基于MITF与PI3K/AKT信号通路探讨多种单味中药对黄褐斑的作用机制

目的基于小眼畸形相关转录因子(MITF)与磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)信号通路探究多种单味中药对黄褐斑的作用机制。方法水煎法制备甘草、当归、赤芍药液。黑素细胞分为0、50、100、500、1000μg/mL及1000μg/mL+LY294002组,培养基中加入相应浓度的中药药液与25 nmol LY294002,MTT法检测不同剂量药物细胞毒性,测定酪氨酸酶活性与黑色素含量,Western blot检测MITF、PI3K/AKT信号通路相关分子水平。30只5周龄豚鼠按照随机数字表法分为对照组、模型组、甘草组、当归组、赤芍组,每组6只。中波紫外线照射建立黄褐斑模型,甘草组、当归组、赤芍组分别接受0.3 mg/kg甘草、当归、赤芍药液灌胃,对照组、模型组接受等体积生理盐水灌胃,持续4周。切取豚鼠背部造模处皮肤,测定黑色素含量,HE、Fontana-Masson染色观察皮肤组织形态,Western blot、免疫组化检测MITF、PI3K/AKT信号通路相关分子水平。结果与各0μg/mL组比较,甘草、当归、赤芍1000μg/mL组细胞活力、酪氨酸酶活性、黑色素含量均明显降低[甘草:(66.82±9.65)%比100.00%,(65.07±5.13)%比100.00%,(55.56±3.17)%比100.00%;当归:(56.62±15.99)%比100.00%,(52.69±5.52)%比100.00%,(54.69±4.05)%比100.00%;赤芍:(77.51±7.33)%比100.00%,(67.60±10.66)%比100.00%,(61.80±12.89)%比100.00%;P<0.05],因此后续各中药均选用1000μg/mL剂量进行实验。Western blot检测结果显示,与各0μg/mL组比较,甘草、当归、赤芍1000μg/mL组MITF表达水平降低[(0.28±0.04)比(0.99±0.08),(0.28±0.04)比(1.14±0.08),(0.43±0.09)比(0.84±0.13);P<0.05],p-PI3K、p-AKT、p-GSK3β表达水平升高[甘草:(1.08±0.07)比(0.61±0.07),(0.79±0.07)比(0.33±0.08),(0.78±0.06)比(0.41±0.06);当归:(1.38±0.07)比(1.01±0.07),(1.27±0.05)比(0.83±0.08),(0.78±0.06)比(0.39±0.06);赤芍:(0.83±0.12)比(0.41±0.07),(0.79±0.07)比(0.29±0.08),(0.82±0.04)比(0.31±0.06);P<0.05]。与对照组比较,模型组豚鼠背部皮肤黑色素含量升高[(3060.21±431.62)%比100.00%,P<0.05],皮肤组织结构紊乱,黑色素沉积明显增多;与模型组比较,甘草组、当归组、赤芍组豚鼠背部皮肤黑色素含量降低[(1820.34±385.08)%、(1181.43±347.24)%、(2229.87±554.25)%比(3060.21±431.62)%,P<0.05],皮肤组织结构较为完整,黑色素沉积减少。Western blot、免疫组化检测结果显示,与对照组比较,模型组MITF表达水平升高[(1.47±0.18)比(0.41±0.07),(2.71±0.17)比(1.00±0.05);P<0.05],p-PI3K、p-AKT、p-GSK3β表达水平降低[p-PI3K:(0.15±0.03)比(0.59±0.06),(0.64±0.06)比(1.00±0.05);p-AKT:(0.25±0.04)比(0.82±0.06),(0.73±0.09)比(1.00±0.05);p-GSK3β:(0.23±0.05)比(0.79±0.07),(0.56±0.09)比(1.00±0.05);P<0.05]。与模型组比较,甘草组、当归组、赤芍组MITF表达水平降低[(0.85±0.07)、(0.67±0.05)、(0.92±0.06)比(1.47±0.18),(1.79±0.15)、(1.51±0.13)、(1.94±0.12)比(2.71±0.17);P<0.05],p-PI3K、p-AKT、p-GSK3β表达水平升高[p-PI3K:(1.18±0.06)、(1.30±0.09)、(1.13±0.08)比(0.59±0.06),(1.57±0.12)、(1.70±0.12)、(1.50±0.08)比(1.00±0.05);p-AKT:(1.12±0.06)、(1.15±0.04)、(1.08±0.06)比(0.82±0.06),(1.68±0.14)、(1.79±0.10)、(1.49±0.12)比(1.00±0.05);p-GSK3β:(1.04±0.12)、(1.09±0.12)、(1.00±0.11)比(0.79±0.07),(1.81±0.14)、(1.96±0.09)、(1.67±0.15)比(1.00±0.05);P<0.05]。结论甘草、当归、赤芍可能通过激活PI3K/AKT信号通路,抑制MITF表达,减少皮肤黑色素沉积,进而缓解黄褐斑症状。

金银花汤联合苄星青霉素对梅毒患者的临床疗效及患者血清IL-8和TNF-α水平的影响

目的分析金银花汤联合苄星青霉素对梅毒患者的临床疗效及患者血清IL-8和TNF-α水平的影响。方法选择2018年1月至2019年6月浙江省中医院诊治的80例梅毒患者为研究对象。采用"电脑随机匹配"方式,将其随机分为观察组(n=40)和对照组(n=40)。观察组患者采用金银花汤+苄星青霉素治疗方法,对照组患者采用苄星青霉素治疗方法。比较两组患者的临床疗效、外周血T细胞亚群变化情况、血清IL-8和TNF-α水平。结果观察组患者临床总有效率(95.0%)显著高于对照组患者(75.0%);治疗后,观察组患者Th1、Th1/Th2水平明显高于对照组患者,Th2、血清IL-8、TNF-α水平明显低于对照组患者,其差异均具有统计学意义(均P<0.05)。结论金银花汤+苄星青霉素治疗方法可以有效改善梅毒患者的临床症状,减轻机体炎症反应,疗效确切,值得借鉴。

浮生若茶

轻轻呷呷嘴，浓雾驱散开。轻轻一嗅，一股沁人的芬芳弥漫开，顿觉一种恍如隔世的空灵孤傲。