GluN3A基因缺失影响小鼠抑郁样行为及内侧前额叶皮质与海马mRNA转录组的实验研究

目的 探究GluN3A基因缺失参与抑郁样行为的潜在分子机制。方法 纳入成年雄性GluN3A基因敲除(knockout,KO)小鼠14只和同窝出生野生型(wild type,WT)小鼠15只,糖水偏好实验和强迫游泳实验后收集小鼠(每组5只)内侧前额叶皮质(medial prefrontal cortex,mPFC)和海马组织进行mRNA转录组测序,以DESeq2软件筛选差异表达基因并选取部分基因以qPCR进行验证,应用clusterProfiler软件对差异基因进行基因本体(Gene Ontology,GO)富集分析,应用string在线数据库和Cytoscape软件进行蛋白互作网络分析。结果 与WT小鼠相比,GluN3A KO小鼠糖水偏好(P<0.05)和糖水消耗量(P<0.05)显著下降,强迫游泳不动时间显著增加(P<0.01);在GluN3A KO小鼠mPFC和海马组织中分别筛选出740个和666个差异基因;GO分析显示,mPFC中下调差异基因显著富集在血管生成、神经前体细胞的增殖等条目,海马中下调差异基因主要富集在突触组装、轴突发育、树突发育、轴突引导、突触膜等条目,mPFC和海马中上调差异基因均主要与胞质核糖体和核糖体亚基有关;蛋白互作网络分析显示mPFC和海马中核心基因大部分为核糖体蛋白基因。结论 GluN3A基因缺失可能通过调控血管生成、神经前体细胞增殖、突触形成及蛋白合成等途径参与抑郁样行为的发生。

MK-801诱导的精神分裂症小鼠行为学和胼胝体髓鞘的改变

目的探讨白质/髓鞘损伤在N-甲基-D-天冬氨酸(N-methyl-D aspartate,NMDA)受体阻断致精神分裂症(schizophrenia,SZ)中的作用。方法雄性C57 BL/6J小鼠(8周龄)48只,随机分为地卓西平马来酸盐(dizocilpine,MK-801)慢性给药M1组(0.25mg/kg)、M2组(0.50mg/kg)和M3组(1.00mg/kg)及对照组(生理盐水)。以Morris水迷宫、探孔和转棒测试检验小鼠行为学改变,运用免疫组化、透射电镜及体视学方法观察其胼胝体内髓鞘的改变。结果各模型组小鼠与对照组比较,空间学习记忆能力无明显下降(均P>0.05),M1和M3组小鼠较对照组表现出对新环境探索减少的SZ阴性症状;大脑胼胝体区MBP染色M1组(179±10)%、M2组(235±7)%、M3组(152±9)%小鼠较对照组(288±18)%均降低(均P<0.01),其内有髓神经纤维髓鞘出现板层分离、节段性脱髓鞘等病变,M3组小鼠胼胝体内损伤有髓神经纤维比例高于对照组[(22.42±4.24)%vs.(3.84±1.35)%],差异有统计学意义(P<0.01)。结论胼胝体脱髓鞘改变可能是MK-801慢性给药诱导SZ的病因之一。

BRL-37344对豚鼠心肌细胞I_(Ca-L)、I_(to)的影响

目的为研究β3肾上腺素能受体介导的心脏生物学效应--β3肾上腺素能受体激活后心肌细胞电生理活动的变化。方法以原代培养的豚鼠心肌细胞为对象,采用全细胞膜片钳技术记录心肌细胞孵育β3肾上腺素能受体激动剂4-[-[2-hydroxy-(3-chlorophenyl)ethyl-amino]propyl]phenoxyacetate(BRL-37344;BRL)5～10min前后ICa-L,Ito(L型钙离子通道和瞬时外向钾通道)的变化。结果显示10-6mol/L的BRL显著增强豚鼠心肌细胞的Ito,上移I-V曲线;去极化刺激到+80mV时,电流密度从(6.11±1.03)pA/pF上升到(8.46±2.07)pA/pF(n=6,P=0.013064)。10-6mol/L的BRL显著增强豚鼠心肌细胞的ICa-L,为对照组的(2.30±0.75)倍(n=5,P=0.0063);去极化刺激到+10mV时,电流幅度从(89.25±17.83)pA上升到(205.00±72.24)pA。结论 BRL-37344可增强豚鼠心肌瞬时外向钾电流和L型钙电流,进而调控心脏的活动。

慕课环境下外语学习焦虑的影响因素研究

慕课作为最新的网络多媒体教学手段成为高校教育教学手段改革的焦点。通过问卷调查与随机抽样访谈的方式,分析研究在慕课环境下的外语学习焦虑的影响因素,为今后有效地利用慕课资源,进行更大规模的开发利用提供技术支持;同时,也为学生提高学习效率,更快更好地适应慕课这一最新的多媒体网络教育技术提供帮助。

影响共聚焦荧光法检测单细胞中蛋白表达的因素探讨

采用免疫荧光技术联合共聚焦技术研究不同培养细胞中蛋白的表达及定位.结果发现:①同样以丙酮固定293细胞,不用0.5%Triton X-100处理,着丝粒蛋白E亚型(CENP-E)在分裂期细胞核周浓聚,核内未见;而用0.5%TritonX-100处理后,CENP-E呈散点状分布于分裂期细胞的核内.②分别以甲醇、95%乙醇和4%多聚甲醛固定并以1%TritonX-100处理k562细胞,不同固定剂处理组间结果无明显差异,信号转导与转录激活因子(STAT3)均定位于胞浆.共聚焦系统PMT=511时,显示胞核染色适中,核仁染色明显,而PMT=593时,整个核呈饱和染色状,微细结构不清楚.③以2%甲醛联合0.5%TritonX-100处理平滑肌细胞,固醇调节元件结合蛋白裂解激活蛋白(SCAP)在整个细胞中呈弥散性分布,核内含量较高,高尔基体上SCAP无特异性高表达.结论:是否使用TritonX-100处理对293细胞中核蛋白CENP-E的定位具有较大影响;k562细胞对醛类固定剂及醇类固定剂无特殊选择性,图片采集时共聚焦参数PMT对蛋白定位结果也有影响;醛类固定剂和Triton联用可准确定位SCAP在平滑肌细胞中的表达.

中西文化对比在大学英语教学中的实现路径

全球一体化的趋势促使国内的大学英语教学开始重视跨文化教学,从而培养出具有国际视野的交流人才,然而目前大学英语教学中缺乏有效的中西文化对比的教学内容和手段。从目标、教材、教学和测试几方面探讨了在大学英语教学中实施中西文化对比教学的可行性和方法。

浅析现有网络自主学习模式的优缺点——以新视野大学英语网络自主学习平台为例

本文以新视野大学英语网络自主学习平台为例，探讨了现有的网络自主学习模式的优缺点，并提出改进建议，认为通过网络学习微任务化改良，可以最大限度的突出网络学习的特色，提升网络自主学习的效果。

意识流小说

意识流既不是小说流派,也不是理论流派,而主要是一种艺术手法或叙述方式。意识流小说的代表人物有乔伊斯、伍尔夫、福克纳三位大师。常用的表现手法与传统小说、常规心理描写有明显的区别。

护生职业态度形成的相关因素分析及教育干预

目的 促进及早期发展护生稳定而健康的职业态度。方法 对 73名护理本科生进行为期一年的教育干预及观察。结果 81 9%的护生曾产生过转行的念头 ,而见习后期 ,表示愿意从事护理职业的护生有 86 11% ,不愿意从事护理职业的占 2 78% ,另外 11 11%表示若有机会将转行或不确定是否能够从事护理职业。并不是任何人都适合护理工作 (P <0 0 5 ) ,人的生老病死都离不开护士 ,选择这个职业很有意义 (P <0 0 0 0 5 )的回答存在显著性差异。结论 临床见习阶段护生的职业态度发生变化 ,应在此阶段对护生采取积极的职业态度教育。

利用网络多媒体技术解决大学英语大班授课的弊端问题

在现有高校大学英语大班额教学环境下,利用网络多媒体自主学习的优势可以弥补传统大学英语课堂上大班教学的种种弊端,同时在新型课堂模式下的教师角色定位以及教学评价等问题也十分重要。

血管紧张素Ⅱ及替米沙坦对大鼠心房肌细胞钾和钙电流的影响

目的研究血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)和替米沙坦对SD大鼠心房肌细胞瞬时外向钾电流(Ito)和L型钙电流(ICa-L)的作用。方法急性酶解法分离SD大鼠心房肌细胞,采用全细胞膜片钳技术,观察AngⅡ、替米沙坦以及AngⅡ联合替米沙坦对大鼠心房肌细胞Ito和ICa-L的影响。结果 AngⅡ(0.1μmol/L)和替米沙坦(0.01μmol/L)以及两药联合均能抑制大鼠心房肌细胞Ito,AngⅡ组、替米沙坦组、联合组干预前后Ito的电流密度值比较差异有统计学意义[(22.48±2.75)vs(15.71±2.06)pA/pF,(24.16±2.36)vs(16.15±1.82)pA/pF,(24.41±2.27)vs(21.35±1.46)pA/pF,P<0.05]。AngⅡ(0.1μmol/L)能显著增强大鼠心房肌细胞ICa-L的峰值电流密度[(-4.51±0.38)vs(-5.16±0.29)pA/pF,P<0.01];替米沙坦(0.01μmol/L)对心房肌细胞ICa-L无明显作用[(-4.35±0.27)vs(-4.29±0.34)pA/pF,P>0.05],但联合组中替米沙坦可拮抗AngⅡ对ICa-L的增强效应[(-4.08±0.28)vs(-4.20±0.31)pA/pF,P>0.05]。结论 AngⅡ和替米沙坦对大鼠心房肌细胞具有直接的电生理作用,替米沙坦在受体水平上存在对AngⅡ的拮抗效应。

“What’s X doing Y?”构式的言外转喻分析

本文从认知语言学构式观出发,陈述了主要的认知语言学相关的理论框架,并综合目前国内外有关研究的最新进展成果,运用一些实例从言外转喻的角度探讨了"What’s X doing Y?"这一构式,并提出了对此构式的理解模式,以使英语学习者们能够加深对此构式的理解。

阿霉素脂质体制备工艺优化及节拍式给药细胞探讨

目的:优化阿霉素脂质体处方和制备工艺,利用节拍式低剂量给药化疗方式探讨阿霉素脂质体对HO-8910人卵巢癌细胞的体外杀伤作用.方法:采用硫酸铵梯度法制备脂质体,正交设计优选制备处方;葡聚糖凝胶柱层析法分离含药脂质体与游离药物并测定包封率;考察其体外释放度.以常规给药24h和节拍式低剂量给药144h的形式分别考察阿霉素脂质体、阿霉素体外细胞的毒性作用.结果:所得优化处方为:磷脂与胆固醇的质量比为3∶1,硫酸铵浓度为155mmol/L,药物与磷脂的质量比为1∶10,孵育温度为60℃.以优化处方制得的脂质体平均包封率达92.86%;脂质体具有一定的缓释作用.脂质体的细胞毒性实验结果显示,游离阿霉素与阿霉素脂质体IC50值24h分别为0.62μg/mL和0.46μg/mL,144h分别为0.06μg/mL和0.01μg/mL.结论:优化得到的阿霉素脂质体处方工艺简便,包封率高;无论是游离的阿霉素或是阿霉素脂质体,运用节拍式低剂量给药的方式在H0-8910细胞中抑制率都明显优于MTD化疗方式给药,其中脂质体药物节拍式低剂量给药方式对H0-8910细胞的抑制率明显优于游离药物.

NMDA受体3A亚基基因敲除对小鼠焦虑和抑郁样行为的影响

目的:观察N-甲基-D-天冬氨酸受体3A亚基(NR3A)编码基因GRIN3A敲除对小鼠焦虑和抑郁样行为的影响,以探讨NR3A亚基在抑郁症中的作用。方法:通过CRISPR/Cas9技术敲除C57BL/6N小鼠GRIN3A基因第2个外显子,繁殖获得足够数量的各组小鼠。使用糖水偏好实验,悬尾实验和强迫游泳实验检测小鼠抑郁样行为;使用高架O迷宫实验和旷场实验检测小鼠焦虑样行为。结果:雄性小鼠行为学显示:悬尾实验中GRIN3A^(-/-)小鼠不动时间比野生型小鼠长(P<0.01);糖水偏好实验GRIN3A^(-/-)小鼠糖水偏好(P<0.05)、总饮水量(P<0.01)和糖水饮用量(P<0.01)低于野生型小鼠,GRIN3A^(+/-)小鼠糖水偏好低于野生型小鼠(P<0.01),纯水饮用量高于野生型小鼠(P<0.01);高架O迷宫实验GRIN3A^(-/-)小鼠在封闭象限停留时间比野生型小鼠长;旷场实验GRIN3A^(-/-)小鼠粪便数多于野生型小鼠。雌性小鼠行为学显示:强迫游泳实验中GRIN3A^(-/-)小鼠不动时间比野生型小鼠长(P<0.01);糖水偏好实验GRIN3A^(-/-)小鼠糖水饮用量(P<0.01)和总饮水量(P<0.01)低于野生型小鼠。结论:雄性GRIN3A^(-/-)小鼠表现出明显的抑郁样和焦虑样行为,雄性GRIN3A^(+/-)小鼠和雌性GRIN3A^(-/-)小鼠表现出抑郁样行为。

髓鞘形成相关NMDA-R亚基在精神分裂症小鼠模型中的变化

目的:探讨髓鞘形成相关N-甲基-D-天冬氨酸受体(NMDA-R)亚基在MK-801诱导的精神分裂症小鼠模型大脑中的变化。方法:35只雄性C57BL/6J小鼠,随机分为:对照组(control)和地卓西平马来酸盐处理组(MK-801),利用旷场实验、探孔实验及高架十字迷宫检测小鼠行为学改变,免疫荧光染色观察小鼠大脑NMDAR亚基NR1的表达,real time RT-PCR检测髓鞘形成相关NMDA-R亚基NR1、NR2C和NR3A mRNA的表达。结果:与对照组小鼠相比,MK-801处理组在旷场内10 min总运动路程较对照组显著增加;3 min及5 min内探孔次数较对照组显著降低;模型组小鼠在开臂内停留总时间较对照组显著降低。NR1在小鼠神经细胞胞膜、轴突周围和髓鞘部位均有表达。大脑皮层、海马内的NMDA-R亚基NR1,NR2C及NR3A mRNA的表达在两组间均无显著差异;胼胝体区域NR1和NR2C mRNA表达在两组间同样无显著差异;但相较于对照组,MK-801慢性给药组小鼠胼胝体区域NMDA-R亚基NR3A mRNA表达显著上调。结论:NMDA-R在少突胶质细胞、髓鞘等部位确有表达;胼胝体部位NR3A亚基上调可能在MK-801诱导的精神分裂症中发挥作用。

Morris水迷宫实验测试谷氨酸功能低下精神分裂症小鼠模型认知障碍的相关研究

目的探讨Morris水迷宫传统实验方案在验证谷氨酸功能低下精神分裂症小鼠模型认知障碍中的作用。方法该研究于2016年9月—2017年9月在重庆国家生物产业基地实验动物中心选取雄性小鼠(8周龄)48只,随机分为地卓西平马来酸盐(Dizocilpine,MK-801)慢性给药Ⅰ组(0.25 mg/kg)、Ⅱ组(0.5 mg/kg)、Ⅲ组(1 mg/kg)和对照组,每组12只,观察每组小鼠的定位航行及空间探索情况。结果定位航行:各组小鼠逃避潜伏期均随训练天数的增加而下降,训练第1天4组小鼠逃避潜伏期分别为(42.24±11.06)s、(47.06±12.90)s、(43.88±11.36)s、(40.47±12.03)s,而第6天下降为(7.73±3.79)s、(7.44±3.02)s、(6.43±1.93)s、(9.06±8.04)s,但各组间动物的逃避潜伏期差异无统计学意义(F=0.761,P=0.522);两两比较:训练第3天,1 mg/kg MK-801剂量组小鼠逃避潜伏期(21.60±18.42)s显著高于对照组小鼠(11.34±5.85)s(F=127.361,P<0.001);空间探索:各组小鼠间穿台次数、目标象限停留时间、平均游泳速度及游泳总路程差异无统计学意义。结论 Morris水迷宫传统实验设计不易评估MK-801(NMDA受体阻断)诱导的谷氨酸功能低下精神分裂症小鼠模型的认知障碍。

IgH/TCR基因重排与EB病毒原位杂交联合分析在淋巴瘤诊断中的应用

目的探讨免疫球蛋白重链/T细胞受体(IgH/TCR)基因重排检测联合EB病毒(EBV)原位杂交在淋巴瘤诊断中的应用,分析EBV+-B细胞淋巴瘤的细胞学及基因组学特征、鉴别诊断要点,以缩短诊断时间,减少误诊。方法采用IgH/TCR基因重排与EB原位杂交联合分析诊断EBV+-B细胞淋巴瘤1例,分析其免疫组化特征、EBV原位杂交、基因重排结果。结果 EBV+-B细胞淋巴瘤临床上主要表现为淋巴结增大,常伴骨髓和外周血浸润。淋巴结活检显示其结构破坏,淋巴滤泡减少,淋巴结高度增生性病变,可见轻至中度异型淋巴细胞,淋巴窦扩张,组织细胞增生。免疫组化证实EBV感染的细胞毒性B细胞构成病变主体;EBV原位杂交显示部分淋巴细胞核阳性;基因重排提示IgH、免疫球蛋白轻链(Igκ)基因发生克隆性重排,TCRγ无克隆性重排。结论 EBV+-B细胞淋巴瘤从形态学上难以与伯基特淋巴瘤、慢性淋巴细胞白血病等淋巴瘤区分,早期诊断困难。联合应用IgH/TCR基因重排与EBV原位杂交技术对EBV+-B细胞淋巴瘤的诊断有较高准确性。

浅析现代教育技术应用于大学英语教学中的优势与弊端

本文简介了现代教育技术的起源和发展过程。通过对传统教学模式进行分析讨论，提出现代教育技术手段的应用是现代外语教学发展的瑟然趋势，并对现代教育技术辅助大学英语课堂教学的优势以厦弊端等问题进行了初步探讨，指出只有更新观念和借助现代教育技术手段，才能从根本上全面提高学生的英语语言能力，从而改善教学质量。

NMDA-R阻断对少突胶质细胞增殖的影响及其可能的机制

为探讨N-甲基-D-天冬氨酸受体(NMDA-R)在少突胶质细胞增殖中的作用及其可能的机制。本研究以C57BL/6J小鼠原代少突胶质细胞为研究对象,随机分为对照组和MK-801组,运用CCK-8、EdU方法检测细胞增殖情况,运用qRT-PCR及Western blot技术检测NMDA-R亚基NR1、NR2C、NR3A mRNA及蛋白表达情况。结果证实NMDA-R阻断剂MK-801呈浓度依赖性减少少突胶质细胞数量,即随着MK-801浓度增加,少突胶质细胞数量逐渐减少;MK-801组少突胶质细胞增殖数量(32.95±8.47)%较对照组(42.44±7.35)%明显减少(p=0.015);与对照组比较,MK-801组少突胶质细胞NMDA-R亚基NR1 mRNA(1.04±0.29 vs 0.53±0.27,p=0.01<0.05)及蛋白表达(1.00±0.10 vs 0.79±0.17,p=0.016<0.05)均降低,NR3A亚基mRNA表达也降低(1.08±0.15 vs 0.79±0.25,p=0.038<0.05),但NR2C亚基mRNA表达无变化(1.18±0.08 vs 1.02±0.17,p=0.519>0.05)。NMDA-R被阻断剂MK-801阻断后对少突胶质细胞的增殖具有抑制作用,这种作用可能通过下调NR1、NR3A亚基来介导。