阿托伐他汀对低密度脂蛋白受体基因敲除小鼠IL-17a、LP-PLA2表达的影响

目的:探讨阿托伐他汀对低密度脂蛋白受体基因敲除(LDLR-/-)小鼠白介素-17a(IL-17a)、脂蛋白相关磷脂酶A2(LP-PLA2)表达的影响。方法:取18只8周龄雄性LDLR-/-小鼠,12只给予高脂饮食(高脂饮食组)用于建立动脉粥样硬化模型,6只给予普通饮食作为普食对照组。8周后,将高脂饮食小鼠随机分成2组:高脂对照组(n=6)和治疗组(n=6,阿托伐他汀60 mg·kg-1·d-1灌胃),继续给予高脂饮食。8周后处死小鼠,全自动生化仪测血清血脂水平,HE染色观察斑块形态,q RT-PCR测主动脉中IL-17a和LP-PLA2的m RNA表达,免疫组织化学法测斑块中IL-17a的表达,Western blot法测主动脉中LP-PLA2的表达。结果:高脂对照组血清总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL)含量均明显高于普食对照组(均P<0.05),甘油三酯(TG)含量两者差异无统计学意义(P>0.05)。治疗组与高脂对照组相比,血清TC、LDL含量明显降低(均P<0.05),TG含量两者差异无统计学意义(P>0.05)。高脂对照组小鼠主动脉组织内可见明显动脉粥样硬化斑块形成,斑块内IL-17a的平均吸光度值(MA)高于普食对照组(P<O.05)。治疗组与高脂对照组相比,斑块明显减少,斑块内IL-17a的MA也明显降低(P<0.05)。高脂对照组主动脉IL-17a和LP-PLA2的m RNA表达以及LP-PLA2蛋白的表达均高于普食对照组(均P<O.05)。治疗组与高脂对照组相比,主动脉IL-17a和LP-PLA2的m RNA以及LP-PLA2蛋白的表达均明显降低(均P<0.05)。结论:阿托伐他汀可降低LDLR-/-小鼠动脉粥样硬化模型中的血脂水平,可有效抑制IL-17a、LP-PLA2的表达,对抗动脉粥样硬化的作用。

黄酒对TNF-α诱导的大鼠血管内皮功能的影响

目的：探讨黄酒对TNF-α诱导的大鼠血管内皮功能的影响。方法大鼠原代主动脉血管内皮细胞（VECs）经分离培养及纯化鉴定后，取第3～4代细胞用于实验。不同浓度酒精（1.0%、1.2%、1.4%、1.6%、1.8%、2.0%）与50μg/L TNF-α共同孵育大鼠 VECs）48h，MTT 法检测酒类对细胞活性的影响，确定最佳干预浓度后分为对照组、TNF-α组、TNF-α＋瑞舒他汀组（10μmol/L）、TNF-α＋酒精组（0.5%、1.0%、1.5%）、TNF-α＋黄酒组（0.5%、1.0%、1.5%），共9组。培养24h后收集样品，硝酸还原酶法测定培养液上清液NO的含量，化学比色法测定血浆中内皮型一氧化氮合酶（eNOS）活性，免疫印迹法检测VECs中eNOS、细胞间黏附分子-1（ICAM-1）的表达量。结果与TNF-α组相比，瑞舒伐他汀组、黄酒1.0%组、黄酒1.5%组eNOS活力、eNOS的表达及NO含量升高（P＜0.01或0.05），ICAM-1表达降低（P＜0.01或0.05）；与瑞舒伐他汀组相比，黄酒1.0%组及黄酒1.5%组eNOS表达降低，ICAM-1表达升高（P＜0.01或0.05）。结论小剂量黄酒能够增强eNOS的活力及其表达，可使NO含量增加，抑制ICAM-1表达，具有类他汀样作用。

三个新的小鼠Pax-8剪接体的克隆及时空表达

目的:转录因子Pax-8在胚胎发育及肿瘤发生中具有重要作用,本研究旨在克隆及鉴定小鼠Pax-8基因亚型,并检测其时空表达。方法:从野生型C57BL/6胎鼠的心脏中提取总RNA(Trizol法),反转录成c DNA,应用Q5超保真酶进行目的基因扩增,并克隆至真核表达质粒,进行酶切鉴定及测序鉴定。结果:在小鼠发育不同时期,除已知全长Pax-8a外,发现3个新的小鼠Pax-8选择性剪接体,分别命名为Pax-8b(第4外显子缺失)、Pax-8c(第4和第11外显子缺失)、Pax-8d(第4和第9外显子缺失)。结论:小鼠心脏中Pax-8存在四种选择性剪接体,且在不同发育时期差异表达。

替米沙坦通过上调大鼠视网膜ACE2-Ang-（1—7）-Mas轴抑制细胞凋亡

目的研究血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂替米沙坦对自发性高血压大鼠（spontaneouslyhypertensionrat，SHR）视网膜血管紧张素转化酶2（ACE2）一血管紧张素（1—7）[Ang-（1—7）]-G蛋白耦联受体Mas轴的影响，以及其对视网膜血管内皮细胞凋亡的作用。方法SHR36只，雄性，16周龄，随机数字表法分成3组，即SHR组、SHRT组和SHRTA组，每组12只。SHRT组给予替米沙坦lOmg·kg-1·d-1灌胃，SHRTA组给予替米沙坦10mg·kg-1·d-1灌胃，并给予选择性Ang-（1-7）拮抗剂A-7790．5mg·kg-1·d-1静注，SHR组不予药物处理，另设12只同周龄雄性京都种大鼠（WistarKyotorat，WKY大鼠）作为对照组。分别测定给药前（16周龄时）及给药后（24周龄时）大鼠鼠尾收缩压，于24周处死大鼠，采用实时定量聚合酶链反应（qRT—PCR）、蛋白印迹法（Westernblot）、免疫组织化学法分别检测视网膜ACE2、MasmRNA和蛋白表达水平，ELISA检测血清Ang-（1—7）浓度，苏木素伊红（HE）染色观察视网膜血管铺片毛细血管情况，原位DNA末端酶标记技术（TUNEL）检测视网膜血管铺片细胞凋亡情况。结果16周龄时SHR组、SHRT组和SHRTA组大鼠鼠尾收缩压均较对照组高（P均〈0．01），24周龄时SHRT组大鼠鼠尾收缩压较SHR组低（P〈0．01），SHRTA组则较SHRT组高（P〈0．05）。24周龄时SHR组大鼠视网膜ACE2mRNA和蛋白表达水平均低于对照组和SHRT组（P均〈0．01），而SHRT组与SHRTA组问差异无统计学意义（P〉0．05）。24周龄时SHR组大鼠视网膜MasmRNA和蛋白表达水平均低于对照组（P均〈0．01），SHRT组均高于SHR组（P均〈0．01），SHRTA组则均低于SHRT组（P均〈0．05）。24周龄时SHR组大鼠血清Ang．（1-7）浓度低于对照组（P〈0．01），SHRT组高于SHR组（P〈0．05），SHRTA组则低于SHRT组（P〈0．01）。24周龄时SHR组大鼠视网膜血管铺片TUNEL阳性细胞百分率高于对照组（P〈0．01），SHRT组低于SHR组（P〈0．01），SHRTA组则高于SHRT组（P〈0．05）。结论替米沙坦可上调SHR视网膜ACE2-Ang-（1-7）-Mas轴，从而发挥抗视网膜血管内皮细胞凋亡的作用。