MicroRNA在肺小结节鉴别诊断中的研究进展

近些年,随着低剂量计算机断层扫描(low-dose computed tomography,LDCT)的广泛应用,肺癌早期检出率大幅提升,如何有效鉴别肺结节良恶性成为肺癌早期诊断的关键问题之一,尤其是直径<10 mm的肺小结节。液体活检以其标本易于获得、可重复检测和非侵入性的特点有望与其它技术成为肺癌早期联合诊断的手段。mi-croRNA作为液体活检的重要成员,在鉴别肺小结节良恶性方面可发挥重要作用。在此,本文对近年来关于mi-croRNA在肺癌早期诊断及预后判断中相关研究进行了综述,以期为进一步研究microRNA参与多层次、多维度肺小结节鉴别诊断提供参考。

针对副溶血性弧菌toxR基因的RPA-CRISPR/Cas13a荧光快速检测方法的建立及应用

目的探讨并建立非专业实验室场景下恒温、快速及简便的检测副溶血性弧菌的方法.方法本研究针对副溶血性弧菌toxR基因设计特异性引物和成簇规律间隔短回文重复序列(CRISPR)RNA(crRNA),建立基于重组酶聚合酶扩增(RPA)结合CRISPR及其相关蛋白13a(CRISPR-Cas13a)的反应体系,采用自配十二烷基硫酸钠(SDS)核酸快速提取试剂提取样本全基因组,并结合荧光法实现检测结果的可视化判读.结果利用副溶血性弧菌菌株ATCC 17802和其他3种非副溶血性弧菌(溶藻弧菌、河流弧菌和梅氏弧菌)以及3种临床上常见腹泻致病菌(金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌和铜绿假单胞菌)对RPA-CRISPR/Cas13a荧光法的特异性进行验证,结果显示特异性为100.00%;对副溶血性弧菌基因组DNA进行倍比稀释并检测,该方法最低检出限为102 copies/μl.最后,将建立的方法应用于野生型副溶血性弧菌检测,检测结果与TaqMan定量聚合酶链式反应(TaqMan-qPCR)检测结果及基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)鉴定结果一致.结论本研究建立了一种针对toxR基因的RPA-CRISPR/Cas13a检测方法,具有简便、快速、特异性强、结果判读可视化等优点,为非专业实验室场景下的副溶血性弧菌快速检测提供了较好工具.