实时可视化LAMP快速检测高危亚型HPV病毒方法的建立

目的:建立实时可视化LAMP快速检测高危亚型人乳头瘤病毒的方法。方法:基于HPV病毒基因中的L1区保守序列,构建重组标准质粒。应用钙黄绿素作为可视化荧光染料,通过环介导等温扩增技术手段,检测结果可由肉眼观测和荧光检测信号来判读。结果:应用LAMP技术检测HPV病毒,大部分高危亚型的检测限可达到10^3 copies/μL,其中HPV16,HPV33,HPV59,HPV73亚型灵敏度可达10^1 copies/μL;15种高危亚型样品的检测结果显示不存在交叉反应,表明其特异性良好;针对318例临床样本,LAMP的阳性检出率达到79.56%(253/318),与反向杂交试剂盒检测结果基本持平。结论:本研究针对15种高危亚型HPV病毒,建立高效快捷的实时可视化LAMP检测方法,其临床样本符合率高达91.20%,因而具有广泛的市场推广前景和潜在的临床应用意义。