IL-6过表达慢病毒稳转细胞系构建及其对HBsAg、HBeAg、HBV-DNA表达影响

目的构建白介素-6(IL-6)过表达慢病毒稳转细胞系,探讨其对乙肝表面抗原(HBsAg)、乙肝e抗原(HBeAg)、乙肝病毒DNA(HBV-DNA)表达的影响。方法以Huh7细胞gDNA为模板,通过PCR技术扩增获得IL-6片段并克隆到pMIGR1载体上,测序鉴定正确后,分别用pMIGR1质粒和pMIGR1-IL-6质粒与慢病毒包装质粒pCL-10A1共转染293T细胞,获得重组慢病毒颗粒,分别感染Huh7细胞,嘌呤霉素筛选出成功表达目的质粒的阳性细胞,分别命名为Huh7/con和Huh7/IL-6,电化学发光法检测细胞培养上清液中IL-6表达水平;qRT-PCR技术检测细胞中IL-6 mRNA表达水平;化学发光微粒子免疫检测法检测HBsAg、HBeAg表达水平,PCR-荧光探针法检测HBV-DNA表达水平。结果通过测序验证成功构建pMIGR1-IL-6质粒;通过慢病毒介导成功筛选出Huh7/con和Huh7/IL-6细胞系;电化学发光法及qRT-PCR结果显示,与对照组Huh7/con细胞系比较,Huh7/IL-6细胞系培养上清液IL-6水平及细胞中IL-6 mRNA水平显著升高;pcDNA1.3质粒转染Huh7、HepG2、Huh7/IL-6细胞6、12、24、48 h后上清液中IL-6表达水平显著升高;20 ng/ml IL-6处理pcDNA1.3质粒转染后的Huh7和HepG2细胞6、12、24、48 h后上清液中HBsAg、HBeAg、HBV-DNA表达水平显著下降;pcDNA1.3质粒转染Huh7/IL-6细胞6、12、24、48 h后上清液中HBsAg、HBeAg、HBV-DNA表达水平显著下降。结论成功构建IL-6慢病毒表达载体,并建立稳定过表达IL-6的Huh7细胞系;pcDNA1.3质粒转染可使IL-6表达上调;IL-6可使HBsAg、HBeAg、HBV-DNA表达水平下降。

干扰素λ3在慢性乙型肝炎患者血清中的表达及临床意义

目的了解慢性乙型肝炎患者血清IFNλ3水平,探究其临床意义及其与核苷和核苷酸类药物治疗的关系。方法选取2017年1月-2018年5月在安徽医科大学第二附属医院就诊的慢性乙型肝炎患者119例,收集同期HBsAg阴性的22例健康体检者作为健康对照。采用ELISA法检测血清中IFNλ3的表达水平,比较慢性乙型肝炎患者与健康人血清IFNλ3水平差异,分析慢性乙型肝炎患者血清IFNλ3水平与HBeAg的关系,观察不同核苷和核苷酸类药物治疗慢性乙型肝炎患者的血清IFNλ3水平,以及核苷和核苷酸类药物对外周血单个核细胞培养上清中IFNλ3水平的影响。满足正态性和方差齐性的计量资料多组间比较采用方差分析;对非正态或方差不齐的计量资料,两组比较采用Wilcoxon秩和检验,多组比较采用Kruskal-Wallis H检验,进一步两两比较采用Nemenyi法检验。相关性分析用Spearman相关性分析法。结果慢性乙型肝炎患者血清IFNλ3水平明显低于健康对照组[14. 7(5. 9～28. 5) pg/ml vs 76. 1(39. 4～112. 0) pg/ml,Z=-10. 114,P <0. 001]。未抗病毒治疗的慢性乙型肝炎患者血清IFNλ3水平与log HBV DNA呈负相关(r=-0. 621,P <0. 001)。HBeAg阴性慢性乙型肝炎患者血清IFNλ3水平高于HBeAg阳性患者,2组间差异有统计学意义[16. 4(9. 0～31. 3) pg/ml vs 8. 7(2. 9～23. 2) pg/ml,Z=-2. 205,P=0. 02]。服用阿德福韦酯抗病毒治疗的患者血清IFNλ3水平显著高于服用恩替卡韦、替诺福韦、替比夫定、拉米夫定治疗的患者,差异均有统计学意义(P值均<0. 05);体外实验核苷和核苷酸类药物处理的外周血单个核细胞培养上清中未见IFNλ3水平明显升高。结论慢性乙型肝炎患者血清IFNλ3显著低于健康人群,阿德福韦酯抗病毒治疗患者具有较高的血清IFNλ3水平。

《杜拉拉升职记》:现代职场的生存体验

电影《杜拉拉升职记》以五彩斑斓的光影给我们制造了一个关于职场、爱情、事业的美好幻像。穿梭于写字间的外企白领阶层,他们的工作生活方式构成了脱胎于西方公司文化的"西洋景",在锦衣华裘的精美包装下,他们的工作状态、生活状态是什么样的呢?相当大程度上,他们的生存状态代表了当下白领阶层的生活缩影。

ofo共享单车资金管理现状及对策分析

一个企业要想维持正常的运转,就必须要拥有充足的运营资金。强化运营资金使用效能,多样化运营资金使用方式,对于企业的发展大有帮助。然而,目前很多企业在资金管理方面存在如资金营运能力较低、资金流转不通畅等问题,这些都对企业的长久稳定发展十分不利。ofo之所以出现深陷"退押金"风波的局面,是由多方面因素造成的。因此解决好营运资金管理中存在的问题,有利于企业财务管理目标的实现和发展。在此,我将以ofo共享单车资金管理方面存在的问题为例,浅析ofo共享单车资金管理现状及对策分析。

国有企业财务分析存在的问题及对策思考

财务分析在国有企业管理中发挥着越来越重要的作用,这就要求国有企业的经营者提高对财务分析的重视程度, 财务人员也要转变传统观念,重塑现代企业思维模式,以提高财务分析的编制水平。本文通过对国有企业财务分析现状及其 存在问题的分析,提出相应的对策和建议,从而推动国有企业财务分析现状的改善。

磅礴大气的艺术美——大型抒情寓言豫剧《愚公移山》

在纪念改革开放30周年河南省戏剧演出季暨省第十一届戏剧大赛参赛剧目中，大型抒隋寓言豫剧《愚公移山》以其磅礴的气势、震撼人心的力量在本次大赛中拔得头筹，给观赏过这个剧目的观众留下深刻的难以泯灭的印象。实力雄厚的主创人员共同努力加上演员精湛的表演使该剧成为一部气势宏大、情感悲壮、美不胜收的精品力作。

优秀的灶书唱本《郭丁香》——兼谈与乐府民歌《孔雀东南飞》的比较赏鉴

在我国漫长的文学历史长河中,南北朝时期出现的代表汉乐府民歌最高艺术成就的长篇叙事诗《孔雀东南飞》与《木兰辞》,在文学史上被赞誉为"乐府双璧"。而本文所要论及的长篇叙事诗《郭丁香》,是河南省固始县收集整理的流传于豫南民间曲种"灶书"

回响的天籁,民间艺术的薪火相传——电影《百鸟朝凤》观后

十多年前,看陶泽如在电影《大鸿米店》里演一个精壮长工,隔过十多年时光,他在《百鸟朝凤》里演唢呐艺人焦三师傅,同样形神酷肖,演活了民间老艺人的那种沧桑、质朴。影片以现实主义风格反映了唢呐艺人生活道路上的酸甜苦辣、喜怒哀乐,而这部电影也成为导演吴天明生命的绝响。

悲壮家国情 忠烈巾帼魂——评新编历史剧《魏敬夫人》

2014年4月1日晚,第三届中国豫剧节在河南艺术中心隆重开幕。河南豫剧院一团演出的新编历史剧《魏敬夫人》作为豫剧节开场大戏,以厚重的历史题材,磅礴大气的人物形象,感人至深的精神理念,赢得了现场评委及观众的共鸣和震撼。该剧由豫剧名家王惠领衔主演,编剧姚金成、雷桂华,导演张平,作曲耿玉卿、黄向峰,体现了河南豫剧的创作水平,被评为本次豫剧节大赛优秀剧目奖。翻阅历史可以得知。

民间说书艺术阵地的守望者——记宝丰“马街说书研究会”会长张满堂

张满堂,男,生于1953年,宝丰县杨庄镇马南村农民,初中文化程度,当过兵。从小就对马街书会耳濡目染的张满堂部队转业后,出于对马街书会及说书文化的深切热爱,感于马街书会需要传承、振兴,在民间自发成立了"马街说书研究会",创办了"马街说书艺术团"。

一曲英雄主义赞歌——感受话剧《红旗渠》的气质

今天,好像不大提及关于英雄的话题,但我们生活中却需要有英雄精神的存在。在这个习惯了或安逸舒适、或琐碎繁杂的生活而逐渐遗忘英雄、消解崇高的时代,《红旗渠》带领我们重温那个充满激情壮志的流金岁月,再次感受英雄精神带给我们的伟大与崇高。河南省话剧院演出的《红旗渠》,始终有一种气质在震撼着观众,激荡着观众,那是火红年代的红旗渠精神所带给你的强烈感受:阳刚之气、英雄气、豪迈之气!

评新编历史剧《李清照》的美中不足

在纪念改革开放30周年戏剧演出暨河南省第十一届戏剧大赛优秀剧目展演中,平顶山市豫剧团的《李清照》给大家留下了深刻的印象。

光山花鼓戏剧本文学简析

豫南的光山花鼓戏是土生土长的戏曲剧种,有二百多年的历史。光山花鼓戏剧目众多,内容丰富且题材广泛,有生活小戏、历史戏、公案戏、神话戏、爱情戏、古代故事戏等。光山花鼓戏的发展经历了时代变迁和风雨洗礼,"清朝时期,花鼓戏被列入‘花部’,不准进城演出;民国时期,国民政府不准花鼓戏与京剧同台,不准登乡宦大雅之堂"[1]。新中国成立后,光山花鼓戏沐浴时代春风“改人改戏”获得新生。

观《浣纱记》断想……

对于美的向往,是构成社会进步的重要动力;对于美的热爱,是人类走向文明的必然追求.