利用Tet-On系统构建稳定表达Pdx1的小鼠ESC细胞株

目的:利用Tet-On系统构建稳定表达胰十二指肠同源异形框1(Pdx1)的小鼠胚胎干细胞(ESC)株,为进一步研究Pdx1+定型内胚层细胞向胰腺细胞分化奠定了基础。方法:采用Tet-On系统构建具有绿色荧光蛋白标记及嘌呤霉素抗性的Pdx1过表达慢病毒载体并感染胚胎干细胞。实验分为空白对照组(ESC组)、空载慢病毒对照组(PDX1−ESC组)和Pdx1慢病毒转染组(PDX1+ESC组)。流式细胞术检测多西环素(DOX)筛选后转染细胞的阳性率;检测Tet-On系统功能及Pdx1的mRNA和蛋白表达。流式细胞分选仪分选转染细胞,构建稳定表达Pdx1基因的ESC株及阴性对照ESC株。结果:(1)DOX筛选后PDX1−ESC组的转染细胞阳性率为90.72%,PDX1+ESC组的转染细胞阳性率为94.01%。用流式细胞分选仪分选后PDX1−ESC组的转染细胞阳性率为97.84%,PDX1+ESC组为98.13%。(2)加入DOX后,PDX1−ESC组和PDX1+ESC组可见绿色荧光。PDX1+ESC组Pdx1的mRNA和蛋白表达明显增高(P<0.05)。不加DOX,则3组细胞均未见绿色荧光,且Pdx1 mRNA和蛋白表达的差异无统计学显著性(P>0.05)。(3)细胞株冻存3个月后复苏培养仍然存活,并受DOX调控。结论:利用Tet-On系统成功构建可诱导表达Pdx1的小鼠ESC株,为研究Pdx1+定型内胚层细胞向胰腺细胞分化提供了有效的细胞模型。

胶囊内镜688例临床分析

目的:评估胶囊内镜在消化系统疾病中的诊断价值。方法:回顾性分析2008年3月至2019年1月中山大学孙逸仙纪念医院胶囊内镜检查的688例患者的临床资料。结果:688例患者中,检查成功率为99.71%;对上消化道、小肠及结肠疾病检出率分别为37.90%、58.89%及6.12%;对小肠疾病的检出率,男性、青年克罗恩病、消瘦、消化道出血明显高于其他患者(P<0.05),且明显优于CT、MR和(或)全消化道钡餐检查(P<0.05)。胶囊内镜的诊断与临床诊断符合率为47.23%,对消化道出血、不明原因消化道出血有明显优势(P<0.05)。结论:胶囊内镜是一种有效的消化系统疾病检查手段,尤其对小肠疾病及消瘦、消化道出血的患者有较高的诊断价值。

放射性肠炎的发病机制及治疗进展

放射性肠炎(Radiation enteritis,RE)是盆腔、腹腔及腹膜后肿瘤,尤其是妇科肿瘤及前列腺肿瘤放疗常见的放射性损伤,可累及小肠、结肠及直肠。RE主要表现为腹泻、鲜血便、瘘管形成、肠梗阻等症状,严重影响癌症患者的生活质量,并且随着肿瘤发病率的增长,其发病率亦有逐年增长的趋势。目前,对放射性肠炎的发病机制尚未完全明确,并且尚无统一有效的治疗方案。现对放射性肠炎的发病机理及治疗的研究进展作一综述。