云南常见药用红景天的分子鉴定研究

目的:分析大花红景天Rhodiolacrenulata与长鞭红景天R.fastigiata、云南红景天R.yunnanensis等云南常见药用红景天及景天属的长丝景天Sedumbergeri的核糖体内转录间隔区(ITS)基因序列,为药用红景天分子鉴定提供依据。方法:用PCR产物直接测序法测定其核糖体内转录间隔区序列并作同源性分析。结果:构建了大花红景天11个地方居群、长鞭红景天9个地方居群、云南红景天1个地方居群及长丝景天1个地方居群的ITS基因片段序列数据库。序列比较的结果表明红景天属样品的ITS序列与长丝景天有显著差别;红景天属内各种序列差异虽小,却存在显著而稳定的差别,能准确鉴定出各种药用红景天植物。结论:根据rRNAITS区碱基序列差异,能准确鉴别大花红景天及其近源植物及药材。

对宽叶韭种内分化的随机扩增多态DNA的分析

应用随机扩增多态DNA (RAPD )技术 ,对葱属粗根组的宽叶韭 (AlliumhookeriThwaites)的 11个居群进行了种内分化研究 .结果显示 ,宽叶韭为一单系群 ,支持宽叶韭种的成立 .宽叶韭明显分为两大分支 ,这与宽叶韭的冬季倒苗和冬季不倒苗的两种生活习性完全一致 ,与宽叶韭的倍性和生境 (海拔 )

石斛属4种植物的AFLP分析

目的 研究石斛属植物 DNA指纹图谱 ,初步探讨 AFL P分子标记技术在石斛地道性鉴别上的应用。方法采用扩增片段长度多态性 (AFL P)技术对石斛属内石斛组 4个种和一个外类群种进行基因组 DNA多态性分析。结果 从 6 4对引物组合中选出 5对引物组合构建了 5个种的 DNA指纹图谱。通过聚类分析 ,石斛属 4种植物聚成一个大类 ,彼此关系得到了很好的分辨 ,并获得 bootstrap校验的有力支持。结论 AFL

红景天属植物DALP反应体系的建立

目的 利用直接扩增片段长度多态(DALP)这一新分子标记技术建立一套稳定的红景天属植物的DALP反应体系。方法 以红景天基因组DNA为模板,对DALP反应程序的一些重要参数进行摸索和优化试验。结果 建立了一套稳定性强、可靠性高的DALP应用反应体系;经过大量重复性实验,反应体系为20μL,Mg2+浓度为2.5 mmol/L,dNTPs浓度为1.25 mmol/L,模板DNA的量为60 ng,5 pmol/L选择性引物1μL,5 pmol/L反向引物3 μL,引物浓度比为1:3,Taq酶2 U。反应过程为:95℃预变性5 min、94℃变性30 s、50℃退火30 s、72℃延伸1 min;30个循环,再72℃延伸10 min,完成整个PCR反应。结论 该体系可有效地应用于红景天属药材的分类鉴定和地道性鉴定。