转染乙醛脱氢酶2基因对心肌梗死后心衰小鼠心功能的影响

目的:观察左心室腔内注射法转染乙醛脱氢酶2(ALDH2)基因对急性心肌梗死(AMI)后C57/BL6小鼠心功能的影响。方法:雄性C57BL/6小鼠分3组:(1)对照组(CON,0.1mL0.9%氯化钠);(2)转染带绿色荧光蛋白(BV)的空载体组(blankvector BV,2.0×108pfu.μL-1,0.1mL);(3)转染乙醛脱氢酶2腺病毒载体组(ALDH2,2.0×108pfu.μL-1,0.1mL)。3组小鼠闭合主动脉,左心室分别注射0.9%氯化钠或腺病毒载体,48h后结扎冠状动脉左前降支建立心肌梗死(AMI)模型。4周时分别检测超声心动图,4周处死3组小鼠(n=3)观察ALDH2表达水平,免疫组化检测p53蛋白表达水平,TUNEL法检测心肌细胞凋亡。结果:心脏超声检查显示,术后4周,ALDH2组左室舒张末内径(LVEED)显著低于CON组和BV组,左室短轴缩短率(FS)、射血分数(EF)值则显著提高(均P<0.05)。TUNEL法检测结果表明,左室梗死区域AL-DH2组凋亡细胞明显少于CON组(P<0.001)。免疫组化结果显示,ALDH2组中p53核染色阳性细胞数量远远小于CON组(P<0.001)。结论:ALDH2基因的高表达可以有效地抑制急性心肌梗死后心衰小鼠心肌细胞的凋亡,改善心脏功能,此作用可能是通过抑制p53的表达来实现的。

老年大鼠心肌线粒体的蛋白质组学研究及差异蛋白的功能分析

目的建立并优化心肌线粒体蛋白质组研究的双向凝胶电泳技术平台;筛查心肌线粒体中与衰老相关的蛋白质。为保证差异蛋白初筛结果的可信及下游分析的确定性,对差异蛋白进行再验证,并探讨其生物学功能。方法清洁级雄性SD大鼠随机分为新生组(2d)、成年组(10周)、老年组(12月),提取心肌线粒体,抽提全蛋白质行2-DE,对样品制备、上样量、电泳参数、不同固定方式、不同染色方法、不同离液剂等相关技术进行了优化。应用MALDI-TOF-MS鉴定图像分析出的差异蛋白点,同时进行了心肌组织ATP含量的检测。应用Western blot,RT-PCR检测不同发育阶段心肌线粒体中差异蛋白在蛋白、mRNA水平的表达情况。通过构建腺病毒载体,使用含有差异基因的腺病毒液将差异基因导入MRC-5细胞中,并获得表达,通过检测衰老相关的β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)染色、ROS和细胞周期等指标观察差异蛋白对MRC-5细胞衰老的影响。结果45％乙醇、5％乙酸的固定液对蛋白质固定效果最好;胶体考染和快速银染都是较理想的染色方法;含9M尿素的离液剂所得蛋白点最多;构建了心肌线粒体高分辨率和重复性的双向凝胶电泳图谱。图像分析示凝胶有1100个蛋白点,84个心肌线粒体蛋白表达发生改变,质谱鉴定了43个差异点。其中乙醛脱氢酶2(ALDH2)在老年组大鼠心肌线粒体中表达较成年组下调。差异蛋白多和呼吸链功能,能量代谢,物质运输和应激反应有关。新生组心肌组织ATP含量最低(15．49±1．33)μg ATP／g心肌,老年组心肌组织ATP含量较成年组下降((41．48±2．99)比(59．64±2．68)μg ATP／g心肌, (P<0．01)。能量代谢的生化检测进一步证实了蛋白质组学的结果。Western blot,RT-PCR证实ALDH2在老年组大鼠心肌线粒体中低表达。与对照组细胞相比, ALDH2基因导入后,MRC-5细胞的SA-β-gal染色阳性率下降,ROS水平较对照组下降。细胞周期未见明显改变。结论建立SD大鼠心肌线粒体蛋白质组的2-DE分析技术。鉴定SD大鼠心肌线粒体中在老年组差异表达的蛋白质,该差异蛋白为深入理解衰老的分子机制提供了有益的线索。功能学分析发现,ALDH2能延缓MRC-5细胞衰老的进程。

乙醛脱氢酶2基因多态性与长寿的相关性研究

目的分析乙醛脱氢酶2(ALDH2)在长寿人群中的基因型分布频率,探索ALDH2基因多态性和长寿的关系。方法采集山东省章丘市397名90岁以上长寿老人(长寿组)和有非长寿家族史的161名60-75岁老人(对照组)进行流行病学调查研究。应用变性高效液相色谱技术检测研究对象的ALDH2基因型和等位基因的频率。结果长寿组ALDH2*1／ALDH2*1、ALDH2*1／ALDH2*2和ALDH2*2／ALDH2*2三种基因型频率分别为65．7％,32．7％,1．5％,对照组分别为82．0％, 16．8％,1．2％;长寿组ALDH2*1和ALDH2*2等位基因的频率分别为82．12％和17．88％,对照组分别为90．37％和9．63％。长寿组基因型和等位基因的频率与对照组比较均有显著性差异(P= 0．001)。ALDH2基因型在男、女性别中的分布差异无统计学意义。由于男女性别生理特点不同,随着年龄的增长,男性死亡率越来越高于女性,性别比降到3．84:1,差异无统计学意义(P= 0．076)。长寿组中有181名有家庭长寿史,且其同胞也长寿(P<0．001)。饮酒与ALDH2的基因型有关(P<0．05),但与长寿没有相关性。长寿组的体重指数较对照组低(P<0．01)。长寿组的结婚年龄和生育第一胎年龄较对照组早,而绝经年龄较对照组晚(P<0．01)。根据不同的地理环境、饮食习惯等因素,将该市划为4个地区,发现在不同地区,基因型的分布不同(P<0．001)。LogistiC Regression多因素分析的结果显示,地域差异与长寿相关(P<0．01),基因型亦与长寿相关(P<0．05)。结论ALDH2基因多态性与长寿现象有关联。长寿的原因是多方面的,不但与遗传因素有关,而且与个人、家庭、社会、经济、环境等非遗传因素有着密切关系。推测ALDH2作为一种候选基因,与环境等非遗传因素相互作用,通过调节机体对疾病的反应性而影响寿命,而并非直接地控制人类的最大寿限。

“听、仿、唱”训练提高学生二声部音准能力的策略

随着新课程改革和素质教育的深入推进,音乐课程越来越受到学校、家长和学生的重视。歌唱教学是音乐课程的重要组成部分,也是最能表现学生音乐才能的音乐形式之一。在歌曲演唱过程中,教师应提醒学生重点把握歌曲的音准,避免出现跑调、节奏不合拍等问题,特别是在合唱中,二声部的和声对提高音乐的感染力、增强音乐的层次感具有重要作用。因此,学生要重点把握歌唱的音准。本文从听、仿、唱三个角度,对提高学生二声部音准能力提出了相关策略,希望能够给予音乐教育工作者一定的启发。

从功能对等论视角看《浮生六记》林语堂英译本中文化负载词的省译处理

自从林语堂先生于1935年将《浮生六记》翻译成英文后,该书备受国内外读者喜爱。《浮生六记》是沈复创作的自传体随笔,书中有很多文化负载词,林语堂在翻译时做了很多巧妙地处理。在本文中,笔者以奈达的功能对等理论为理论依据,通过定量研究与定性研究相结合的方法,重点研究英译中文化负载词的省译。研究发现,《浮生六记》中的文化负载词可根据奈达对文化负载词的分类方法分为五类,且笔者根据不同类型的文化负载词,总结出了三条翻译规律。希望本论文能够帮助翻译工作者更好的了解省译,在翻译时选取合适的翻译策略。

解酒药改善心肌梗死后心力衰竭大鼠心脏功能的观察研究

目的观察使用解酒药是否能改善心肌梗死后心力衰竭大鼠的心脏功能。方法将60只体重相近的成年雄性SD大鼠采用冠状动脉结扎法建立急性心肌梗死模型后,随机分为4组,灌胃不同药物,分别为阴性对照生理盐水组(0.3ml/(kg.d)),阳性对照依那普利组(10mg/(kg.d)),解酒药组(0.3g/(kg.d))以及解酒药和依那普利联合用药组(0.3g/(kg.d)解酒药加10mg/(kg.d)依那普利)。所有大鼠术后每组每天定时进行药物干预,并每周定时测量体重。术后4周采集超声心动图各参数(室间隔厚度、后壁厚度、左室舒张末内径、左室收缩末内径、左室短轴缩短率、左室射血分数)来评价大鼠的心功能。结果与术前相比,术后4周解酒药组和联合用药组大鼠的体重无明显变化,而依那普利组和生理盐水组大鼠体重上升。术后4周心脏超声结果显示:与生理盐水组比较,依那普利组、解酒药组和联合用药组的左室射血分数、左室短轴缩短率均有升高(P<0.05),但三组间无显著性差异;而室间隔厚度、后壁厚度、左室舒张末内径、左室收缩末内径等参数,四组间无显著性差异。结论解酒药能有效改善心肌梗死后心力衰竭的大鼠心功能。

家具“专业认识实习”课程思政的教学探索与设计

"专业认识实习"是家具设计与工程专业教学大纲中极为重要的实践类课程。将"思政元素"有机地融入认识实习教学过程中,对于完成"新工科"人才素质需求牵引的教学体系改革具有十分重要的现实意义。在分析"专业认识实习"课程教学现状的基础上,对专业认识实习课程思政教改实施的全过程进行探索和分析,以期为"课程思政"融入家具专业实践类课程教学提供基本思路,从而落实"立德树人"的教育根本任务。