顺铂通过ROS介导ClC-3上调诱导鼻咽癌细胞凋亡

目的:探讨ClC-3氯通道在顺铂诱导的鼻咽癌细胞凋亡中的作用及机制。方法:将不同浓度的顺铂作用于人低分化鼻咽癌细胞(CNE-2Z细胞);MTT法检测不同浓度的顺铂处理24 h和48 h后细胞活力;采用ClC-3-siRNA下调ClC-3的表达,Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡,多功能微孔板检测仪和流式细胞术检测细胞不同状态下的ROS水平。结果:(1)顺铂呈时间和浓度依赖性抑制CNE-2Z细胞生长,氯通道阻断剂DIDS显著抑制顺铂引起的细胞凋亡(P<0.01);(2)顺铂促进CNE-2Z细胞ClC-3表达,下调ClC-3蛋白表达后,顺铂诱导的细胞凋亡率下降(P<0.05);(3)顺铂促进CNE-2Z细胞ROS产生,用抗氧化剂抑制细胞产生ROS后,顺铂诱导的ClC-3蛋白表达和凋亡被抑制,而下调ClC-3蛋白表达对ROS水平影响不大。结论:顺铂可通过提升CNE-2Z细胞ROS水平,上调氯通道ClC-3蛋白水平,从而诱导细胞凋亡。

ClC-3氯通道过表达对小鼠甲状腺结构及功能的影响

目的:研究过表达Cl C-3基因对小鼠甲状腺结构及功能的影响。方法:以3月龄FVB小鼠为实验对象,研究野生型(WT)小鼠和Cl C-3转基因小鼠甲状腺结构及功能的差异。用q PCR、Westren blot和免疫荧光技术观察小鼠甲状腺Cl C-3的表达与分布;对小鼠日常活动进行行为学监测;ELISA检测小鼠血清总三碘甲状腺原氨酸(TT3)、总甲状腺素(TT4)和促甲状腺激素(TSH)的浓度。结果:与WT组小鼠相比:Cl C-3转基因组小鼠甲状腺Cl C-3表达明显增多(P<0.05);甲状腺表现为明显的增生,滤泡明显增大;体重减轻但摄食量增加(P<0.05),毛发无光泽,行为活跃,易激惹;TT3、TT4明显增高(P<0.05),但TSH变化不明显。结论:Cl C-3过表达可导致甲状腺组织增生,甲状腺激素分泌增多。本研究提示Cl C-3很可能参与了甲状腺激素的合成。