健脾化瘀法防治慢性萎缩性胃炎“炎-癌”转化的系统评价及网络药理学研究

目的系统评价健脾化瘀法治疗慢性萎缩性胃炎(CAG)、胃癌前病变(GPL)的临床有效性及安全性;同时运用网络药理学预测国医大师周岱翰教授健脾化瘀法验方理中消痞方防治胃“炎-癌”转化的效应物质基础和分子机制。方法检索中国知网(CNKI)、万方数据库(Wangfang)、维普中文期刊(VIP)、中国生物医学文献数据库(SinoMed)、PubMed、Embase、Cochrane Library、Web of Science等数据库,筛选各数据库建库至2023年3月关于健脾化瘀法治疗CAG、GPL的随机对照临床试验,采用RevMan 5.4进行系统评价,利用Stata 17.0软件进行Egger检测评估发表偏倚;运用TCMSP、TCMIP及GeneCards等数据库挖掘理中消痞方的主要活性成分,筛选CAG、GPL的疾病靶点;应用Cytoscape软件构建药物-活性成分-靶点互作网络;String平台构建共同靶点蛋白互作网络(PPI);应用Metascape数据库对共同靶点进行基因本体(GO)功能分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析;运用Autoduck Vina软件对理中消痞方的活性成分与核心靶点进行验证。结果共纳入13篇文献,涉及1510例患者。Meta分析结果提示,与西医常规治疗相比,健脾化瘀法可显著提高CAG、GPL患者临床疗效[RR=1.22,95%CI(1.16,1.29),P<0.00001]、胃镜疗效[RR=1.49,95%CI(1.10,2.01),P=0.010]及病理疗效[RR=1.33,95%CI(1.06,1.66),P=0.01],改善CAG、GPL患者胃黏膜萎缩[RR=1.42,95%CI(1.31,1.54),P<0.00001]、肠上皮化生[RR=1.84,95%CI(1.42,2.38),P<0.00001]、异型增生[RR=2.87,95%CI(1.31,6.24),P=0.008],且安全性较好。纳入文献不存在发表偏倚;网络药理学结果提示,理中消痞方10味中药包含活性成分189个,治疗CAG、GPL的潜在作用靶点128个,涉及的核心成分有槲皮素、山奈酚、β-谷甾醇和豆甾醇等,核心作用靶点为JUN、TP53、HSP90AA1、MAPK3、MAPK1、MYC、MAPK13;GO功能富集共筛出生物学过程1143条、细胞组成39条、分子功能105条,交集靶点主要涉及受体配体活性、细胞迁移运动和细胞内蛋白质合成等。KEGG富集筛得MAPK信号通路、HIF-1信号通路和TNF信号通路等信号通路63条;分子对接表明核心成分与核心靶点结合活性较好。结论健脾化瘀法治疗CAG及GPL的临床疗效确切,安全性较好。健脾化瘀法验方理中消痞方治疗CAG、GPL,阻断胃“炎-癌”转化的机制可能与其调控炎症、缺氧耐受、免疫和细胞凋亡有关。

健脾化瘀解毒方调控PKA/NLRP3通路治疗胃癌前病变的机制

目的:探讨健脾化瘀解毒方(JPHYJD)调控蛋白激酶A(PKA)/核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)通路治疗胃癌前病变(GPL)的作用机制。方法:动物实验一:将60只小鼠随机分为空白组,模型组,JPHYJD高、低剂量组,维酶素组,分别进行处理后,HE染色观察胃黏膜病理改变,免疫荧光染色观察NLRP3、GSDMD表达。动物实验二:将60只小鼠随机分为空白组、模型组、H89组、模型+H89组、JPHYJD组、模型+H89+JPHYJD组,Western Blot检测GSDMD-N、Caspase-1、IL-1β表达。细胞实验一:THP-1细胞分为空白组、模型组和JPHYJD组,使用LPS+ATP造模后,JPHYJD组予含药血清处理。细胞实验二:分组同动物实验二,分别予以H89及JPHYJD含药血清处理。检测焦亡相关分子表达和PI染色。结果:动物实验中,与空白组比较,模型组出现GPL病变,NLRP3、GSDMD表达显著升高(P<0.01),JPHYJD可改善胃黏膜病变,显著抑制NLRP3、GSDMD表达(P<0.01,P<0.05);与空白组比较,模型组GSDMD-N、Caspase-1、IL-1β表达显著升高(P<0.01),JPHYJD可抑制其表达(P<0.01),模型+H89+JPHYJD组表达水平显著高于JPHYJD组(P<0.05)。细胞实验中,与空白组比较,模型组NLRP3、GSDMD-N、Caspase-1、IL-1β蛋白和mRNA表达显著升高,焦亡水平显著升高(P<0.01,P<0.05),JPHYJD可显著抑制上述分子表达,减少细胞焦亡(P<0.01);与空白组比较,模型组PKA降低,NLRP3、GSDMD-N、IL-1β升高,焦亡水平升高(P<0.01),JPHYJD可上调PKA,抑制NLRP3、GSDMD-N、IL-1β,减少细胞焦亡(P<0.01,P<0.05);与JPHYJD组比较,模型+H89+JPHYJD组PKA降低,NLRP3、GSDMD-N、IL-1β表达升高,焦亡水平升高(P<0.01)。结论:JPHYJD可通过调控PKA/NLRP3通路抑制细胞焦亡从而治疗GPL。

健脾化瘀解毒方抑制巨噬细胞焦亡治疗胃癌前病变的机制

目的:探讨健脾化瘀解毒方通过抑制巨噬细胞焦亡治疗胃癌前病变(GPL)的机制。方法:空白组小鼠常规饲养,造模组予以N-甲基-N-亚硝基脲(MNU)自由饮用隔日禁食法构建GPL模型,随机分为模型组,健脾化瘀解毒方高、低剂量组和维酶素组,每组12只,分别进行干预后,HE染色、AB-PAS染色观察小鼠胃黏膜组织病理学变化,Western Blot、RT-qPCR检测细胞焦亡相关指标、免疫荧光染色观察CDX2、Ki67、F4/80表达情况及F4/80与NLRP3共定位情况。体外构建J774A.1焦亡模型,予健脾化瘀解毒方含药血清干预,观察细胞焦亡相关分子表达情况。结果:与空白组比较,GPL小鼠胃黏膜NLRP3、Caspase-1、GSDMD-N、CDX2、Ki67、F4/80表达显著升高(P<0.01),NLRP3与F4/80存在共定位现象,集中分布于黏膜层。经健脾化瘀解毒方干预后,上述分子表达下降(P<0.01,P<0.05),且NLRP3与F4/80共定位现象散在分布。体外实验中,与空白组比较,模型组NLRP3、GSDMD-N、IL-1β、IL-18表达升高(P<0.01),PI染色阳性细胞比例增加(P<0.01),健脾化瘀解毒方可减少上述分子表达(P<0.01,P<0.05),减少PI染色阳性细胞比例(P<0.01,P<0.05)。结论:健脾化瘀解毒方可通过抑制巨噬细胞焦亡治疗GPL。

健脾化瘀解毒方治疗慢性萎缩性胃炎临床疗效回顾性研究

目的:回顾性总结分析健脾化瘀解毒方(Jianpi Huayu Jiedu Decoction,SWF)对慢性萎缩性胃炎(chronic atrophic gastritis,CAG)的临床疗效,对比观察SWF与胃复春治疗CAG的疗效异同。方法:回顾性收集2017年10月—2023年12月在广东省第二中医院消化科门诊及住院的350例CAG患者的电子病历,分别随机选择符合标准的160例为治疗组(SWF),70例为对照组(胃复春),分析两组患者的萎缩、肠化和异型增生三大病理(分级、评分、疗效)情况、中医证候评分与疗效、临床疗效。结果:治疗后,治疗组患者的三大病理分级构成比、病理积分、病理积分差值、证侯评分和证侯评分差值均较对照组有显著改善(均P<0.05),且两组治疗后三大病理分级构成比、病理积分、病理积分差值均较治疗前有显著改善(均P<0.01),治疗组患者病理疗效、证侯疗效和临床疗效均优于对照组(均P<0.01),治疗后三大病理分级两组间的差异萎缩>肠化>异型增生;治疗组的病理疗效、证侯疗效、临床疗效总有效率分别为90.0%、91.9%、83.8%,高于对照组的64.3%、77.1%和48.6%(均P<0.01)。结论:SWF可提高CAG患者的病理疗效、证候疗效和临床疗效,作用优于胃复春;治疗后SWF组CAG患者的病理疗效和证侯疗效总有效率相当。

中医药调控胃“炎癌转化”癌前微环境的思考与策略

恶性肿瘤是重大疑难疾病的典型代表,发病率逐年升高,半个世纪以来的科研攻关与临床实践表明,预防为主、防治结合是控制肿瘤发生与演进的根本出路。在我国,胃癌已严重威胁人民生命健康,目前亟需强化构建胃癌防治体系。“炎癌转化”是胃癌发生的经典途径,胃癌前病变(GPL)是胃“炎癌转化”中的关键环节,是二级预防的重点。在GPL阶段,大量肿瘤相关的免疫细胞因子直接破坏局部组织细胞,干扰免疫细胞功能,诱导GPL恶性进展以及组织癌变。中医药在阻断胃“炎癌转化”进程,改善胃癌前微环境,进而预防胃癌方面优势显著。针对胃“炎癌转化”癌前微环境的核心靶点与通路,胃“炎癌转化”进程的干预研究应成为胃癌防治的重要方向。

健脾化瘀解毒方抑制细胞焦亡防治胃癌前病变的机制

目的:探讨健脾化瘀解毒方通过抑制细胞焦亡防治胃癌前病变的作用机制。方法:构建胃癌前病变小鼠模型和细胞焦亡模型,将小鼠随机分为空白组,模型组,健脾化瘀解毒方高剂量组(15 g/kg)、低剂量组(7.5 g/kg)和维酶素组(0.2 g/kg),每组10只。分别进行干预后,观察小鼠胃黏膜组织病理变化及焦亡相关分子表达情况。细胞分为空白组、模型组和中药组,空白组与模型组给予空白血清,中药组给予含药血清干预后,除空白组外先后予以LPS、ATP处理。观察焦亡相关分子表达情况。结果:与空白组比较,模型组小鼠胃黏膜NLRP3、GSDMD、HMGB1表达显著升高(P<0.01),健脾化瘀解毒方高、低剂量组可显著降低其表达(P<0.01)。与空白组比较,模型组细胞焦亡关键分子NLRP3、GSDMD、Caspase-1 mRNA和蛋白表达水平升高(P<0.01,P<0.05),I L-1β、I L-18 m R NA表达水平显著升高(P<0.01),中药组可显著降低其表达水平(P<0.01,P<0.05)。结论:健脾化瘀解毒方可通过抑制细胞焦亡防治胃癌前病变。

基于中医动态思维探讨外泌体对胃癌前病变“虚瘀毒”病机的影响

脾虚为本、瘀毒致病是阐释胃癌前病变(GPL)发生、发展的重要理论,“虚瘀毒”病机的形成是GPL发生、癌性转化的关键。外泌体作为微环境重要组成部分,可促进病变细胞的恶性增殖、癌性改变。中医动态思维与外泌体合成、分泌有许多相同之处。基于中医动态思维,研究外泌体对GPL“虚瘀毒”病机的影响。笔者发现,“虚瘀毒”病机的形成过程符合现代医学对恶变细胞源外泌体的认识,外泌体是GPL胃黏膜局部微环境的重要生物学内容。通过深入探究外泌体与微环境成分的交互作用,希冀促进现代医学与中医学在GPL发展过程及防治策略上的融合和发展。

胃痞灵通过Nrf2/NQO1/HO-1信号通路调控胃“炎-癌”转化氧化应激机制

目的:探讨胃痞灵在体内抑制胃“炎-癌”转化氧化应激的作用机制。方法:50只Ba l b/c小鼠分为空白组(10只)及造模组[40只,其中模型组,胃痞灵高、低剂量组,阳性药组(维生素B_(12)),各10只],构建胃癌前病变小鼠模型,使用相应药物干预后,观察小鼠整体情况(尾巴、体型)、体质量增长情况、胃黏膜组织结构变化、检测核因子E2相关因子2(Nrf2)/醌氧化还原酶1(NQO1)/血红素加氧酶-1(HO-1)信号通路相关蛋白、基因表达及血清SOD值。结果:与空白组比较,模型组小鼠尾巴细短、色泽较瘀暗,体型明显减小,体质量增长缓慢,胃黏膜组织细胞异型增生明显,胃黏膜Nrf2/NQO1/HO-1信号通路被激活;与模型组比较,胃痞灵高、低剂量组小鼠整体情况改善,胃黏膜组织结构重塑、异型增生减少,且Nrf2/NQO1/HO-1信号通路受到一定程度抑制(表达增多),提示氧化应激被阻断。结论:MNNG自由饮用可诱导小鼠胃黏膜上皮发生氧化应激,胃痞灵可能在一定程度阻断氧化应激进而抑制胃“炎-癌”转化,从而发挥抗胃癌前病变的作用。

基于虚瘀毒理论探讨中医药调控胃炎-癌转化程序性细胞死亡的进展

胃炎-癌转化是是胃癌预防的关键阶段,中医药在辨治慢性胃炎、胃癌前病变、胃癌中的作用日渐凸显,已经成为改善临床症状、减少胃癌发生率、提高生活质量的重要治疗手段。程序性细胞死亡在维持机体生长发育、内环境稳态及组织器官正常生理功能中具有重要作用。死亡的细胞通过释放细胞因子介导细胞之间的串扰,进一步影响周围组织及细胞的生物学功能,影响局部微环境的形成、代谢、细胞癌变等生物学过程,调控细胞炎症级联反应及免疫应答,促进炎-癌转化。同时,细胞死亡方式之间相互转化、互相影响。因此,合理调控细胞死亡方式及细胞死亡过程中释放的细胞因子,进而调控胃黏膜局部癌前微环境,有望为阻断胃炎-癌转化进程提供新方向。中医“虚瘀毒”理论是对胃炎-癌转化过程中病机认识。程序性细胞死亡重塑局部癌前微环境的发病过程是“瘀毒”病理表征的客观体现,而脾虚又与胃腺体异型增生无制,癌性转化的疾病状态相吻合。脾气亏虚,升降功能失调,致使局部环境异化(免疫功能紊乱、癌前微环境形成)、邪气盘踞,瘀毒互结(细胞死亡方式改变),形成肿块,推动胃炎-癌转化进程。在“虚瘀毒”病机认识下,围绕中医整体观及胃炎-癌转化动态变化,运用中医药调节细胞死亡方式及相关信号,可调节炎性免疫反应,恢复机体相对平衡状态,进而抑制阻断胃炎-癌转化。基于以上认识,本研究围绕程序性细胞死亡与“虚瘀毒”理论,阐发学术微旨,以期为中医药干预胃炎-癌转化进程提供理论支持。