胰岛素联合利奈唑胺抑制糖尿病细菌性肺炎的机制研究

试验旨在研究胰岛素联合利奈唑胺是否同时具有降糖、抗菌以及抑制α-溶血素活性,从而抑制糖尿病细菌性肺炎。本研究通过体外试验探讨了联合用药对高糖和金黄色葡萄球菌α-溶血素共同诱导的巨噬细胞炎症反应的作用,并探讨其机制。通过药物敏感试验测定最小抑菌浓度(MIC);通过检测D600 nm值绘制生长曲线来考察胰岛素、利奈唑胺单独或联合胰岛素的抗菌活性;通过溶血试验考察药物组合对α-溶血素活性的抑制效果;通过细胞毒性试验判定药物组合的体外安全性;借助Western blotting药物组合对炎症通路蛋白的作用。药物敏感性试验结果显示,胰岛素组未检测到金黄色葡萄球菌8325-4株和DU1090株的MIC值,利奈唑胺和胰岛素+利奈唑胺药物组合对这两种金黄色葡萄球菌的MIC均为0.5μg/mL;由生长曲线结果可知,胰岛素不抑制正常组和高糖组金黄色葡萄球菌的生长,但是在利奈唑胺组和胰岛素+利奈唑胺药物组合组,0.25~4μg/mL利奈唑胺可抑制金黄色葡萄球菌的生长;溶血试验结果显示,正常组和高糖组胰岛素均不抑制α-溶血素活性,0.25~4μg/mL利奈唑胺均可抑制α-溶血素活性;细胞毒性试验显示,正常组和高糖组,细胞存活率均大于88.038%,50 nmol/L胰岛素、0.25μg/mL利奈唑胺、50 nmol/L胰岛素+0.25μg/mL利奈唑胺药物组合可提高高糖诱导的MH-S细胞存活率;Western blotting结果显示,50 nmol/L胰岛素单独使用对高糖和α-溶血素共同诱导小鼠肺泡巨噬细胞(MH-S细胞)中TLR2、MAPKs及NLRP3蛋白的表达水平没有抑制作用,而50 nmol/L胰岛素联合0.25μg/mL利奈唑胺可降低高糖和α-溶血素共同诱导MH-S细胞中上述蛋白的表达水平,其抑制作用比单独使用利奈唑胺时显著。综上所述,胰岛素联合利奈唑胺可通过降糖、抗菌和抑制α-溶血素活性的方式抑制小鼠肺泡巨噬细胞炎症反应。

DWM1000模块的UWB机器人室内定位系统

传统移动机器人室内定位采用激光扫描仪、摄像头,激光SLAM、视觉SLAM计算复杂,实时性较差,并且成本较高。本文将UWB定位技术应用于移动机器人室内定位,采用到达时间差法TDOA实现UWB定位,构建了基于UWB技术的移动机器人定位平台,软硬件自主开发,通过实践证明,本系统具有很好的可靠性和可行性,定位精度在±5cm以内。

两轮差速的服务机器人底盘驱动系统设计

底盘驱动系统技术是服务机器人的关键技术,本文提出了基于DRV8701P、STM32F103的服务机器人底盘驱动系统,实现直流电机的驱动,完成服务机器人两个动力轮的驱动、控制;电路拓扑为H结构,实现电机正反转,电流可以达到40A,电压可以到达45V,占空比可以实现0～100%,控制范围很广。

移动机器人的锂电池BMS管理系统设计

锂电池BMS管理技术是移动机器人的关键技术,本文设计了基于bq76PL455、STM32F103的锂电池管理系统,实现了电池组电压、电流、过压、过流等状态监测;系统配置均衡电路,电池充电过程中若出现电池单体电压不平衡现象,会触发均衡电路,进而提高电池的安全性,延长使用寿命。

基于CRISPR/Cas9技术的法尼醇X受体缺失株的构建及其对HeLa细胞增殖的影响

试验旨在利用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建法尼醇X受体(FXR)基因稳定敲除细胞株,并考察其对HeLa细胞增殖的影响。根据CRISPR/Cas9靶点设计规则,设计3对特异性识别FXR基因第1外显子相关序列的上下游小向导RNA(small guide RNA,sgRNA),以PX459质粒为载体,构建真核重组表达质粒。酶切和测序鉴定后将重组质粒转染至HeLa细胞中,用嘌呤霉素进行阳性细胞筛选,再用实时荧光定量PCR检测HeLa细胞FXR基因敲除稳定株中FXR的表达量,并用Western blotting方法鉴定HeLa细胞FXR基因敲除效果。最后用结晶紫染色试验检测FXR基因敲除对HeLa细胞增殖的影响。结果显示,经测序后,3对sgRNA位置与方向均正确插入到PX459质粒载体内,成功构建出重组表达质粒PX459-sgRNA;实时荧光定量PCR和Western blotting检测结果显示,转染后筛选出的细胞中FXR蛋白不表达,表明构建出稳定敲除FXR基因的HeLa细胞株;结晶紫试验结果发现,FXR基因敲除的HeLa细胞染色深度明显低于正常HeLa细胞,FXR基因敲除HeLa细胞孔D 595 nm值极显著低于野生型HeLa细胞孔(P<0.01),说明HeLa细胞FXR基因敲除株的增殖能力较正常HeLa细胞显著降低。本试验利用CRISPR/Cas9技术成功获得了内源FXR基因敲除细胞株,且FXR基因敲除对癌细胞增殖具有显著抑制作用,为研究FXR的功能和作用机制提供了细胞模型,并为研究FXR在相关癌症发生发展中的作用奠定了基础。

破骨细胞胞外陷阱在类风湿性关节炎致病机制中的作用

该文主要分析了破骨细胞(osteoclasts,OCs)释放胞外陷阱(extracellular traps,ETs)的机制。利用免疫荧光、扫描电镜及免疫印迹等技术探究经II型胶原(type II collagen,CII)和佛波醇12-十四酸酯13-乙酸酯(phorbolmyristate 13-acetate,PMA)分别处理的破骨细胞导致胞外陷阱形成机理。结果表明,CII和PMA均能够引起破骨细胞胞外陷阱的形成,PMA诱导产生的是NOX依赖性胞外陷阱,而CII诱导产生的是NOX非依赖性胞外陷阱;结果还表明,II型胶原和PMA均通过AKT激活调控胞外陷阱的形成。总之,CII和PMA均可诱导破骨细胞形成胞外陷阱,探究其产生机制可以为类风湿性关节炎的有效治疗奠定基础。