目的探究新型脑源肽HIBDAP调节氧糖剥夺(oxygen glucose deprivation,OGD)小胶质细胞焦亡的作用。方法将HIBDAP序列与细胞穿膜肽反式转录激活因子(transactivator of transcription,TAT)序列耦联成TAT-HIBDAP。小胶质细胞加入异硫氰酸...目的探究新型脑源肽HIBDAP调节氧糖剥夺(oxygen glucose deprivation,OGD)小胶质细胞焦亡的作用。方法将HIBDAP序列与细胞穿膜肽反式转录激活因子(transactivator of transcription,TAT)序列耦联成TAT-HIBDAP。小胶质细胞加入异硫氰酸荧光素标记的TAT-HIBDAP后,荧光显微镜下观察TAT-HIBDAP进入细胞情况。使用不同浓度TAT-HIBDAP(1、5、10、20μmol/L)干预小胶质细胞后进行OGD,采用乳酸脱氢酶释放实验检测细胞焦亡率。选用抑制细胞焦亡效果最明显的浓度进行后续实验,根据是否进行OGD及HIBDAP处理分为对照组、OGD组、HIBDAP组,透射电镜观察细胞焦亡形态,实时定量聚合酶链反应和蛋白质印迹法检测NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NOD-like receptor family pyrin domain containing 3,NLRP3)炎性小体核酸及蛋白表达情况。结果TAT-HIBDAP可成功进入小胶质细胞。与OGD组比较,低浓度(1、5、10μmol/L)的TAT-HIBDAP干预显著降低细胞焦亡率,其中5μmol/L的效果最明显。与对照组相比,OGD组细胞具有典型的细胞焦亡形态,而HIBDAP组的细胞焦亡形态明显改善。OGD组NLRP3炎性小体的核酸及蛋白表达水平较对照组显著上升,HIBDAP组较OGD组显著降低。结论新型脑源肽HIBDAP通过降低NLRP3炎性小体的表达抑制OGD时的小胶质细胞焦亡。展开更多