两种去污剂在制备脱细胞肺支架中的对比

背景:制备脱细胞肺支架的一个困难在于必须充分去除细胞同时尽可能保留细胞外基质。灌注去污剂-核酸酶法已被广泛应用于脱细胞支架的制备。目的:对比脱氧胆酸钠和十二烷基硫酸钠两种去污剂用于制备脱细胞肺支架的效果。方法:取出24只雄性SD大鼠肺脏,分3组,正常对照组不进行任何干预;脱氧胆酸钠组灌注去污剂脱氧胆酸钠联合核酸酶,制备脱细胞肺支架;十二烷基硫酸钠组灌注去污剂十二烷基硫酸钠联合核酸酶,制备脱细胞肺支架;取3组肺组织,进行组织学染色、免疫荧光染色及DNA含量测定。将A549细胞分别接种于两组脱细胞肺支架上培养7 d,进行苏木精-伊红染色。将两组脱细胞肺支架分别埋于SD大鼠背部皮下,2周后进行移植组织Masson染色。结果与结论:(1)正常对照组肺组织布满细胞,两脱细胞肺支架均没有残留的细胞和细胞核,但脱氧胆酸钠组肺支架内肺泡形态结构较十二烷基硫酸钠组完整;两组肺支架的DNA含量均低于正常对照组(P<0.01);(2)培养7 d,两组肺支架上的细胞均是由边缘向组织中间生长、浸润,脱氧胆酸钠组肺支架内的细胞生长、浸润速度明显优于十二烷基硫酸钠组;(3)肺支架移植2周后,十二烷基硫酸钠组肺支架与周围组织融合欠佳,边界清楚,可见大量细胞浸润,分布较均匀,血管内血细胞清晰可见;脱氧胆酸钠组肺支架内新生血管数量明显多于十二烷基硫酸钠支架,并且新生血管直径更大;(4)结果表明与十二烷基硫酸钠相比,采用去污剂脱氧胆酸钠制备的脱细胞肺支架生物相容性更好,与周围组织融合速度更快,细胞浸润和新生血管形成更明显。