17β-雌二醇对H_2O_2诱导视网膜神经细胞死亡的作用

目的 研究 17β 雌二醇 (βE2 )对培养的视网膜神经细胞的保护作用。方法 应用视网膜神经细胞培养的方法 ,观察H2 O2 、βE2以及雌激素受体阻断剂它莫西芬对视网膜神经细胞的作用。 结果 H2 O2 能显著降低培养的视网膜神经细胞的存活率 ,表现为剂量、时间依赖型。用 βE2预培养细胞 30min后 ,再加H2 O2 继续培养 2 4h细胞存活率明显上升 (P <0 .0 5 )。用它莫西芬预培养细胞后 ,重复上述实验 ,发现它莫西芬不能阻断 βE2的作用。免疫细胞化学鉴定原代细胞中 99%以上的细胞为雌激素受体阴性。结论 H2 O2 能导致培养的视网膜神经细胞的死亡。βE2能降低H2 O2 的毒性作用。它莫西芬不能阻断βE2的保护作用 ,培养的光受体细胞为雌激素受体阴性。提示

17β雌二醇的神经保护作用与磷脂酰肌醇-3-激酶的活性关系

目的:研究17β雌二醇(βE2)保护视网膜神经细胞的作用与磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)的活性关系.方法:应用视网膜神经细胞培养、MTT测定、PI3K活性测定及Western blot分析的方法,观察βE2与视网膜神经细胞PI3K的关系.结果:10μmol/LβE2培养细胞30min后,PI3K的活性开始上升,1h达高峰,12h恢复正常.用βE2直接与细胞匀浆37℃孵育1h,PI3K活性没有改变.而且βE2也未影响PI3K在细胞中的表达.PI3K抑制剂LY294002降低了βE2削弱H2O2的毒性作用.结论:βE2能间接激活细胞中PI3K的活性,LY294002抑制了βE2保护视网膜神经细胞的作用.提示βE2的神经保护作用可能与PI3K的激活有关.

谷胱甘肽对Cu^(2+)-H_2O_2导致关节软骨蛋白聚糖降解的影响

应用小牛关节软骨短期器官温育的方法,研究了谷胱甘肽(GSH)对Cu^(2+)-H_2O_2导致关节软骨蛋白聚糖(PG)降解的影响。结果表明:GSH能非常显著地抑制Cu(2+)-H_2O_2对软骨PG的降解作用,并呈剂量依赖型。用Sepharosc 6B柱层析分析软骨PG降解产物,发现GSH还能消除Cu^(2+)-H_2O_2导致的PG链的断裂,保护PG结构的完整。GSH对Cu^(2+)-H_2O_2的作用机理可能一方面与Cu^(2+)形成了复合物,另一方面使H_2O_2还原为H_2O,而消除了两者对软骨PG的降解作用。

硒对Cu^(2+)-H_2O_2导致关节软骨蛋白聚糖降解释放的影响

应用小牛关节软骨短期器官温育的方法,研究了微量元素硒对Cu^(2+)-H_2O_2导致关节软骨蛋白聚糖(PG)降解释放的影响。结果表明:生理浓度的亚硒酸钠能显著抑制Cu^(2+)-H_2O_2对软骨PG的降解作用。用Sepharose 6B柱层析分析软骨PG降解产物,发现亚硒酸钠却不能消除Cu^(2+)-H_2O_2导致PG分子链的断裂。

硫磺法生产溴氢酸

介绍了制取溴氢酸的过程中用硫磺替代赤磷,从而减少溴的消耗和大气污染,达到降低生产成本提高经济效益的目的。

铒镱共掺锂硅酸盐玻璃的光谱性质

用高温熔融法制备了Er3+ ∶Yb3+ 共掺的锂硅酸盐玻璃 ,在室温下 ,用 976nm半导体激光器泵浦该掺铒玻璃 ,在 15 5 0nm波段实现强的荧光发射 ,中心波长为 1.5 399μm ,荧光半宽高为 5 7.4nm 研究结果表明 ,锂硅酸盐玻璃系统能接受非常高的Er3+ 、Yb3+ 掺杂率 ,有较宽的荧光线宽 ,且具有良好的化学稳定性和热稳定性 。

应用流式细胞术检测17β-雌二醇对H_2O_2诱导的视网膜神经细胞凋亡的保护作用

目的用流式细胞技术(FACS)检测H2O2诱导的视网膜神经细胞凋亡以及17β-雌二醇(βE2)对细胞的保护作用。方法取新生24 h内的SD大鼠进行视网膜神经细胞的原代培养,待细胞培养4-5 d,经不同因素处理后,用MTT法检测细胞存活率,用FACS法检测细胞凋亡率。结果200μmol/L的H2O2能有效诱导视网膜神经细胞凋亡;低浓度的H2O2不能诱导细胞凋亡,但高浓度的H2O2诱导细胞凋亡的同时也导致了正常细胞比率的锐减;10μmol/L的βE2能有效对抗H2O2诱导的视网膜神经细胞凋亡;低浓度的βE2对细胞未表现出保护作用,高浓度的βE2对细胞反而表现出毒性作用。结论一定浓度的βE2在一定范围内能对抗H2O2诱导的视网膜神经细胞凋亡,表现对神经细胞保护的作用。

深化改革建设医学基础实验教学中心

西安交通大学医学院通过加强实验教学硬件条件的建设;确立综合性、研究性、创新性的实验教学体系;建立计算机网络辅助教学平台以及实行新的实验教学考核办法,将学生科研能力的培养融入实验教学,实现了医学实验教学的国际化。

核转录因子激活蛋白-1对PPARδ表达的调控作用

目的研究在过氧化物酶体增长因子活化受体δ(PPARδ)表达中的相关调控因子.方法用RT-PCR扩增人类PPARδ启动子序列,通过Deletion及重组将不同长短的PPARδ启动子序列转化到PGL3-basic载体中,转染LOVO细胞,通过观测各重组体转染活性,确定PPARδ启动子活性区域.再通过电泳迁移率变更分析(EMSA)、突变等方法确定核转录因子激活蛋白-1(AP1)对PPARδ表达的作用.结果 Deletion及重组转染后发现PPARδ启动子活性区域在序列3361～3464之间,EMSA、突变发现AP1因子结合位点突变后转染活性明显降低.结论 AP1因子结合位点突变后转染活性明显降低,提示AP1是PPARδ的一个增强子.

探讨PBL病案讨论中指导教师的角色和作用

探讨在以问题为基础的学习(Problem-Based Learning,PBL)中,指导教师在病案(Case)讨论中所扮演的角色和应发挥的作用,对于进一步完善这种新型教学模式,起到了一定的积极推动作用。

PPARγ通路激活可增强细胞抗氧化能力和保护长程培养原代神经细胞

目的研究PPARγ通路增强对长程培养原代神经细胞凋亡的保护作用。方法以长程培养22 d的原代神经细胞建立自然衰老模型。根据不同干预方法分为衰老对照组(C组)、GW9662干预组(G组)和吡格列酮(Pioglitazone)干预组(P组)。其中GW9662干预组(G组)根据GW9662干预终浓度分为4个亚组:G(0.1):0.1μmol/Lol/L,G(1):1μmol/L,G(5)5μmol/L,G(10):10μmol/L。吡格列酮干预组(P组):根据吡格列酮干预终浓度分为4个亚组:P(0.1):0.1μmol/L,P(1):1μmol/L,P(5)5μmol/L,P(10):10μmol/L。首先应用MTT法观察各组细胞活力,应用倒置显微镜观察各组神经细胞形态,确定下一步实验的G组和P组的最终干预浓度。其次应用免疫荧光双标染色、流式细胞仪观察各组神经细胞计数、凋亡细胞比率的变化,明确PPARγ通路增强对长程培养原代神经细胞凋亡的保护作用。最后应用免疫化学法观察各组细胞抗氧化能力的变化,探讨PPARγ通路增强保护原代神经细胞的机制。结果随着GW9662干预浓度的增加,细胞活力进行性下降,其中G(1)、G(5)和G(10)组细胞活力均较C组显著降低(P<0.05)。G(1)组神经细胞形态尚完整,部分突触交织成网,最终确定后续实验G组的GW9662干预浓度为1μmol/L。加用吡格列酮干预后细胞活力较C组提高,其中P(1)、P(5)和P(10)组细胞活力较C组显著提高,差异具有统计学意义(P<0.05),但P(1)、P(5)、P(10)组3组之间比较无明显差异(P>0.05),最终确定后续实验P组的吡格列酮干预浓度为1μmol/L。G组细胞总数及神经细胞计数均较C组显著下降(P<0.05)。P组细胞总数及神经细胞计数均高于C组(P<0.05)。各组神经细胞比率均维持在80%左右,差异无统计学意义(P>0.05)。G组凋亡细胞比率明显高于C组(P<0.05),而P组凋亡细胞比率显著低于C组(P<0.05)。G组SOD活性及GSH含量较C组均显著降低(P<0.05),而MDA含量显著增加(P<0.05)。P组SOD活性及GSH含量均较C组显著升高(P<0.05),而MDA含量较C组显著减少(P<0.05)。结论 PPARγ通路是长程培养原代神经细胞的保护性通路,该通路的激活可以增强细胞抗氧化能力减少细胞凋亡保护长程培养原代神经细胞,提示针对PPARγ通路进行的药物干预有可能是临床抗神经系统衰老治疗的有效途径之一。

生物医学整合课程绪论区段PBL教学的思考

PBL是"基于问题式学习"的教学法。西安交通大学医学院以器官系统为核心,创新性地开展基础医学整合课程PBL教学,该教学系统包含11个区段。为了揭示整合课程PBL教学在绪论区段的实施过程及常见问题的应对措施,这里就绪论区段的课程设置、授课对象、教师集体备课、信息反馈及考核等的各个方面进行了深入剖析。

骨髓间充质干细胞(MSCs)对N-甲基-N-亚硝脲(MNU)诱导的C57BL小鼠视网膜变性的治疗作用

目的观察骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)对N-甲基-N-亚硝脲(N-methyl-N-nitrosourea,MNU)诱导的C57BL小鼠视网膜色素变性(retinitis pigmentosa,RP)的治疗作用。方法应用不同剂量(30 mg·kg^(-1)、45 mg·kg^(-1)、60 mg·kg^(-1)、75 mg·kg^(-1)、90 mg·kg^(-1))的MNU腹腔注射给予C57BL小鼠和MNU作用不同时间(1 d、3 d、7 d)后,通过视网膜电图(electroretinogram,ERG)和HE染色检测小鼠视网膜的电生理功能和组织形态变化,优化建立稳定的RP动物模型的最佳条件;在此动物模型的基础上,经玻璃体内注射和尾静脉注射给予MSCs移植,并应用ERG和HE染色评估MSCs对MNU诱导的RP的治疗作用。结果与对照组相比,30 mg·kg^(-1)、45mg·kg^(-1)剂量的MNU可引起视网膜形态和功能的轻微损伤,而60 mg·kg^(-1)及其以上剂量的MNU可使视网膜ERG波幅明显降低(均为P<0.001),视网膜外核层(outer nuclear layer,ONL)厚度明显变薄(P<0.001),损伤严重;与对照组相比,60 mg·kg^(-1)的MNU作用后1 d和3 d,视网膜ERG波形开始降低,形态结构开始出现ONL厚度变薄的损伤,作用7 d时,ERG波形呈现熄灭型(均为P<0.001),ONL厚度明显变薄(P<0.001),内外核层融合,损伤严重。与MNU单独作用组相比,60 mg·kg^(-1)MNU作用1 d后给予MSCs移植,7 d后MSCs组内ONL厚度增加(P<0.001),视网膜ERG波形趋于恢复(均为P<0.001)。结论MSCs移植对MNU诱导的视网膜退行性变有一定的治疗作用。

活性氧及过渡金属对关节软骨蛋白聚糖降解的影响

在温育的小牛关节软骨切片介质中加入黄嘌呤氧化酶/次黄嘌呤活性氧产生系统,可使关节软骨蛋白聚糖的降解显著增高。这种作用不能被超氧化物歧化酶或铁络合剂二乙三胺戊乙酸抑制,但可被过氧化氢酶抑制。在温育的介质中加入H_2O_2,也可使关节软骨蛋白聚糖降解增高,Cu^(2+)或Co^(2+)对此有显著促进作用,其它过渡金属则作用不明显。应用Sepharose 6B柱层析,分析软骨蛋白聚糖降解产物,多数实验组只在kD=0处有一个大分子的洗脱峰,但Cu^(2+)+H_2O_2组则在kD=0及0.57处出现两个洗脱峰(分别称为峰Ⅰ及峰Ⅱ)。醋酸纤维素薄膜双向电泳证实峰Ⅱ为硫酸软骨素,提示Cu^(2+)与H_2O_2复合物可导致蛋白聚糖分子的断裂。本研究结果可能有助于阐明某些变性型骨关节疾病的发病机理,例如因缺硒所致的大骨节病等。

改革《生物化学与分子生物学》教学方法培养创新性医学人才

生物化学与分子生物学不但是促进整个生命科学发展的前沿学科，也是医学生的重要基础课。近代医学的发展要求高等医学院校培养的学生，必须具备扎实的生物化学与分子生物学理论知识、以及运用其技术解决医学实际问题的能力和科研创新能力。为此，我们通过夯实学生《生物化学与分子生物学》的基础理论知识、开展多层次的实践训练（基本实验、综合试验及开放性实验）、科学管理的开放性实验室等多种途径，不断提高教学水平，努力培养医学创新性人才。

医学分子生物学实验教学改革的初步探索与实践

根据医学分子生物学学科特点，结合多年的实验教学经验，对医学分子生物学实验教学进行了一系列的探索与实践，取得了初步成效。本文着重总结了近年来在更新尖验教学内容、提高教师自身素质、规范实验教学过程、应用多媒体技术等方面所做的一些尝试。

SD、E3与DA1U大鼠视网膜光损伤敏感性的差异研究

目的比较SD、E3与DA1U大鼠视网膜光损伤敏感性,为构建不同品系大鼠视网膜光损伤模型和研究眼底色素抗光损伤保护视网膜的相关机制研究提供实验依据。方法成年SD、E3、DA1U大鼠,雌雄随机选取,采用视网膜电图与HE染色分别检测正常情况下与光损伤后不同品系大鼠视网膜感光功能与组织形态变化,采用TUNEL染色观察光损伤后视网膜凋亡细胞的分布与数量。结果正常状态下,SD大鼠色素上皮层、脉络膜层及E3大鼠色素上皮层均无色素分布,而E3大鼠脉络膜层、DA1U大鼠色素上皮层与脉络膜层有褐色色素分布;HE结果显示,在正常状态下,3种品系大鼠视网膜外核层厚度没有显著差异,而在光损伤条件下,SD大鼠视网膜各层细胞均严重受损;视网膜电图结果显示,在正常状态下,不同品系大鼠间视网膜电图视杆细胞反应b波振幅存在显著差异,E3大鼠最大混合反应a波及b波振幅与SD大鼠相比有显著差异,而在光损伤条件下,与SD大鼠相比,E3和DA1U大鼠视网膜电图a波与b波的波幅降幅显著减弱;TUNEL染色结果显示,与SD大鼠相比,E3与DA1U大鼠视网膜内核层及外核层凋亡细胞分布范围与数量均显著下降。结论 SD、E3与DA1U大鼠间存在视网膜色素分布与光损伤敏感性的差异,分布于脉络膜与色素上皮层的色素可能在大鼠抗视网膜光损伤过程中起到重要作用。

雌激素抗神经细胞凋亡的相关因子

雌激素是一种类固醇性激素,主要生理功能是促进女性生殖系统各个器官的发育和维持女性的第二性征。然而,越来越多的研究发现,雌激素还具有抗神经细胞凋亡的作用。雌激素抗神经细胞凋亡与其作用于下列多种因子有关,如Bcl-2家族、Ca2+、胱天蛋白酶(caspase)家族。