疗肺癌的最好方法之一。而老年患者随年龄增加各器官发生退行性变化,机体免疫力低下,常伴有各种并发症,手术耐受性差,做好围术期处理非常重要。本文总结我院2007年10月至2010年10月手术治疗的65岁以上老年肺癌患者82例,并进行临床分析。

食管鳞癌组织中环氧化酶-2、P-糖蛋白的表达及临床意义

目的探讨环氧化酶-2(COX-2)与P-糖蛋白(P—gp)在食管鳞癌组织中的表达及其临床意义。方法选择60例食管鳞癌患者肿瘤组织与正常组织,应用免疫组织化学方法检测COX-2和P—gp在食管鳞癌组织及正常食管组织中的表达情况。结果食管癌组织COX-2表达的阳性率为60.0%(36/60),正常食管组织未表达。COX-2的表达随着病变浸润的加深,分化程度的升高,淋巴结的转移而逐渐上调(x^2=8.140,P=0.043;x^2=15.952,P=0.001;x^2=13.302,P=0.001),COX-2的表达与TNM分期相关,Ⅲ、Ⅳ期中的表达明显高于Ⅰ、Ⅱ期(x^2=17.778,P=0.001)。食管癌组织P—gp表达的阳性率为45.0%(27/60),正常组织阳性率为20.0%(12/60),差异有统计学意义(P<0.01)。P—gp的表达随着肿瘤浸润深度的加深,淋巴结的转移而表达升高(x^2=10.649,P=0.014;x^2=6.877,P=0.009)。P—gp的表达与食管癌的TNM分期相关,Ⅲ+Ⅳ期中的表达高于Ⅰ+Ⅱ期(x^2=5.455,P=0.020)。COX-2与P—gp在食管鳞癌组织的表达呈正相关(r=0.397,P=0.021)。结论 COX-2、P—gp参与了食管癌发生、发展、转移的多个环节,COX-2可以通过某种机制调控P—gp的表达,从而参与食管癌多药耐药的调节。

贲门部黏膜撕裂综合征与自发性食管破裂27例

目的联合报道贲门部黏膜撕裂综合征和自发性食管破裂27例,分析比较两种疾病的特点。方法贲门部黏膜撕裂综合征21例,均经胃镜检查确诊,其中出现呕血症状者20例。自发性食管破裂6例,经钡餐线或食管镜检查确诊。患者均有剧烈呕吐病史,5例呕吐前酗酒。结果贲门部黏膜撕裂综合征21例均治愈,其中1例急症手术。自发性食管破裂手术治疗4例,非手术治疗2例。死亡2例。结论2种疾病的发生均与呕吐有关,但是其发病机制和胃好程度不同。贲门部黏膜撕裂综合征经非手术治疗多可治愈。自发性食管破裂多需要急症手术,而且死亡率与误诊率均较高。