眼科常用实验动物视网膜血管的比较

目的比较眼科常用实验动物视网膜血管尤其是视网膜毛细血管的情况,为实验时正确选择动物模型提供基础。方法取猕猴、家猪、新西兰大白兔、犬、猫、SD大鼠、C57小鼠以及豚鼠的正常眼球数个,完整剥离整个视网膜,用ADPase法进行血管染色,对视网膜血管进行形态学的比较。结果猕猴视网膜大血管从视盘穿出,分成四支分别供应视网膜四个象限,每条血管逐级分支最后成为毛细血管,其毛细血管呈网状分布,在赤道处分成两层,至周边变成一层,且有发育良好的黄斑区毛细血管拱环结构。家猪视网膜大血管由视盘发出后放射状走行,毛细血管也呈网状分布,无黄斑拱环结构。兔仅视盘两侧部分视网膜可见血管,毛细血管网状不明显。犬的视网膜血管也放射状走行,但迂曲明显,毛细血管不成网状。猫、大鼠、小鼠的视网膜大血管均由视盘发出,猫的分成上、鼻下、颞下三支,大鼠、小鼠的各方向均有,区域性不明显,三者的毛细血管网均发育良好,至周边部仍很密集,呈两层分布。豚鼠视网膜无可见的血管。结论用于研究人视网膜血管尤其是毛细血管时,可选用猕猴、家猪、猫、大鼠和小鼠作为动物模型;但要研究人黄斑区血管时,仅可选用猕猴等灵长类动物。

正常猕猴与人视网膜血管的比较

目的比较正常猕猴与人视网膜血管的异同,为进一步利用猕猴建立动物模型来研究视网膜血管打下基础。方法取健康成年猕猴眼球6只和人角膜移植供体剩余眼杯8只的视网膜,用ADP酶法进行血管染色,对两者视网膜血管的走行、血管分级、毛细血管分层以及黄斑区血管拱环等进行比较,测量结果进行统计学检验。结果猕猴与人的视网膜铺片经ADP酶法染色后见视网膜血管自穿出视盘后的一级血管逐渐分支变细,直至五级血管即毛细血管;在视盘旁、赤道部、周边部两者血管面积百分比没有差异;视盘旁血管分为多层,赤道部有两层,且深浅层间相互交通,周边部仅见一层毛细血管且较稀疏;两者黄斑区毛细血管均较密集,有形态完整呈不规则状的血管拱环,血管面积百分比以及血管拱环的面积、周长和直径没有差异。结论猕猴与人在视网膜血管走行、分级、毛细血管分层以及黄斑区血管拱环等多方面有良好的相似性,可用作人类视网膜血管、尤其是黄斑区视网膜血管研究的良好动物模型。

脑源性神经营养因子及其受体酪氨酸激酶B在慢性高眼压猕猴初级视皮层的表达

目的探讨不同时期慢性高眼压猕猴初级视皮层脑源性神经营养因子(brain-derived neurotro-phie factor,BDNF)及其受体酪氨酸激酶 B(tyrosine kinase B,TrkB)表达的改变及其意义。方法取4只健康猕猴和11只由激光小梁网烧灼法造成的不同时期慢性高眼压猕猴的初级视皮层,做冠状面和切线位冰冻切片,免疫荧光组织化学法检测 BDNF 和 TrkB,图像分析法计算每10000μm^2组织中 BDNF 阳性区域面积并进行方差分析。结果健康猕猴初级视皮层 BDNF 表达丰富,冠状面及切线位 BDNF 阳性区域面积分别为(432.54±115.90)μm^2和(693.38±354.59)μm^2,青光眼组 BDNF 表达普遍降低,分别为(90.42±75.10)μm^2(P=0.000)和(354.36±194.58)μm^2(P=0.031),与健康对照组间差异有统计学意义,但与病程无关。青光眼组TrkB 表达也呈不同程度减弱。结论慢性高眼压猕猴初级视皮层的 BDNF 及 TrkB 表达降低,可能通过削弱下行营养支持,加重了视觉通路中下级神经元的病变,从而参与了青光眼病理机制中的恶性循环。(中国眼耳鼻喉科杂志,2007,7:279-281)

球结膜淋巴管与微血管的鉴别染色研究

目的探讨5′-核苷酸酶-碱性磷酸酶双染法在动物和人眼结膜淋巴管、微血管鉴别中的应用价值。方法使用5′-核苷酸酶-碱性磷酸酶双重染色法对中华猕猴、家猪及人离体眼结膜进行铺片染色,光镜拍照观察。结果猕猴、家猪离体眼及人离体眼结膜染色结果相似:淋巴管呈深棕色,微血管呈深蓝色。其中猕猴结膜管道显色最深。结论 5′-核苷酸酶-碱性磷酸酶双染法可以成功地将猕猴、家猪及人眼结膜中的淋巴管和微血管进行区分。猕猴是应用该双染法研究结膜淋巴管及血管网络分布的良好动物模型。(中国眼耳鼻喉科杂志,2007,7:17～19)

高眼压性青光眼动物模型

青光眼是一类非常复杂的眼病，高眼压是青光眼发生，发展的重要因素。本文就高眼压性青光眼模型，尤其是各种实验性青光眼的特点、诱导方法及结果进行综述，并介绍根据不同的研究目的。

蛙类肠系膜内微小动脉的压力检测

根据Wiederhielm的阻抗平衡压力检测原理,设计了一个改进的伺服零微血管测压系统。利用该系统检测了蟾蜍及蛙肠系膜内微小动脉的压力、获得了各管径级的压力和脉压的参数,并观察了药物的作用,探讨了微动脉内压力的波动特性以及应激情况下压力的骤变式与脉动式的交替,为微循环研究提供一些有价值的现象。

伺服零微血管测压系统的研究

本文介绍了一个改进的微循环测压系统。它是根据Wiederhielm提出的阻抗平衡压力检测原理而设计的。该系统包括微压检测、信号处理及有关的外设。系统频响优于 20Hz,其非线性误差在0—80mmHg范围内优于1％。应用该系统已成功地检测了蟾蜍肠系膜各管径级(最小达14μ)微血管内的血压参数。实践表明,本系统为微循环研究提供了可靠而实用的测压手段,可直接用于单根微血管内压力和脉搏波的记录、测量跟踪和各参数的定量分析。

WPU用于微血管铸型的扫描电镜技术

我们选用了WPU作微血管的铸型材料,对实验动物的眼内微血管进行铸型,参照了Howard的标本漂洗法,用SEM进行观察,取得了满意的结果。实验动物为成年健康的猫11只、兔3只,体重2-3kg。铸型材料为亲水性聚氨脂简称WPU,江苏化工研究所生产,用前以100%丙酮稀释,胃蛋白酶系杭州肉类加工厂生产。动物用戊巴比妥钠腹腔注射麻醉,剂量为40mg/kg。

流控式眼玻璃体注吸切割器及其应用

眼玻璃体疾病的治疗,长期以来是眼科临床上的一个难题。因为玻璃体是一种无血管的胶状体,药物治疗难以奏效,而手术治疗也怕造成玻璃体流失,产生严重后果,因而被列为手术的“禁区”。为突破这个“禁区”,国外研制了特殊的器械。一九七一年美国医生Machemer和Peyman相继研制成功玻璃体注吸切割器,开展了玻璃体手术,成为七十年代眼科手术史上的一个重大突破。许多国家开始开展眼玻璃体手术。到目前为止,国际上对这一器械还在继续研究、发展中。

急性高眼压模型兔眼不同眼压状态下视神经轴浆运输的改变

目的观察急性高眼压模型兔眼不同眼压状态下视神经轴浆运输的改变。方法成年新西兰大白兔24只，分为眼压20、30、40mmHg（1mmHg=0．133kPa）组和眼压为10～15mmHg的对照组，每组均为6只兔。采用前房穿刺灌注法联合压力持续监测法建立急性高眼压模型。实验开始时，兔眼玻璃体腔中注射罗丹明异硫氰酸（RITc）标记轴浆运输。持续3h高眼压后，过量麻醉处死兔后取下视神经。荧光显微镜下观察视神经轴浆运输情况的改变。采用德国Leica公司Q500IW图像分析软件对RITC进行灰度定量分析，并对各眼压组平均灰度值和筛板前、筛板区、筛板后350μm区域灰度值进行统计学分析处理。结果RITC在视神经中心呈顺行标记染色。不同眼压组轴浆运输情况不同，随着眼压升高，轴浆运输能力减弱，差异有统计学意义（F=159．3，P〈0．05）。筛板前区，各眼压组间灰度值比较，差异无统计学意义（F=0．2545，P〉0．05）。40mmHg组灰度值与对照组灰度值比较，在筛板区（t=5．684）和筛板后350μm区域（t=5．124）差异均有统计学意义（P〈0．05）；20、30mmHg组灰度值与对照组灰度值比较，差异无统计学意义（t=1．747，P〉0．05）。结论眼压40mmHg持续3h将导致视神经轴浆运输改变，轴浆运输障碍部位以筛板区及以后的区域为主。