人子宫内膜癌组织中磷酸化细胞外信号调节激酶的检测

目的:检测人子宫内膜癌(EMC)、增生期内膜和非典型增生内膜组织中磷酸化细胞外信号调节激酶(p-ERK)的活化情况,并探讨其与EMC发生、发展的关系。方法:采用免疫组织化学SP法检测45例EMC组织(患者年龄<45岁15例,≥45岁30例;病理学分级:Ⅰ级18例,Ⅱ级17例,Ⅲ级10例;临床分期:Ⅰ期23例,Ⅱ期16例,Ⅲ期6例;有淋巴结转移5例,无淋巴结转移40例;肌层浸润深度<1/2者21例,≥1/2者24例)、20例非典型增生内膜、10例增生期内膜组织中p-ERK的表达,分析其蛋白表达与EMC的病理学分级、临床分期、淋巴结转移、肿瘤肌层浸润深度以及患者年龄的关系。结果:EMC组织中p-ERK阳性表达率(77.78%)高于非典型增生内膜(35.00%)和增生期内膜(10.00%)组织的阳性表达率(χ2=20.926,P<0.05)。且EMC组织中p-ERK蛋白阳性表达率与病理学分级、临床分期、肌层浸润深度有关(P均<0.05),而与患者年龄、淋巴结转移情况无关(P均>0.05)。结论:ERK的激活与EMC的发生、发展有关。

子宫内膜癌组织中Maspin蛋白的表达

目的:检测子宫内膜癌组织中Maspin蛋白的表达,探讨Maspin在子宫内膜癌发生发展中的作用。方法:采用免疫组织化学SP法检测40例子宫内膜腺癌、18例内膜不典型增生及10例正常子宫内膜组织中Maspin蛋白的表达,分析其与子宫内膜癌患者临床病理特征的关系。结果:正常子宫内膜组织、内膜不典型增生组织和内膜癌组织中Maspin蛋白的阳性表达率分别为90.0%、55.6%和42.5%,3组间相比,差异有统计学意义(χ2=7.312,P<0.05)。子宫内膜癌组织中Maspin的表达与手术-病理分期及淋巴结转移有关(P均<0.05)。结论:Maspin的表达降低可能与子宫内膜癌的发生发展和转移有关。

子宫内膜癌中Maspin的表达及其与雌激素受体表达的相关性研究

目的：检测Maspin蛋白在正常子宫内膜、不典型增生及内膜癌组织中的表达，及其与雌激素受体（En）表达的关系，探讨Maspin在子宫内膜癌发生中的作用及其作用机制。方法：免疫组化SP法检测40例子宫内膜腺癌、18例不典型增生及10例正常子宫内膜（对照组）中Maspin蛋白的表达及其与子宫内膜癌患者临床病理特征和ER蛋白表达的关系。结果：Maspin阳性表达在正常子宫内膜组最高（9／10，90％），高于内膜不典型增生组（10／18，55．6％）和内膜癌组（17／40，42．5％），差异有统计学意义（P〈0．05），在内膜癌中FIGOⅠ期的表达（13／20，65．0％）明显高于Ⅱ-Ⅲ期（4／20，20．0％；P〈0．05），无淋巴结转移者（17／34，50．0％）明显高于有淋巴结转移者（0／6；P=0．030），但与组织学分级及肌层浸润程度无关（P〉0．05）。ER在正常子宫内膜、内膜不典型增生及内膜癌组织的阳性表达率分别为（10／10，100．0％）、（13／18，72．2％）和（20／40，50．0％），各组间差异有统计学意义（P〈0．05）；内膜癌组织中FIGOI期的表达（14／20，70．0％）明显高于Ⅱ-Ⅲ期（6／20，30．0％；P〈0．05）；内膜癌高、中、低分化组中ER表达率分别为（11／15，73．3％）、（8／18，44．4％）、（1／7，14．3％），组间差异有统计学意义（P〈0．05）；无淋巴结转移者（20／34，58．8％）明显高于有淋巴结转移者（0／6；P=0．020），肌层浸润≤1／2者（16／24，66．7％）明显高于肌层浸润〉1／2者（4／16，25．0％；P〈0．05）。子宫内膜癌中，Maspin的表达与ER的表达存在正相关关系（r=0．394，P〈0．05）。结论：从正常子宫内膜、内膜不典型增生到内膜癌，Maspin蛋白表达逐渐降低，且其低表达与子宫内膜癌临床分期晚、淋巴结转移有关，并与ER蛋白表达呈一致性，提示Maspin蛋白的表达可能受雌激素调控，参与了子宫内膜癌发生发展和转移过程。

SV40T抗原胃壁细胞特异性表达载体的构建与鉴定

目的:构建在胃壁细胞中特异性表达SV40T抗原的真核表达裁体并进行鉴定.方法:采用酚-氯仿法从昆明小鼠肝细胞中提取基因组DNA,聚合酶链式反应(PCR)扩增H^+/K^+ATPaseβ亚基启动子,产物命名为HK.将PCR产物纯化回收后与pMT18-T载体相连,并将其克隆至真核表达载体pcDNA3.1(-),构建pcDNA3.1(-)/HK;从含SV40T基因片段的质粒p LITAg中酶切回收SV40T基因,与pcDNA3.1(-)/HK相连,构建胃壁细胞特异性表达载体pcDNA3.1(-)/HKSV,并测序鉴定.结果:pcDNA3.1(-)/HKSV用XbaⅠ、BarnHⅠ双酶切可得到1kb H^+/K^+ATPaseβ亚基启动子,2.7 kb SV40T基因与5.4 kb pcDNA3.1(-)载体3条DNA条带.用XbaⅠ、KpnⅠ双酶切电泳,可见到约3.7与5.4 kb的两条DNA条带;用BamHⅠ单酶切电泳,可见到2.7与6.4 kb的2条DNA条带;用EcoRⅠ单酶切,只见到约9.1 kb的1条DNA条带,酶切电泳结果均与设计一致.测序结果显示,H^+/K^+ATPaseβ亚基启动子与SV40T基因成功构建于pcDNA3.1(-)真核表达载体中.结论:构建在胃壁细胞中特异性表达SV40T基因的真核表达载体,为进一步转基因小鼠及胃癌动物模型的建立提供了稳定、可靠的分子工具.

磷酸化蛋白激酶B和p27在宫颈癌组织的表达及意义

目的:探讨宫颈癌组织中磷酸化蛋白激酶B(P-PKB)和p27蛋白的表达及其在子宫颈癌发生、发展中的意义。方法:采用免疫组化SP法检测51例宫颈癌组织,36例宫颈上皮内瘤变(CIN)组织和20例正常宫颈组织中P-PKB蛋白和P27蛋白的表达,并分析它们与宫颈癌临床病理因素的关系。结果:宫颈癌组织中P-PKB的阳性表达率(74.5%)明显高于CIN组(52.8%)和正常宫颈组(15%)(P<0.05),P-PKB蛋白的表达随宫颈癌分化程度下降、临床分期升高而升高(P<0.05),在无淋巴结转移的宫颈癌中的表达明显低于有淋巴结转移癌(P<0.05)。p27蛋白在宫颈癌组织中的阳性表达率(49.0%)明显低于CIN组(80.1%)和正常宫颈组(90.0%)(P<0.05),p27蛋白的表达随宫颈癌分化程度下降、临床分期升高而降低(P<0.05),在无淋巴结转移的宫颈癌中的表达明显高于有淋巴结者(P<0.05)。宫颈癌中P-PKB蛋白表达与p27蛋白表达呈负相关(r=-0.326,P<0.05)。结论:P-PKB蛋白在宫颈癌中过表达,p27蛋白在宫颈癌中表达明显降低,与P-PKB蛋白表达呈负相关,P-PKB蛋白可能通过抑制p27蛋白的表达,促进肿瘤的发生发展。

DCE-MRI与DWI对卵巢癌临床分期诊断价值分析

目的探讨磁共振动态增强(DCEMRI)和扩散加权成像(DWI)在卵巢癌临床分期诊断中的价值。方法回顾性分析我院2014年4月-2016年4月收治的50例卵巢癌患者(卵巢癌组)和同期健康体检的50例健康志愿者(正常组)临床资料。两组受试者均接受DCE-MRI和DWI检查,比较其DCEMRI定量参数[容量转移常数(K^(trans))、速率常数(K_(ep))、血管外细胞外容积分数(V_e)]及DWI表观扩散系数(ADC)值差异。记录不同临床分期卵巢癌患者各DCE-MRI定量参数(K^(trans)、K_(ep)、V_e)及ADC值差异。经ROC曲线评价上述参数对卵巢癌临床分期的诊断效能[曲线下面积(AUC)、敏感度、特异度、约登指数]。结果卵巢癌组ADC值明显低于对照组,K^(trans)、K_(ep)、V_e等DCE-MRI定量参数值则明显高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。不同临床分期卵巢癌患者DCE-MRI定量参数及ADC值比较,均有统计学意义(P<0.05)。卵巢癌临床分期与DCE-MRI定量参数(K^(trans)、K_(ep)、V_e)均呈正相关(r=0.523,0.483,0.356,P均<0.05),与ADC值则呈负相关(r=-0.359,P<0.05)。K^(trans)、K_(ep)、V_e与ADC值诊断卵巢癌临床分期的特异性、敏感性分别为92.6%、83.7%、70.5%、89.2%和88.9%、91.6%、53.4%、92.4%。结论DCE-MRI和DWI均在卵巢癌的临床分期诊断中有较高应用价值。

血清CA125和HE4联合盆腔MR检查在子宫内膜癌中的临床意义

目的探讨血清癌抗原125(CA125)和人附睾蛋白4(HE4)联合盆腔磁共振成像(MR)检查在子宫内膜癌中的临床价值。方法选取该院收治的子宫内膜病变患者96例,分为子宫内膜癌组56例,子宫内膜不典型增生组40例;另选取同期因子宫肌瘤切除子宫的增生期和分泌期子宫内膜组20例为对照组。检测3组的血清CA125和HE4水平,并行盆腔MR检查,对比三者单独或联合检查的灵敏度及特异度。结果子宫内膜癌组血清CA125和HE4水平高于子宫内膜不典型增生组和对照组,子宫内膜不典型增生组血清CA125和HE4水平高于对照组,晚期子宫内膜癌组的血清CA125和HE4水平高于早期子宫内膜癌组,差异均有统计学意义(P<0.05)。CA125、HE4联合盆腔MR检查对子宫内膜癌诊断的灵敏度、特异度及准确性均高于其他指标,差异有统计学意义(P<0.05)。结论血清CA125和HE4是评估子宫内膜癌病情进展情况的重要指标,CA125和HE4联合盆腔MR检查可提高子宫内膜癌诊断的灵敏度和特异性,具有重要的临床参考价值。