Ipr1重组卡介苗对小鼠结核病的治疗效果

目的评估携带小鼠胞内病原体抗性基因1(intracellular pathogen resistance1,Ipr1)质粒(pBOGI)的重组卡介苗(BCG)对结核分枝杆菌(Mtb)感染的治疗效果。方法BALB/c小鼠30只,随机分为3组:分别滴鼻给予磷酸盐缓冲液(PBS)、BCG和重组BCG,2周后用人型Mtb H37Rv标准株感染所有小鼠;感染后分别用PBS、BCG和重组BCG治疗7次;末次治疗后处死小鼠,检测肺脾荷菌量,肺脾脏器指数,血清IFN-γ、IL-10及TNF-α分泌水平和肺脾组织中Ipr1的表达,同时观察小鼠肺脾组织病理改变情况。结果重组BCG组肺脾荷菌量比PBS组和BCG组显著降低(P<0.01);重组BCG组肺脾脏器指数比PBS组和BCG组显著降低(P<0.05);重组BCG组血清IFN-γ分泌水平比PBS组和BCG组显著升高(P<0.01)。用免疫组化检测到小鼠肺脾组织中有Ipr1表达。PBS组肺组织病理改变以渗出为主,病变广泛;重组BCG组肺部病变最轻,肺泡结构基本正常;BCG组病变范围局限,病变程度界于PBS组与重组BCG组之间;各组间比较脾脏病理改变不明显。结论携带小鼠Ipr1基因的重组BCG对结核分枝杆菌感染有一定的治疗作用。

一氧化氮对糖尿病小鼠近端结肠动力有抑制作用

目的:研究一氧化氮(NO)对糖尿病小鼠近端结肠收缩功能的作用。方法:制备C57小鼠糖尿病(DM)模型,用硝酸还原酶法检测近端结肠组织NO水平;用免疫印迹法分析近端结肠组织nNOS和iNOS的含量;用免疫荧光染色观察近端结肠中nNOS的分布;用MD-2000生物信号采集分析系统观察NO前体L-精氨酸(L-Arg)、nNOS的抑制剂7-硝基吲唑(7-NI)、iNOS的抑制剂氨基胍(AG)对糖尿病小鼠近端结肠离体肌条肌张力的影响。结果:nNOS主要分布在近端结肠肌层和黏膜下层,DM组nNOS蛋白和NO水平与正常组比较显著升高,未发现有iNOS蛋白表达。DM组小鼠近端结肠肌张力较正常组降低,但收缩频率无改变。L-Arg可显著抑制正常组和DM组小鼠近端结肠肌的张力,7-NI可显著增强正常组和DM组小鼠近端结肠的肌张力,而加入AG前后结肠张力均无显著变化。所有药物对结肠收缩频率无影响。结论:NO抑制结肠平滑肌收缩能力可能是糖尿病结肠动力功能障碍的重要原因,其作用与nNOS在近端结肠表达增多相关。

ATS软件模型研究

针对ATS软件规模和复杂度的增加带来的系统描述和集成问题,给出了ATS软件的概念模型、信息模型和系统模型,阐述了三者之间的关系,为ATS软件的体系结构通用性、仪器互换性、软件移植性和系统互操作性设计提供了解决方案。

咪喹莫特乳膏的皮肤刺激性和过敏性研究

目的探讨咪喹莫特乳膏皮肤用药的安全性。方法用12只白兔做皮肤刺激性试验,分为完整皮肤组和破损皮肤组各6只,连续给药14d后取给药皮肤进行病理检查;用40只豚鼠做皮肤主动过敏性试验,分为咪喹莫特乳膏组20只、空白乳膏对照10只及2,4-二硝基氯苯阳性对照组10只,于第0、7、14天用封闭片局部给药以诱导,第27天在未给药的肋腹部贴6h以局部激发,观察咪喹莫特乳膏是否引起豚鼠皮肤或全身过敏反应。结果在给药过程中引起新西兰白兔皮肤产生红斑刺激性症状,但在给药9d后皮肤基本恢复正常,右侧对照未见异常。病理检查结果显示:咪喹莫特乳膏对新西兰白兔皮肤的敏感个体有轻度局部刺激作用;皮肤主动过敏试验未引起豚鼠皮肤过敏反应和全身过敏反应。结论咪喹莫特乳膏引起动物皮肤的轻微刺激性,但未引起动物的过敏性反应。

体验式服务在眼科护理管理中的应用

目的对眼科护理管理中应用体验式服务的效果进行分析研究。方法选取于2014年3月—2016年1月期间该院眼科的54例护理人员作为该次的研究对象,并随机分为参照组和实验组各27例,对分别应用常规护理管理和体验式服务管理的效果进行对照研究。结果实验组护理人员的基础护理合格率、护理文书书写合格率、护理技术操作合格率、患者护理满意度评分、护理质量评分、护理操作准确评分均明显高于参照组,护理差错发生率、护患纠纷发生率明显低于参照组,组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论眼科护理管理中应用体验式服务的效果十分理想,能够大大提高护理管理效果,对于提高患者对护理服务的满意度以及降低护理差错发生率、护患纠纷发生率均具有至关重要的作用。

肿瘤特异性锚定型α-gal模拟表位真核表达质粒的构建及功能研究

目的构建Survivin启动子调控的、α-gal模拟表位序列和GPI锚定序列融合基因的真核表达质粒,研究该质粒在肺癌A549细胞表面锚定表达α-gal模拟表位及其抗肺癌细胞效应。方法 PCR法扩增gal-GPI融合基因,以pSGFP质粒为载体,构建Survivin启动子调控的pSGFP-gal-GPI真核表达质粒。将其用脂质体瞬时转染A549细胞后,用荧光显微镜观察GPI锚定表达功能,分别用免疫组化法和Western-blot法对锚定表达的α-gal模拟表位进行定位和免疫反应性分析,并用新鲜人血清对表达α-gal模拟表位的A549细胞进行补体介导的溶细胞效应研究。结果 pSGFP-gal-GPI质粒转染细胞的绿色荧光不均匀分布在细胞膜周围,免疫细胞化学分析表明重组融合蛋白表达在细胞膜上,Western-blot结果表明重组融合蛋白与人IgG有良好的免疫反应性;人新鲜血清对表达该表位的A549细胞具有明显的溶细胞效应。结论成功构建了能在A549细胞膜锚定表达α-gal模拟表位的pSGFP-gal-GPI真核表达质粒,为肺癌等靶向基因治疗奠定了基础。

转录因子YY1促进下咽癌细胞的迁移能力

目的分析转录因子YY1对人下咽癌细胞系FaDu迁移能力的影响。方法提取下咽癌及癌旁正常组织全RNA,通过real-time PCR分析YY1表达水平差异;将转录因子YY1 siRNA转染至下咽癌FaDu细胞中,通过real-time PCR和Western blot检测转染效率;通过Transwell实验检测敲减YY1对下咽癌FaDu细胞迁移能力的影响。结果与癌旁正常组织相比,YY1在下咽癌组织中显著上调(P<0.05);YY1 siRNA能够显著降低YY1的mRNA和蛋白相对表达量(P<0.05);与对照组相比,敲减YY1后下咽癌FaDu细胞迁移能力显著降低(P<0.05)。结论YY1在下咽癌中是潜在的癌基因,并能够促进下咽癌FaDu细胞迁移的能力,参与下咽癌的转移过程。

论疼痛护理干预联合盐酸羟考酮缓释片在胃癌癌痛患者中的应用价值

研究疼痛护理干预和盐酸羟考酮缓释片联合用于胃癌癌痛的价值。方法:2018年12月-2020年11月本科接诊胃癌癌痛病患52例,随机均分2组。研究组联用疼痛护理干预和盐酸羟考酮缓释片,对照组用常规护理和盐酸羟考酮缓释片。对比NRS评分等指标。结果:针对NRS评分,研究组干预后(2.69±0.38)分,比对照组(4.63±0.69)分低,P<0.05。结论:于胃癌癌痛中联用疼痛护理干预和盐酸羟考酮缓释片,利于疼痛程度的减轻。

壳聚糖絮凝法澄清天麻提取液的工艺优选

目的:优选壳聚糖澄清天麻提取液的工艺条件,为该药材的临床应用提供参考。方法:采用HPLC测定天麻素含量,流动相乙腈-水(3∶97),检测波长220 nm。以澄清效果和固形物含量为指标,在单因素试验基础上,通过正交试验考察壳聚糖添加量、药液浓缩比、絮凝温度、静置时间对天麻水提液壳聚糖絮凝工艺条件的影响。结果:最佳工艺条件为壳聚糖添加量0.15%,药液浓缩比1∶13 g·m L-1,絮凝温度25℃,静置时间10 h。天麻素质量浓度65.93 g·L-1,含固量3.157%。结论:采用壳聚糖絮凝法澄清天麻提取液的方法简单易行、经济实用、澄清效果好,适用于中药水提液的精制。

维甲酸核受体RARα真核表达载体的构建、突变纠正及表达

目的构建维甲酸核受体RARα真核表达载体,并检测其在人肺腺癌细胞A549中表达。方法从小鼠巨噬细胞RAW264.7中提取总RNA,以RT-PCR法扩增RARαcDNA,克隆至真核表达载体pDsRed1-C1中,测序结果显示RARα第1040位A→G,导致其编码蛋白的氨基酸发生改变。通过二次PCR将其纠正,重组载体RedC1-RARα转化大肠埃希菌Top10,筛选阳性克隆做酶切及测序鉴定。脂质体瞬时转染A549细胞,在荧光显微镜下观察RARα的表达。RT-PCR法检测RARα的mRNA水平表达。结果通过RT-PCR及二次PCR得到RARαcDNA,构建其真核表达载体,脂质体瞬时转染A549细胞得到了成功表达,RARα基因产物定位于细胞核内。结论成功构建维甲酸核受体RARα真核表达载体,且证实RARα编码蛋白定位于细胞核内,本研究结果为进一步探讨结核分枝杆菌固有免疫机制奠定了基础。

靶向肠道病毒71型VP1基因的siRNA表达质粒的构建

目的构建靶向肠道病毒71型(EV71)VP1基因的siRNA表达质粒,并进行鉴定。方法构建靶向EV71VP1基因的siRNA表达质粒pSVSi1、pSVSi2和pSVSi3;脂质体法转染A549细胞株,筛选阳性克隆,通过荧光定量PCR和Western blot,分别在mRNA水平和蛋白水平鉴定EV71VP1基因的表达。结果质粒pSVSi1、pSVSi2和pSVSi3经测序证明构建正确。pSVSi1对A549细胞VP1基因的抑制效果最好,在mRNA和蛋白水平上的抑制率分别为87%和89%,pSVSi2和pSVSi3在mR-NA水平上的抑制率分别为60%和70%。结论已成功构建了靶向EV71VP1基因的siRNA表达质粒,并筛选出一种对VP1基因有显著抑制作用的siRNA,为手足口病的siRNA基因治疗奠定了基础。

低氧和缺氧诱导因子-1α对人白血病细胞株K562细胞血管相关生成因子的影响

目的观察低氧和缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)对K562细胞分泌血管相关生成因子的影响。方法选用携带和干扰HIF-1α基因的慢病毒转染K562细胞,以转染携带和干扰HIF-1α基因的K562细胞分别作为过表达组、干扰组,同时以空载病毒转染K562细胞作为对照组,3组在低氧状态下培养72h后收集细胞。通过荧光显微镜观察转染效率,采用RT-PCR法检测HIF-1α和血管相关生成因子mRNA表达水平;ELISA法检测培养上清液中血管相关生成因子蛋白水平。结果慢病毒转染K562细胞最佳感染复数(MOI)为10,转染效率约50%,经过嘌呤霉筛选后转染阳性细胞达90%以上。干扰组人血管生成素(ANG)-Ⅱ和血管内皮生长因子(VEGF)mRNA表达均低于过表达组,而转化生长因子(TGF)-βmRNA表达高于对照组和过表达组,过表达组ANG-ⅡmRNA表达高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。培养上清液中TGF-α未检测到,过表达组ANG-Ⅱ水平低于对照组(P<0.05);过表达组VEGF和TNF-α水平高于对照组,干扰组TGF-β和VEGF水平低于对照组(P<0.05)。干扰组TGF-β、VEGF和TNF-α水平低于过表达组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论低氧和HIF-1α可影响慢性白血病K562细胞血管生成相关因子的表达和自分泌,但在mRNA表达和蛋白分泌水平上存在差异。

如何在中学地理教学中渗透环境教育

环境问题已严重威胁到人类的生存,提高全人类的环境保护意识必要而紧迫.环境教育是当前世界各国普遍高度重视的教育领域,而地理教学是渗透环境教育的最好途径之一.在实际教学中,教师要根据教学内容,采取多种途径进行环保教育,从而提高学生的环保意识,实现地理教学与环境教育的双赢.

谈谈电子地图在中学地理教学中的作用

地图对于地理学习的重要性,目前使用最广泛的地图是地理教材的插图和地理地图册,然而信息更新较慢,无法放大,不容易复制,已经无法适应学生发展的要求.在生活中,以汽车导航图为主的电子地图迅猛发展起来,电子地图的使用是社会进步、科技发展的必然趋势,但是在教学中电子地图的使用较少,电子地图走进课堂是必然的,电子地图的优势也较为明显.电子地图在中学地理教学中有着非常重要的作用.