探究人参-丁香醇提物抑制脂质合成并对其机制进行初步研究。通过建立丰产脂肪酸的高山被孢霉(Mortierella alpina,MA)脂质筛选模型,利用2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)筛选出脂质合成抑制最优的人参丁香药对用药比例和提取溶媒,测定MA内...探究人参-丁香醇提物抑制脂质合成并对其机制进行初步研究。通过建立丰产脂肪酸的高山被孢霉(Mortierella alpina,MA)脂质筛选模型,利用2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)筛选出脂质合成抑制最优的人参丁香药对用药比例和提取溶媒,测定MA内甘油三酯含量、电镜观察其形态并进行脂肪酸气质(GC-MS)分析,通过RT-PCR法测定乙酰辅酶A羧化酶(ACC)、ATP-柠檬酸裂解酶(ACLY)、脂肪酸合酶(FAS)和苹果酸酶(ME)基因的mRNA表达并对相关酶活力进行检测,对3T3-L1前脂肪细胞采用MTT法测定其增殖活力同时采用油红O染色法测定细胞分化中脂质积累的能力并加以论证。结果显示,人参丁香药对抑制脂质合成的最优比例和提取溶媒是人参-丁香质量比为1:2的100%乙醇提取物(alcohol extract of genseng and clove,AEGC),AEGC在0~30μg/mL浓度内对3T3-L1前脂肪细胞的增殖、分化无细胞毒性,能抑制脂肪细胞分化过程中甘油三酯的形成和积累;RT-PCR结果显示,较空白组AEGC干预后,MA内ACC、ACLY、FAS和ME的m RNA水平显著下调(P<0.05),且ME、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G-6-P)、ACLY和FAS的酶活力受到显著抑制(P<0.05)。筛选所得的AEGC能抑制高山被孢霉和3T3-L1前脂肪细胞的脂质合成。展开更多
文摘探究人参-丁香醇提物抑制脂质合成并对其机制进行初步研究。通过建立丰产脂肪酸的高山被孢霉(Mortierella alpina,MA)脂质筛选模型,利用2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)筛选出脂质合成抑制最优的人参丁香药对用药比例和提取溶媒,测定MA内甘油三酯含量、电镜观察其形态并进行脂肪酸气质(GC-MS)分析,通过RT-PCR法测定乙酰辅酶A羧化酶(ACC)、ATP-柠檬酸裂解酶(ACLY)、脂肪酸合酶(FAS)和苹果酸酶(ME)基因的mRNA表达并对相关酶活力进行检测,对3T3-L1前脂肪细胞采用MTT法测定其增殖活力同时采用油红O染色法测定细胞分化中脂质积累的能力并加以论证。结果显示,人参丁香药对抑制脂质合成的最优比例和提取溶媒是人参-丁香质量比为1:2的100%乙醇提取物(alcohol extract of genseng and clove,AEGC),AEGC在0~30μg/mL浓度内对3T3-L1前脂肪细胞的增殖、分化无细胞毒性,能抑制脂肪细胞分化过程中甘油三酯的形成和积累;RT-PCR结果显示,较空白组AEGC干预后,MA内ACC、ACLY、FAS和ME的m RNA水平显著下调(P<0.05),且ME、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G-6-P)、ACLY和FAS的酶活力受到显著抑制(P<0.05)。筛选所得的AEGC能抑制高山被孢霉和3T3-L1前脂肪细胞的脂质合成。