铁皮石斛益消方对肝胃不和型功能性消化不良模型大鼠的作用研究

目的探讨铁皮石斛益消方对肝胃不和型功能性消化不良(FD)模型大鼠的药效,为临床应用和相关产品开发提供实验依据。方法模拟人“情志不畅”加“饮食不节”即夹尾激怒复合饥饱失常喂养法造模2周制备肝胃不和型FD大鼠,灌胃铁皮石斛益消方2周后,通过半固体糊胃残留率和小肠推进率检测大鼠胃排空能力和肠蠕动能力;利用间苯三酚法检测D-木糖肠道吸收量来判断肠道吸收能力;胃蛋白酶试剂盒测定大鼠胃蛋白酶的活力;ELISA法检测血清脑肠肽(MTL、VIP、5-HT)水平;HE染色观察胃组织病理学变化。结果与正常组比较,模型组大鼠胃内残留率显著升高(P<0.01),小肠推进率显著降低(P<0.01)。与模型组比较,铁皮石斛益消方高、中、低剂量组均可促进小肠推进率(P<0.05,P<0.01),降低血清VIP含量(P<0.05,P<0.01);高、中剂量组可降低胃内残留率(P<0.05),升高血清MTL和5-HT含量(P<0.05,P<0.01),促进小肠对D-木糖的吸收(P<0.05)。结论铁皮石斛益消方能增强FD大鼠胃排空和肠道蠕动能力,提高小肠的吸收功能,其作用机制可能与上调MTL.5-HT,下调VIP水平有关。

均匀设计与正交设计联用优选铁皮石斛多糖提取工艺的研究

目的:优选简便高效的铁皮石斛多糖的提取工艺,考察不同条件下的总多糖得率。方法:采用均匀设计与正交设计联用的方法对铁皮石斛多糖的提取工艺进行优选。结果:优选出来的铁皮石斛最佳提取工艺条件为温度85℃,提取时间3h,液料比20倍时,提取的总多糖得率最高为24.9%。结论:正交设计与均匀设计联用是优选工艺的好方法,本实验所得工艺合理,提取率高,适用于工业生产。

铁皮石斛GAP种植基地的环境质量评价

目的对铁皮石斛GAP种植基地的环境质量进行评价,为种植基地的建设提供科学依据。方法采用国家标准的方法对铁皮石斛种植基地进行大气环境、水资源及土壤环境进行分析评价。结果铁皮石斛GAP种植基地大气符合GB3095-95标准,土壤符合GB15618-1995土壤二级标准,灌溉水符合《农田灌溉水质标准》(GB5084-1992)标准。结论铁皮石斛GAP种植区环境良好,符合绿色中药材栽培的环境质量要求。

利用活体微生物农药防治铁皮石斛黑斑病研究

为利用活体微生物控制铁皮石斛生长过程中出现的黑斑病,采用测量抑菌圈的方法,通过从铁皮石斛土壤中筛选到的15种抑制菌,对显著抑制石斛黑斑病原菌的拮抗微生物进行了优选,并研究其单一发酵液和复合发酵液对石斛黑斑病菌的抑制作用。结果表明:筛选出的细菌进行单一发酵液试验,细菌B6、B8和B10有较强的抑菌能力;进一步将单一发酵液两两复合后发现,部分复合发酵液出现了明显的增效作用,其中抑菌能力最高及增效作用最强的是细菌B6和B8浓度为10.0mg/mL的复合发酵液,抑菌圈直径达到了32.4mm,该方法简便,费用低,实验周期较短,现象容易观察,适合小型的实验室研究。

铁皮石斛多糖和醇溶性浸出物动态累积规律研究

为了揭示铁皮石斛多糖和醇溶性浸出物含量的动态变化规律,为铁皮石斛科学采收提供依据。采用苯酚-浓硫酸法和醇溶性浸出物热浸法测定铁皮石斛3个优良品系一至三年生萌条的多糖和浸出物含量。结果表明,不同采收期铁皮石斛多糖、浸出物含量及其总量均存在极显著差异,与铁皮石斛的物候密切相关,其中多糖含量变化与开花密切相关,醇溶性浸出物含量与新芽形成、萌动密切相关。根据多糖与醇溶性浸出物含量的动态变化,以多糖为采收目标时在二年生开花前采收,以醇溶性浸出物为采收目标时以新芽萌动前采收最佳,以多糖与醇溶性浸出物总量为目标时以春芽萌动至开花前采收为宜。

铁皮石斛总生物碱含量变异规律

目的:全面了解不同种质、不同采收年限铁皮石斛药材总生物碱含量及其变异规律,为铁皮石斛真伪鉴别与优质药材培育提供依据。方法:采集铁皮石斛人工栽培骨干基地一至三年生铁皮石斛17个种质41个样品,以及市售不同价位枫斗药材11个样品;采用酸性染料比色法测定总生物碱含量。结果:人工栽培的铁皮石斛与市场购买的铁皮枫斗药材总生物碱在0.019 0%～0.043 0%;浙江省11个铁皮石斛种质一年生、二年生、三年生样品平均总生物碱为0.025 3%,0.027 0%,0.032 6%,云南产一年生铁皮石斛平均总生物碱为0.034 3%。结论:不同种质、年龄的铁皮石斛总生物碱含量差异很大,并且总生物碱含量随着生长年限的增加而增加,云南产铁皮石斛总生物碱明显高于浙江产铁皮石斛,但正宗的铁皮石斛总生物碱含量具有明显限量范围,总生物碱含量明显偏离限量范围的样品可以基本确定为非铁皮石斛,总生物碱含量在此范围的样品必须结合多糖含量与其他活性化学组分才能真正辨别铁皮石斛药材的真伪与优劣。

铁皮石斛采后加工及提取方法对多糖的影响

目的:揭示采后加工及提取方法对铁皮石斛多糖的影响。方法:采用直接烘干、烫后烘干、边搓边烘、烫后边搓边烘4种方法,分别在不同温度下烘干后测定药材中多糖含量;以药材粉碎与否、料液比、提取时间、提取次数为考察因素,采用L9(34)正交试验研究铁皮枫斗多糖的水煮溶出量。结果:不同采后加工方法得到的铁皮石斛药材多糖质量分数为26.59%～32.70%,边搓边烘100℃和80℃处理的铁皮石斛药材多糖含量最高;粉碎程度是影响铁皮枫斗多糖快速提取率的关键因素,直接投料水煮的方法提取率极低(仅为10.28%～38.00%)。结论:80℃边搓边烘的铁皮枫斗传统加工工艺可加速药材的干燥,且保留了较多多糖成分;而传统的铁皮枫斗直接投料法"宽汤久煮"也未必能充分提取药材中的多糖,建议临床及保健食用时选用粉碎后水煮。

铁皮石斛人工栽培居群的遗传多样性研究

目的了解铁皮石斛人工栽培居群的遗传多样性,为种质资源的保护与新品种的选育提供基础。方法利用RAPD分子标记对浙江义乌、天台、建德、武义,云南麻栗坡、勐海的14个居群的铁皮石斛和1个居群的紫皮石斛进行遗传多样性分析。结果从225个RAPD引物中筛选出15个引物,对105个铁皮石斛和3个紫皮石斛样本进行PCR扩增,共扩增出138条带,其中133条为多态性条带,多态性条带比率(PPB)为96.38%;14个铁皮石斛居群的多态位点(PPL)在10.79%～76.26%,平均为45.32%。结论全国主产区人工栽培的铁皮石斛遗传多样性丰富,铁皮石斛种质的亲缘关系远近与其地理种源具有显著的相关性,与栽培地点无关。

开花对铁皮石斛多糖质量分数及单糖组成的影响

目的:揭示开花对铁皮石斛多糖质量分数及单糖组成的影响,为优质铁皮石斛培育提供依据。方法:采集铁皮石斛开花前样品、开花结束时经人工摘除花蕾与未摘花蕾的样品,采用苯酚-硫酸法测定铁皮石斛中多糖质量分数,柱前衍生HPLC检测多糖中的单糖组分。结果:摘花蕾样品与未摘花蕾样品比较,总多糖及多糖中的甘露糖、半乳糖醛酸、葡萄糖绝对量分别高30.35%,26.44%,20.78%,57.80%,木糖,阿拉伯糖分别低28.33%,24.37%,半乳糖差异不显著。结论:开花显著消耗铁皮石斛药材中的多糖及多糖中甘露糖、半乳糖醛酸、葡萄糖的量,而开花过程可能有利于木糖、阿拉伯糖积累。

铁皮石斛花粉活力与种质创制研究

目的:为铁皮石斛杂交育种与野生资源保护提供基础。方法:采用过氧化物酶法测定不同花期与不同贮藏条件的花粉活力;在温室大棚设施栽培条件下开展杂交、自交、自由授粉,野外昆虫辅助授粉。结果:铁皮石斛有活力花粉比例花蕾期为29.4%,开花当天为70.6%,开花后1周为31.9%,直至花谢花粉仍有活力;离体干燥条件下4℃贮藏20 d后有活力花粉比例仍有21.2%;人工授粉杂交结实率达82.6%,自交结实率7.3%;野外昆虫辅助授粉与温室大棚设施栽培条件下自由授粉结实率均为0。结论:铁皮石斛花粉在整个花期均有活力,石斛花构造的特殊性导致自由授粉与野外昆虫辅助授粉均结实困难,人工杂交授粉是铁皮石斛野生资源的保护与种质创制的有效途径。

铁皮石斛人工栽培模式

进入新世纪以来,铁皮石斛人工栽培产业取得了突破性的进展。文章系统阐释了铁皮石斛设施仿生栽培、活树附生原生态栽培、林下原生态栽培、盆栽等系列栽培模式的技术要点和注意事项,为铁皮石斛产业发展与提升提供参考。

铁皮石斛良种选育进展与对策

品种是中药材规范化栽培的源头,"十五"以来,随着铁皮石斛产业的快速发展,良种需求的增加,铁皮石斛品种选育开展了大量的研究,并取得了显著成效。文章系统地阐述了铁皮石斛种质资源收集与差异性评价、良种选育理论与实践、种苗组织培养与低碳高效生产、DNA分子标记与辅助育种等进展,分析了当前良种选育中存在的主要问题,提出进一步开展良种选育的重点与关键。

高中生物生活化教学的实现路径

在高中生物教学过程中,教师要注意结合生活实际,充分发挥生物学科的独特作用,让学生在现实生活的背景下学习生物,并运用所学知识解决生活中的实际问题,为高中生进一步学习和步入社会做好准备。