浙江省分离到基因Ⅲ型乙型脑炎病毒

目的 分析1982—1983年浙江省媒介蚊虫中流行性乙型脑炎病毒（JEV）的分子特征与基因型别。方法 于1982—1983年从浙江省定海区和义乌市采集蚊虫样本3188只，用于病毒分离。应用C6/36细胞分离病毒，血凝抑制试验鉴定分离株。于2011年对JEV分离株活化，应用空斑形成单位（PFU）法测定病毒滴度；进行乳鼠脑内接种实验；对病毒PrM和E基因区扩增、测序，用生物信息软件将分离株与JEV疫苗株SA14-14-2和浙江2007—2010年JEV进行序列分析比较、并构建进化树。结果 从捕获的3188只蚊虫中，分离出11株可以引起C6/36细胞规律病变的病毒，病变时间为72 h，病毒滴度为2.5～6.47 lg PFU/ml，乳鼠脑内接种病毒后72 h死亡。用病毒PrM区和E基因进行的基因分型分析，浙江1982—1983年分离株属于JEV基因Ⅲ型, 而浙江2007—2010年分离株则属于JEV基因I型。对5株分离株E基因进行分析，病毒间核苷酸同源性在98.9%以上，氨基酸同源性在99.8%以上，5株病毒与疫苗株SA14-14-2之间核苷酸同源性在97.7%以上，氨基酸同源性为99.2%，共有10个共同的氨基酸差异位点，与2007—2010年浙江省JEV相比，核苷酸同源性为87.7%～87.9%，氨基酸同源性在98.8%以上。结论 1982—1983年从浙江省定海和义乌蚊虫中分离到的JEV属于基因Ⅲ型毒株，为浙江省首次报道。