四海舒郁丸介导miRNA-494对甲状腺乳头状癌细胞的干预作用

【目的】探讨四海舒郁丸含药血清对甲状腺乳头状癌细胞miRNA-494及靶基因PTEN和相关通路PI3K/AKT的干预机制。【方法】将2月龄SPF级雄性SD大鼠随机分为四海舒郁丸低、中、高剂量组与空白组,每组5只,灌胃给药后制备四海舒郁丸含药血清和空白组血清(等量生理盐水)并作用于体外培养的细胞。试验组甲状腺乳头状癌细胞选用KTC-1细胞株,分为空白组(2 mL/(100 g·d)生理盐水),低、中、高剂量组(分别为0.24、0.48、0.96 g/(100 g·d)),正常组甲状腺组织细胞选用Nthy-ori-3-1。通过CCK-8探究细胞的活力的影响;RTqPCR检测miRNA-494-5p及PTEN的mRNA表达水平,Western Blot法检测PTEN及下游PI3K/AKT通路蛋白表达水平。【结果】四海舒郁丸能抑制KTC-1细胞的活性,且作用随浓度的增加而增强(P<0.01),但无时间依赖性;相比较于KTC-1空白组,四海舒郁丸低、中、高剂量组中miRNA-494-5p的mRNA表达均降低(P<0.01),PTEN的mRNA表达量增加,其中高剂量组差异有统计学意义(P<0.05);高、中、低剂量组中p-PI3K/p-AKT信号通路蛋白表达均明显下降(P<0.05),而PTEN蛋白表达均有所增加(P<0.01)。【结论】四海舒郁丸含药血清通过下调miRNA-494-5p后负向调控PTEN进而阻断PI3K/AKT通路对PTC发挥辅助抑癌作用。