液相色谱-串联质谱法同时测定人全血中4种免疫抑制剂药物浓度

建立了液相色谱-串联质谱同时测定人全血中他克莫司、雷帕霉素、环孢素A与霉酚酸4种免疫抑制剂药物浓度的检测方法。全血样品经蛋白沉淀后,通过Waters XBridge C18色谱柱(100 mm×2.1 mm,5μm),以甲醇-水(含0.1%甲酸和5 mmol/L乙酸铵)为流动相梯度洗脱,采用电喷雾电离源,正离子化多反应监测模式定量检测。结果表明,4种免疫抑制剂在各自检测浓度范围内线性良好,相关系数均大于0.99。基质效应相对标准偏差(RSD)在9.4%以内。加标回收率在94.2%~104.3%之间,日内日间精密度RSD<5.49%。参加英国Laboratory of the Government Chemist(LGC)室间质评的偏差均在12.50%以内,正确度良好。该方法操作简单、准确度好、灵敏度高,适用于血液中免疫抑制剂治疗药物浓度监测。

正常饮食对脂溶性维生素检测结果的影响

目的探讨正常饮食对脂溶性维生素检测结果的影响。方法招募健康志愿者30例,分别采集其空腹和进餐后2 h的静脉血,检测脂溶性维生素[维生素A、维生素E、维生素D_(2)、维生素D_(3)、维生素K_(1)、维生素K_(2)][甲萘醌-4(MK-4)]、维生素K_(2)[甲萘醌-7(MK-7)]水平。采用自身对照方法,比较空腹和进餐后2 h各脂溶性维生素水平。结果与空腹水平比较,餐后2 h维生素A、维生素E、维生素D_(2)、维生素D_(3)水平差异无统计学意义(P>0.05);维生素K_(1)、维生素K2(MK-7)和维生素K_(2)(MK-4)水平升高(P<0.05)。结论正常饮食对维生素A、维生素E、维生素D_(2)、维生素D_(3)检测结果无影响,但可使维生素K_(1)、维生素K_(2)(MK-4)、维生素K_(2)(MK-7)检测结果升高。

瘤果黑种草子的化学成分

目的研究中药瘤果黑种草子的化学成分。方法运用多种色谱方法分离化学成分;依据这些化学成分的理化性质和波谱(NMR、EI-MS)数据分析鉴定化合物的结构。结果从瘤果黑种草子中初步分离得到5个化合物,分别鉴定为胡萝卜苷(1)、常春藤皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖苷(2)、常春藤皂苷元-3-O-β-D-吡喃木糖基-(1→3)-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖苷(3)、3-O-β-D-吡喃木糖基-(1→3)-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂苷元-28-O-β-D-吡喃葡萄糖酯苷(4)、山奈酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→2)-β-D-吡喃半乳糖基-(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖苷(5)。结论化合物4为首次从黑种草属植物中分离得到,化合物5为首次从该种植物中分离得到。

三种类型血液样本维生素AE检测结果一致性评价

目的探讨静脉血清、静脉血浆、指尖血三种不同类型基质中维生素AE测定结果的一致性。方法选取43名健康志愿者分别采集静脉血清、静脉血浆和指尖血,采用高效液相色谱法对三种基质中的维生素AE水平进行测定,采用单因素方差分析评价三种基质中检测结果的差异性,Passing-Bablok回归分析法和Bland-Altman图法评价三种基质检测结果的一致性。结果单因素方差分析结果表明三种基质中维生素AE检测结果差异无统计学意义(P>0.05)。Passing-Bablok回归分析结果显示,三种基质中维生素AE检测结果回归方程的斜率的95%置信区间均包含1,截距的95%置信区间均包含0,且P>0.05;Bland-Altman图分析结果显示超过93%的点的差值位于x±1.96s之间,均在国家卫生健康委临床检验中心允许误差范围内,表明三种基质中维生素AE检测结果具有一致性。结论医学实验室检测维生素AE时,样本类型可以选择静脉血清、静脉血浆和指尖血中的任一样本类型,均能获得准确可靠的检测结果。

儿童维生素A缺乏与血红蛋白水平及呼吸道感染相关性研究

目的了解健康儿童和伴有呼吸道感染症状儿童维生素A营养状况,及其与血红蛋白水平的相关性。方法纳入2014年12月至2015年8月期间在北京居住半年以上的健康体检儿童,检测血清视黄醇、外周血血红蛋白水平,分析维生素A营养状况与年龄、呼吸道感染及贫血的关系。结果共纳入1 742例儿童,男1 056例、女686例,中位年龄3.1岁(6个月~17岁);就诊时有呼吸道感染症状儿童202例,无呼吸道感染症状儿童1 540例。受检儿童的血清视黄醇中位水平0.29 mg/L(0.25~0.33 mg/L),有呼吸道感染症状儿童低于无呼吸道症状儿童,差异有统计学意义(P<0.001)。亚临床维生素A缺乏、可疑亚临床缺乏比例分别为5.8%和47.9%;<9岁儿童的亚临床及可疑亚临床缺乏比率均>50%,不同年龄组的亚临床和可疑亚临床缺乏比例的差异有统计学意义(P<0.001)。亚临床维生素A缺乏、可疑亚临床缺乏及正常组儿童的贫血发生率分别为3.9%、8.7%、10.8%,差异有统计学意义(P<0.01)。血清视黄醇、血红蛋白浓度与年龄均呈正相关(r=0.179、0.571,P均<0.001);血清视黄醇与血红蛋白浓度呈正相关(r=0.244,P<0.001)。结论呼吸道感染儿童血清视黄醇水平低于健康儿童,维生素A缺乏与贫血发生相关。

直接注入式串联质谱法测定氨基酸含量

目的利用直接注入式串联质谱(direct-infusion tandem mass spectrometry,DI-MS/MS)建立一种耗时短、准确度高的同时测定13种氨基酸(amino acids)含量的方法。方法用内标工作液对干血滤纸片中的氨基酸进行提取,取上清液氮气吹干后加入自制的衍生试剂盐酸正丁醇,水浴加热65℃反应20 min,将反应物吹干后用水-乙腈-甲酸(体积比为100∶100∶0.05)的混合溶液复溶,取上清液直接使用串联质谱进行定量分析。使用电喷雾离子源(electrospray ion source,ESI)正离子模式,采用选择性反应监测(selected reaction monitoring,SRM)模式。采用内标法,用峰高加校正因子定量。结果方法的低浓度回收率为85.6%～114.4%、中浓度回收率为92.4%～114.4%、高浓度回收率为88.9%～113.6%,日内和日间变异系数(RSD)分别为2.3%～9.6%、2.5%～10.3%。不同浓度的氨基酸实际浓度与真实浓度之间的相关系数为0.996 1～0.999 7。结论所建立的直接注入式串联质谱法可以同时对干血滤纸片中多种氨基酸进行定量分析。可作为一种与氨基酸代谢相关疾病的检测手段。

串联质谱法测定血清中20种游离氨基酸含量

目的建立串联质谱法(LC-MS/MS)测定血清中20种游离氨基酸含量,为临床血清氨基酸检测提供可靠方法。方法血清样本未经衍生化处理,采用LC-MS/MS法,于电喷雾源(ESI)正离子模式下使用选择反应性离子扫描(SRM)进行定量。结果 20种氨基酸线性相关系数为0.9957～0.9999,日内、日间变异系数分别为0.5%～9.0%和0.6%～12.3%,加样回收率为87.6%～115.5%。样本在常温放置24h,8次冻融循环及-20℃冻存20d等条件下稳定性良好。结论该方法简便、稳定、定量准确,适用于血清氨基酸的临床检测,为氨基酸代谢疾病的临床诊断提供了重要的生化依据。

基因多态性在早发冠心病发病风险中的研究进展

冠状动脉(冠脉)疾病是一类严重威胁人类生命健康的疾病,其中早发性冠心病(PCAD)多伴有家族史,遗传因素的影响预计比环境因素更为重要。本文基于国内外的研究进展,综述了不同类型的基因多态性与PCAD风险之间的关系,以及不同种族的特异性基因组及其共同的易感基因位点。为开展对易感人群的筛查、预防及治疗提供新靶点。

第三方医学检验行业发展道路

医学检验是运用现代物理化学方法、手段进行医学诊断的一门学科，主要研究如何通过实验室技术、医疗仪器设备为临床诊断、治疗提供依据。医学独立实验室（independent clinical laboratory，ICL）又称第三方医学实验室，是指在卫生行政部门的许可下，具有独立法人资格，独立于医院之外从事临床检验或病理诊断和服务并能独立承担责任的医疗机构。

福建晚侏罗世河田岩体特征及成因分析

福建南武夷晚古生代拗陷区晚侏罗世河田岩体受北东向基底断层控制,以岩基或岩株形式侵入早侏罗世地层中,为此,重点研究了岩石学、岩石地球化学特征、形成时代、Sr-Nd同位素。结果表明,河田岩体属同熔型S型花岗岩,形成于燕山中期同碰撞挤压的构造环境。

北京市孕妇常规保健下血清维生素A、E水平现状

目的分析妊娠早、中、晚期血清维生素A、E水平,评价妊娠期维生素的营养状况,指导孕妇妊娠期合理补充维生素。方法收集2013年1月-2014年6月北京地区孕妇妊娠早、中、晚期血清样本共28 023份,采用高效液相色谱法定量测定血清维生素A、E的浓度,并与正常人群血清维生素A、E的浓度作比较。结果孕妇妊娠早、中、晚期血清维生素A检测值分别为(0.33±0.08)mg/L、(0.37±0.09)mg/L、(0.33±0.15)mg/L,总体异常率25.31%,以缺乏为主要表现(24.98%),缺乏率在妊娠早期(38.23%)大于妊娠晚期(35.1%);孕妇妊娠早、中、晚期血清维生素E检测值分别为(9.10±2.47)mg/L、(14.24±3.66)mg/L、(15.80±5.01)mg/L,总体异常率5.60%,以过量为主要表现(5.37%),妊娠早期异常率最低(1.26%),缺乏率(0.76%)与过量率(0.5%)相当,随着孕周增加,维生素E异常率也逐渐增加,妊娠晚期达到最高(15.32%),均为维生素E过量。结论妊娠各期血清维生素A、E水平不同,维生素A以缺乏为主,维生素E以过量为主,因此重视孕期维生素A、E水平监测,合理正确补充,对保障母婴安全有重要意义。

2016年我国北方地区孕妇维生素A、E营养状况调查

目的了解我国北方地区六省(直辖市)2016年孕妇维生素A、E水平,评价孕妇的营养状况,为指导孕妇合理补充及膳食提供依据。方法分别选取2016年1~12月河北省、河南省、黑龙江省、山西省、陕西省、天津市等六省(直辖市)的1家市级以上妇产专科医院进行孕妇维生素A、E营养状况调查。采用高效液相色谱法检测21 932例血清维生素A水平和血清维生素E(20 243例)水平。结果①2016年,我国北方地区孕妇维生素A平均水平为(0.43±0.10)mg/L,以缺乏和边缘缺乏为主要表现,检出率为7.3%。天津市缺乏及边缘缺乏比例最高(17.3%),其次是黑龙江省(12.9%)、河北省(6.1%)、河南省(4.5%)、山西省(4.1%)。陕西省检出率最低,为3.1%。对于≥35岁高龄孕妇,维生素A缺乏及边缘缺乏检出率(6.4%)低于<35岁孕妇人群(7.4%)。②我国北方地区孕妇维生素E平均水平为(12.90±4.18)mg/L,以过量为主要表现,检出率为6.2%。其中,天津市过量检出率最高(25.2%),其次是河南省(5.3%)、陕西省(4.3%)、山西省(1.8%)和黑龙江省(1.6%),河北省检出率最低(0.4%)。≥35岁高龄孕妇维生素E过量检出率(10.3%)高于<35岁孕妇人群(5.7%)。缺乏情况罕见。不同地区及不同年龄段孕妇维生素A和维生素E检出率比较差异有统计学意义(P <0.05)。结论 2016年,我国北方地区孕妇维生素A和维生素E的水平在北方各省市间以及不同年龄段间存在明显差异,维生素A缺乏及维生素E过量在孕妇中普遍存在。

血清维生素D检测方法研究进展

维生素D是一种重要的脂溶性维生素,为固醇类衍生物,主要存在形式为维生素D2(麦角钙化醇)和维生素D3(胆钙化醇)。维生素D的主要食物来源有动物肝脏、鱼肝油、蛋黄等,除食物性来源外,人体皮下储存的7-脱氢胆固醇,受紫外线的照射后,可转变为维生素D3[1]。

血液中氨基酸检测方法研究进展

氨基酸最重要的功能就是合成蛋白质、多肽等。人类日常摄入的蛋白质经过消化系统吸收后以氨基酸的形式经过血液而运送到全身［1］。假如人体内因为缺乏相关的蛋白因子或是一些具有与氨基酸代谢有关的器官出现了问题，就会使血液中的氨基酸出现代谢紊乱。因此，对血液中的氨基酸含量等进行检测具有很重要的意义，可以作为临床诊断相关病症的诊断依据。目前关于氨基酸检测方面的研究比较热门，化学滴定法、比色法、气相色谱法、毛细管电泳法等都已经被应用到了该领域的临床研究中［2］。本文主要对液相色谱法、氨基酸分析仪法的研究进展情况进行综述，报道如下。

高效液相色谱荧光及二极管阵列检测器检测血清中维生素A、E的方法学比较

目的研究高效液相色谱荧光检测器(FLD)和二极管阵列检测器(DAD)检测人血清中维生素A和维生素E方法学的差异性。方法建立了FLD和DAD检测人血清中维生素A和维生素E水平的方法,从线性关系、精密度、准确度等方面研究二者的差异,并使用建立的方法对16份临床标本进行检测,考察方法的一致性和相关性。结果FLD检测法的线性方程线性相关系数为0.9997~0.9998,精密度的相对标准偏差为0.18%~1.19%,回收率为89.9%~104.7%;DAD检测法的线性方程线性相关系数为0.9992~0.9998,精密度的相对标准偏差为0.49%~0.91%,回收率为91.7%~103.2%;16份临床标本的检测结果显示:VA、VE水平差值的95%在x±1.96 s的一致性界限内,P=0.49>0.05,表明二者差异无统计学意义。结论FLD和DAD两种检测器检测人血清中维生素A和维生素E,均满足方法学要求,二者对临床标本的检测结果无差异。

叶酸及其代谢物不同检测方法结果比较分析

目的比较色质联用法和免疫法测定叶酸及其代谢物结果的差异。方法我室采用色质联用法和化学发光免疫分析法,对低(<9ng/mL)、中(9~15ng/mL)、高(>15ng/mL)不同水平血清样本40例进行了测定,其中低水平样本25例,中水平样本10例,高水平样本5例,进一步比较了不同检测方法结果关系及差异情况。结果色质联用法和化学发光免疫分析法在测定叶酸及其代谢物时存在差异,在低中高不同水平时,两者的平均偏倚分别为–176.15%、4.91%、15.93%。在低水平色质法测定结果均低于化学发光免疫分析法;在中水平两种测定方法结果偏差不大;而在高水平色质法测定结果均高于化学发光免疫分析法。结论色质联用法与免疫类方法测定叶酸及其代谢物结果存在偏差,且偏差与水平相关。

电感耦合等离子体质谱法与原子吸收光谱法在测定微量元素中的比较分析

目的采用电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)和原子吸收光谱法(AAS),分别检测临床患者全血样本中6种微量元素(钙、镁、铁、锌、铜、铅),并从方法学、检测结果两个方面进行分析和比较,便于医学实验室能够根据自身实际需求选择合适的检测方法。方法分别建立了ICP-MS和AAS检测全血中6种微量元素的前处理方法及仪器分析方法,并从准确度、精密度、灵敏度、线性范围进行方法学的比较。并征集不同性别、不同年龄段的90名志愿者,分别使用两种方法对90例实际临床样本进行检测,使用专业的数据统计软件SPSS 20.0对测定结果进行处理。结果ICP-MS和AAS两种方法的准确度、精密度均良好,灵敏度和线性范围也均能满足临床检测要求,90例样本的比对结果显示,两种方法的检测结果呈线性相关(R^(2)>0.97),且差异无统计学意义(P>0.05)。结论两种方法均能满足临床样本的检测要求,但二者各有优劣势,医学实验室可以根据自身实际需求选择合适的检测方法。

同型半胱氨酸不同检测方法结果比较分析

目的比较同型半胱氨酸临床不同测定方法(液质联用法及免疫类方法)的差异。方法本文选取2014年至2016年我室参加国内和国际权威机构:卫生部临检中心和美国病理学家协会室间质评活动的反馈结果数据,通过分析同型半胱氨酸反馈结果数据以及我室采用液质联用法和免疫类方法同时测定同型半胱氨酸的数据,比较了液质联用法及免疫类方法的差异。结果我室的检测方法为液质联用法,自2014年参与美国美国病理学家协会室间质评以来结果均在可接受范围内,与靶值偏倚<25%,在此机构的室间质评活动中所属组为色谱法组别;而自2014年起参与国内卫生部临检中心室间质评以来除低值(<20.0μmol/L)在可接受范围内,其他浓度值的测定结果均高于临检中心室间质评可接受范围,且偏倚程度与浓度的增加呈现正相关。而我室在临检中心室间质评中所属组为缺省组组别或所有组组别,参与临检中心室间质评的其他实验室大部分以免疫类方法检测。除此之外,我室在采用液质联用法和免疫类方法同时测定同型半胱氨酸时结果存在差异。结论液质联用法与免疫类方法测定同型半胱氨酸结果存在偏差,且偏差与浓度呈现正相关。血液样品存在着内源性成分复杂,基质干扰严重等问题,免疫类方法易受这些问题的影响,而液质联用法具有专属性强、准确度高的特点,采用标准曲线定量可以得到可靠的结果。

胶滴肿瘤药敏检测技术评价卡培他滨对胃癌体外药敏实验的条件探索

目的采用胶滴肿瘤药敏检测技术(CD-DST)研究在胃癌术后辅助化疗中卡培他滨(CAP)药敏检测的实验条件。方法由于CAP在体外无法由肿瘤细胞直接代谢,本研究采用其代谢产物5'-脱氧-5-氟尿苷(5'-DFUR)评价CAP的药敏检测条件,对5'-DFUR的CD-DST实验条件进行探索。将31例实验组新鲜胃癌组织标本进行CD-DST检测,以未用药物处理组作为对照,分别以1μg/ml奥沙利铂(L-OHP)、0.03μg/ml伊立替康(CPT-11)和5'-DFUR(浓度为3、5、10μg/ml)进行处理,评价其体外有效率(IVS)与临床有效率的一致性,另将34例验证组新鲜胃癌组织标本进行验证。结果5μg/ml的5'-DFUR处理组的高敏感IVS为31%,与研究报道的CAP临床有效率约为30%一致。采用5μg/ml的5'-DFUR对另外34例胃癌标本进行验证,验证组中5'-DFUR(5μg/ml)处理组高敏感IVS为30%,与实验组IVS结果一致。结论在胃癌辅助化疗中,5μg/ml的5'-DFUR为CD-DST法评价CAP药物敏感性的实验条件,其检测结果IVS与临床有效率一致,为临床胃癌患者术后采用CDDST法进行CAP体外药敏实验提供指导。

三种卡马西平血药浓度测定方法比较

探讨3种卡马西平血药浓度测定方法的可行性与测定结果的一致性。分别使用普通高效液相色谱法(HPLC)、高效液相色谱在线固相萃取法(HPLC-on line SPE)、高效液相色谱串联质谱法(HPLC-MS/MS)3种分析方法对46例临床患者血清样本进行检测,并使用SPSS 16.0对检测结果进行统计学分析。3种测定方法,卡马西平在0.5~32.0 mg/L范围内线性关系均良好(R2>0.99),平均回收率均在91.6%~102.2%之间,精密度均小于5%,显著性P=0.446。3种方法均满足卡马西平血药浓度的测定,且3种测定方法的检测结果无显著性差异。