乳杆菌抑菌和粘附性能的研究

本文以4株乳杆菌为研究对象,标准益生菌L.rhamnosus GG作为对照。研究它们对低酸和高浓度胆盐的耐受性,对抗生素的敏感性,对食源性病原菌的抑制能力以及对Caco-2细胞的粘附性。结果表明,其中Lactobacillus casei 142,L.plantarum 89的耐酸耐胆盐性能较好。四株乳杆菌对Listeria monocytogenes,Escherichia coli,shigella sonnei都有较好的抑制作用,同时它们对本研究中的5种抗生素都具有敏感性。本文采用Caco-2细胞模型,研究乳杆菌对Caco-2细胞的粘附能力,结果发现L.plantarum 89,L.plantarum 27和L.plantarum 13在Caco-2细胞上的粘附能力强(>20 cfu/cell),L.rhamnosus GG的粘附数为8(cfu/cell),而L.casei142则不具有粘附性能。

嗜酸乳杆菌活菌体和热灭活菌体对IPEC-J2细胞的黏附和黏附拮抗效应

本试验旨在研究嗜酸乳杆菌活菌体和热灭活菌体在体外模拟条件下对IPEC-J2细胞的黏附和黏附拮抗效应。用嗜酸乳杆菌活菌体和热灭活菌体处理IPEC-J2细胞,染色后观察细菌对细胞的黏附性。另外,采用嗜酸乳杆菌活菌体和热灭活菌体,通过竞争抑制、排阻抑制和替换抑制3种不同的处理方式抑制大肠杆菌在IPEC-J2细胞上的黏附,利用伊红美蓝琼脂培养基,检测嗜酸乳杆菌对大肠杆菌黏附的抑制率。结果表明:嗜酸乳杆菌活菌体和热灭活菌体都能很好地黏附到IPEC-J2细胞上,每个细胞上黏附的热灭活菌数[(40±2)CFU]高于黏附的活菌数[(20±2)CFU]。2种状态的嗜酸乳杆菌都能很好地抑制大肠杆菌在IPEC-J2细胞上的黏附。在竞争抑制和替换抑制试验中,活菌体的抑制率显著高于热灭活菌体(P<0.05)。然而,在排阻抑制试验中,热灭活菌体的抑制率显著高于活菌体(P<0.05)。由此可知,嗜酸乳杆菌的活菌体和热灭活菌体都能很好地黏附到IPEC-J2细胞上,抑制大肠杆菌对细胞的黏附和入侵,热灭活菌体可能主要通过竞争黏附位点来抑制大肠杆菌的黏附,而活菌体可能不只这一机制,还会在代谢过程中产生一些抑菌物质,抑制大肠杆菌的生长繁殖。

反相高效液相色谱法测定发酵豆粕中的乳酸含量

文章建立了测定发酵豆粕中乳酸含量的反相高效液相色谱(RP-HPLC)分析方法,以C18柱为分析柱,采用紫外检测器,12 min内能够很好的分离出乳酸。流动相为磷酸溶液(pH=2.0):乙腈=97:3;波长:210 nm。该方法在15~1 500μg/ml的浓度范围内,线性关系良好,加标回收率91.5%~96.8%。试验结果表明本方法操作简单、灵敏度高,适用于发酵豆粕中乳酸的测定。

反相高效液相法测定发酵豆粕中的17种氨基酸含量

采用异硫氰酸苯酯(PITC)柱前衍生反相高效液相色谱法测定豆粕和发酵豆粕中17种氨基酸含量,以氨基酸C18色谱柱为分析柱,采用紫外检测器,35min内能够很好的分离17种氨基酸。氨基酸峰面积与氨基酸浓度之间的线性关系较好,加标回收率较高。试验结果表明本方法操作简单、灵敏度高,适用于豆粕和发酵豆粕中氨基酸的测定。

应用RT-PCR技术定量检测发酵物料中嗜酸乳杆菌菌体数

根据发酵物料中常见乳酸菌种的16S rRNA基因序列设计嗜酸乳杆菌的种属特异性引物,以单独嗜酸乳杆菌发酵样品中的细菌基因组DNA为模板,应用实时荧光定量PCR(RT-PCR)技术对发酵物料中嗜酸乳杆菌进行定量检测。通过RT-PCR图谱分析,准确地检测出样品中嗜酸乳杆菌菌体数的含量为15亿CFU/g。结果表明:该方法能够对发酵物料中嗜酸乳杆菌菌体数进行准确定量,是较好的检测发酵物料中嗜酸乳杆菌菌体数的方法。

豆粕发酵过程中乳酸检测方法的选择及含量变化的研究

发酵豆粕中乳酸含量的检测方法一般使用碱滴定法,该方法检测的是总酸的含量,但不能准确测定发酵豆粕中乳酸的含量。本实验通过对比碱滴定法与高效液相色谱法检测发酵豆粕中乳酸的含量,结果表明使用高效液相色谱方法检测乳酸含量较为稳定、准确。同时,本文检测了豆粕在发酵过程中乳酸含量的变化,豆粕在发酵前乳酸含量极低,几乎检测不到;加入菌种后检测乳酸含量占物料的2.50%;经48 h发酵结束后检测乳酸含量占物料的5.16%;发酵豆粕经干燥粉碎后乳酸含量占物料的8.96%。

豆粕发酵过程中乳酸检测方法的选择及含量变化的研究

发酵豆粕中乳酸含量的检测方法一般使用碱滴定法,该方法检测的是总酸的含量,不能准确测定发酵豆粕中乳酸的含量。本实验通过对比碱滴定法与高效液相色谱法检测发酵豆粕中乳酸的含量,结果表明使用高效液相色谱法检测乳酸含量较为稳定、准确。同时,本文检测了豆粕在发酵过程中乳酸含量的变化,豆粕在发酵前乳酸含量极低,几乎检测不到;加入菌种后检测乳酸含量占物料的2.50%;经48 h发酵结束后检测乳酸含量占物料的5.16%;发酵豆粕经干燥粉碎后乳酸含量占物料的8.96%。