小鼠2型金属硫蛋白基因的克隆

目的构建含有小鼠Ⅱ型金属硫蛋白(MT)基因的真核表达载体,为进行MT抗氧化作用的体内功能实验奠定基础。方法采用重叠延伸PCR技术设计两对引物,利用引物间的互补序列作为模板合成小鼠Ⅱ型MT基因。结果将PCR产物经连接反应,连接产物转化JM109,摇菌后提取质粒,质粒的酶切鉴定及最后的测序结果均表明本实验所获得的小鼠Ⅱ型MT基因与GENEBANK中的目标基因序列完全一致。结论本实验通过重叠PCR技术成功构建了小鼠Ⅱ型MT编码基因,重叠PCR技术是合成目的基因片段的有效的手段。

黄芪对糖尿病大鼠的血清学指标的作用的实验研究

目的探讨黄芪对糖尿病(DM)大鼠血清中甘油三酯(TG)、血糖、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和胰岛素水平的作用,为黄芪治疗DM提供理论依据。方法Wistar大鼠40只,随机分为正常组,DM模型组和黄芪组。给予Wistar大鼠腹腔注射链脲佐菌素50mg/kg体重,每隔2d测一次血糖,3次血糖测定值均高于16.7mmol/L,被确定DM模型成功,黄芪组每日腹腔注射DM大鼠黄芪注射液1ml(内含2g药材提取物)。DM组大鼠每日腹腔注射0.1mmol/L柠檬酸钠1ml。于治疗后的第7、14天分别取3组大鼠的血液,测定血糖、血清TG、HDL-C、LDL-C、胰岛素水平。结果黄芪组治疗14d后,血清中胰岛素水平明显高于DM组(P<0.01);TG和血糖水平显著低于DM组(均P<0.05)。结论黄芪注射液具有调节脂代谢,降低血糖的作用。

银杏叶提取物对高糖环境下ECV304细胞的保护作用

目的:探讨银杏叶提取物对高糖环境下人脐静脉内皮细胞(ECV304)的保护作用及机制。方法:体外培养的ECV304细胞分为高糖组、银杏叶保护组、甘露醇高渗对照组(甘露醇组)和正常细胞组,在35 mmol.L-1高糖条件下培养ECV304细胞24 h后,分别收集不同处理组的细胞,检测细胞产生羟自由基(.OH)、超氧阴离子(O2-)、丙二醛(MDA)水平,同时测定细胞超氧化物歧化酶(SOD)活性;采用不同处理组的细胞制作扫描电镜图片,观察细胞及线粒体形态的改变。结果:高糖组细胞产生.OH、O2-和MDA水平高于银杏叶保护组(P<0.05),SOD活性低于银杏叶保护组(P<0.05)。甘露醇组细胞产生.OH、O2-、MDA水平显著低于高糖组(P<0.05)。电镜下可见银杏叶保护组线粒体形态完好,线粒体内嵴清晰可见;高糖组线粒体肿胀,线粒体内嵴消失,坏死细胞增多。结论:银杏叶提取物对高糖导致的ECV304细胞损伤具有保护作用。

银杏叶提取物对ECV304细胞正常功能的保护作用研究

目的探讨高糖环境下银杏叶提取物(Ginkgo biloba extract,EBG)对ECV304细胞的保护作用。方法将细胞分为正常细胞组(不施加任何处理因素)、高糖组(加入葡萄糖至终浓度35mmol/L);甘露醇组(加入甘露醇使其终浓度达35mmol/L);银杏叶保护组(加入葡萄糖至终浓度35mmol/L,同时加入银杏叶提取物使其终浓度达500μg/ml)。加入处理因素24h后,利用流式细胞仪测定细胞内Ca2+浓度、线粒体的膜电位和细胞凋亡情况。结果高糖组细胞内Ca2+浓度与其它各组相比较显著升高,线粒体的膜电位显著降低,发生凋亡的细胞显著增加(P<0.05)。银杏叶保护组细胞内Ca2+浓度显著低于高糖组,线粒体膜电位显著高于高糖组,发生凋亡的细胞显著减少(P<0.05)。甘露醇组细胞内Ca2+浓度显著低于高糖组,线粒体膜电位高于高糖组,细胞发生凋亡情况少于高糖组(P<0.05)。结论银杏叶提取物能够保护高糖环境下的ECV304免受高糖的损伤。

2013—2015年吉林省食源性疾病流行病学特征分析

目的分析2013—2015年吉林省食源性疾病的流行病学特征和规律,为防控食源性疾病暴发事件提出有针对性的措施和建议。方法对2013—2015年"食源性疾病监测报告系统"中吉林省的病例进行描述性分析和统计学检验。结果 2013—2015年吉林省哨点医院共报告食源性疾病病例12 049例,其中11 497例患者的标本做病原学检测,807例患者检出致病微生物,总检出率为7.02%;诺如病毒、沙门菌、致泻性大肠埃希菌属、志贺菌、副溶血性弧菌检出率分别为15.63%(389/2 489)、2.54%(283/11 141)、1.32%(147/11 167)、0.08%(9/11 153)、0.06%(6/9 410),未检出小肠耶尔森菌(0/201)。诺如病毒、沙门菌和致泻性大肠埃希菌属与志贺菌、副溶血性弧菌和小肠耶尔森菌相比是吉林省主要流行的食源性致病微生物(P<0.05)。诺如病毒在第一季度检出率(31.00%)高于其他三个季度;沙门菌、致泻性大肠埃希菌属在第二、三季度检出率(3.78%、3.12%;1.32%、1.69%)高于第一、四季度;志贺菌和副溶血性弧菌均在第三季度检出率最高(0.14%、0.15%)。诺如病毒在80岁以上和5岁以下年龄组检出率较高(20.00%、18.90%),沙门菌和致泻性大肠埃希菌属在5岁以下年龄组检出率最高(3.38%、1.75%)。2015年的食源性致病菌检出率高于2013年和2014年,差异有统计学意义(P<0.05),第四季度的检出率低于前三季度差异有统计学意义(P<0.05),不同性别的食源性致病菌检出率差异无统计学意义(P>0.05),5岁以下年龄组儿童、商业服务人员、城市居民食源性致病微生物检出率最高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 2013—2015年吉林省食源性疾病检出率逐年升高,第一、二、三季度检出率高于第四季度,诺如病毒、沙门菌和致泻性大肠埃希菌属是主要流行的病原体,5岁以下年龄组儿童和商业服务人员易受食源性致病微生物感染。

黄芪对高糖环境下细胞膜流动性影响

目的探讨黄芪注射液(RA)对高糖环境下ECV304细胞膜流动性的影响,为RA在糖尿病治疗中的应用提供实验依据。方法体外实验中利用葡萄糖建立高糖环境,体外培养ECV304细胞,将细胞随机分为正常组、高糖组、黄芪保护组(RA)组和甘露醇高渗对照组(简称甘露醇组)。加入处理因素24 h后,收集细胞,测定各组细胞的细胞膜流动性和各组细胞产生OH,O2-、和丙二醛(MDA)水平。结果高糖组细胞产生MDA水平明显升高,显著高于正常组、RA组和甘露醇组细胞(P<0.01);RA组细胞产生MDA水平显著低于甘露醇组(P<0.01),与正常组细胞比较,差异无统计学意义。高糖组细胞抑制OH、O2-的能力显著低于正常组、RA组和甘露醇组细胞(P<0.01);RA组细胞抑制OH、O2-的能力显著高于甘露醇组细胞(P<0.01),与正常组细胞比较,差异无统计学意义。高糖组细胞超氧化物歧化酶(SOD)活性显著低于正常组、RA组和甘露醇组细胞(P<0.01);RA细胞SOD活性与正常组细胞比较,差异无统计学意义。RA组细胞的细胞膜流动性显著高于高糖组细胞(P<0.01),与正常组细胞比较,差异无统计学意义。结论黄芪通过抗氧化作用,可保护高糖环境下ECV 304细胞的细胞膜流动性。

银杏叶提取物对糖尿病大鼠血清学指标的影响

目的研究银杏叶提取物(GbE)对糖尿病大鼠血清学指标的影响,探讨其在糖尿病大鼠脂代谢过程中的作用。方法通过腹腔注射链脲佐菌素(STZ)(50mg/kg)建立糖尿病大鼠模型。将模型大鼠随机分为模型对照组(DM)和GbE组,GbE组每日给予GbE提取物,0.83ml/只,DM组每日给予等剂量的生理盐水,均为腹腔注射,另设1组正常大鼠对照。于注射银杏叶提取物的第1和15天采血,检测各组大鼠血清甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)水平,第15天检测大鼠血清中胰岛素和C-肽水平。结果DM组大鼠血清中TG和LDL-C水平随着时间的延长逐渐升高;注射后第15天,GbE组大鼠血清中TG和LDL-C水平均显著低于DM组,HDL-C和C-肽水平显著高于DM组,胰岛素水平与DM组比较,差异无统计学意义。结论银杏叶提取物对糖尿病大鼠的脂代谢具有调节作用,对高糖导致的损伤具有保护作用。