黄酒多酚减轻阿霉素心脏毒性的初步研究

目的:探讨黄酒多酚化合物(YWPC)减轻阿霉素(即多柔比星,DOX)所致心脏毒性的作用及其机制。方法:将40只雄性SD大鼠随机分成4组:对照组、YWPC组、DOX组和DOX+YWPC组。干预4周后,超声心动图检测大鼠心功能;病理学染色观察心脏组织病理学改变;比色法、DHE染色、TUNEL染色和Western blot法检测心肌组织中心肌酶、氧化应激和凋亡水平的改变。结果:与对照组相比,DOX组左室射血分数(LVEF)和左室短轴缩短分数(LVFS)明显下降,而收缩期左室内径(LVIDs)和舒张期左室内径(LVIDd)明显增加;而与DOX组相比,DOX+YWPC组LVEF和LVFS增加,LVIDs和LVIDd下降(P <0. 05)。DOX组血清心肌损伤指标乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、天冬氨酸转氨酶(AST)和心肌肌钙蛋白I(c Tn I)较对照组明显增加;而DOX+YWPC组上述指标较DOX组下降(P <0. 05)。与对照组比较,YWPC组无明显病理学改变,DOX组出现心肌纤维排列紊乱、细胞核溶解和肌纤维解体,而DOX+YWPC组上述情况明显改善。与对照组比较,DOX组活性氧簇(ROS)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽(GSH)水平下降,丙二醛(MDA)水平增加;与DOX组相比,DOX+YWPC组上述指标均得到逆转(P <0. 05)。同时,DOX组较对照组心肌细胞凋亡水平、Bax/Bcl-2比和cleaved caspase-3水平增加,而DOX+YWPC组心肌细胞凋亡明显受到抑制(P <0. 05)。结论:黄酒多酚可以通过减少氧化应激和抑制心肌细胞凋亡拮抗阿霉素所致的心脏毒性。

医联体架构下心脏康复模式的构建

心脏康复使心血管病患者受益,但我国的心脏康复工作仍处于初级阶段。本文探讨在紧密型医联体背景下,对心脏康复模式的应用进行探索、分析、构建,对于推进心脏康复的建设和发展具有重要意义。

Herpud1蛋白在同型半胱氨酸诱导的血管平滑肌细胞表型转化中的作用

目的探讨同型半胱氨酸诱导内质网应激诱导的泛素样结构域1蛋白(Herpud1)在同型半胱氨酸(Hcy)诱导的大鼠主动脉平滑肌细胞(VSMC)表型转化中的作用.方法取雄性SpragueDawley大鼠胸主动脉,改良组织贴块法分离VSMC并进行培养,取第4~7代的VSMC用于实验.为明确Hcy能否诱导VSMC发生表型转化,将VSMC分为4组,即对照组以及Hcy100、500和1000μmol/L组.为明确内质网应激(ERS)是否参与VSMC表型转化,将VSMC分为3组,即对照组、Hcy500μmol/L组(Hcy组)和Hcy+4-苯基丁酸钠盐(4-PBA)2mg/ml组(Hcy+4-PBA组).为进一步验证Herpud1在VSMC表型转化中的作用,将VSMC分为对照组、Hcy组、Hcy+siRNA阴性对照(scrambled)组和Hcy+Herpud1siRNA组.免疫荧光法观察VSMC形态学变化和Herpud1蛋白改变.Westernblot法检测VSMC表型转化相关标志蛋白骨桥蛋白、钙调节蛋白(Calponin)、平滑肌肌球蛋白重链(SM-MHC),ERS相关蛋白C/EBP同源蛋白(CHOP)、丝氨酸/苏氨酸-蛋白激酶/内切核糖核酸酶肌醇需要酶1(IRE-1)、葡萄糖调节蛋白质78(GRP78)以及Herpud1蛋白的表达水平.实时荧光定量PCR法检测VSMCHerpud1mRNA的表达水平.结果(1)不同浓度Hcy对VSMC表型转化的影响:免疫荧光结果示,对照组VSMC成长梭形,肌丝明显,成束状分布,极性明显;干预24h后,Hcy100μmol/L组可见VSMC不同程度地变成椭圆形,肌丝分布紊乱,但仍具有一定极性;干预24h后,Hcy500μmol/L组VSMC肌丝不明显、极性缺失,而Hcy1000μmol/L组VSMC改变则与Hcy100μmol/L组类似.Westernblot结果显示,Hcy100μmol/L组VSMC骨桥蛋白表达水平高于对照组,SM-MHC表达水平则低于对照组(P均<0.05);Hcy500μmol/L组VSMC骨桥蛋白表达水平高于Hcy100μmol/L组,Calponin和SM-MHC表达水平则低于Hcy100μmol/L组(P均<0.05),而Hcy1000μmol/L组以上改变趋势不如500μmol/L明显.(2)ERS在VSMC表型转化中的作用:干预24h后,Hcy100、500和1000μmol/L组VSMCCHOP、IRE-1和GRP78蛋白表达水平均高于对照组(P均<0.05).Hcy+4-PBA组VSMCCHOP、IRE-1和GRP78蛋白表达水平低于Hcy组(P均<0.05).而且,Hcy+4-PBA组VSMC骨桥蛋白表达水平亦低于Hcy组(P<0.05),Calponin和SM-MHC蛋白的表达水平则高于Hcy组(P均<0.05).(3)Herpud1在Hcy诱导的VSMC表型转化中的表达:干预24h后,Hcy100、500和1000μmol/L组VSMCHerpud1蛋白表达水平均高于对照组(P均<0.05),且具有浓度依赖性.干预12h后,Hcy(500μmol/L)组VSMCHerpud1升高最为明显,干预48h后开始下降.Hcy组VSMCHerpud1mRNA表达水平在0.5、1、2、6、12、24h均高于对照组(P均<0.05),且具有一定的时间依赖性,以12h最为明显;Hcy+4-PBA组VSMCHerpud1mRNA表达水平在上述各时点均低于Hcy组.免疫荧光染色显示,对照组、Hcy组和Hcy+4-PBA组Herpud1均主要分布在细胞浆中的内质网,细胞核也有少量分布.Hcy组VSMCHerpud1蛋白表达水平高于对照组(P<0.05),Hcy+4-PBA组则低于Hcy组(P<0.01).(4)抑制Herpud1对Hcy诱导的VSMC表型转化的影响:Hcy+Herpud1siRNA组VSMC骨桥蛋白表达水平低于Hcy+siRNA阴性对照组(P<0.05),Calponin和SM-MHC蛋白表达水平则均高于Hcy+siRNA阴性对照组(P均<0.05).结论Herpud1在Hcy诱导的VSMC表型转化具有重要作用.