间充质干细胞与缺血性心脏病

缺血性心脏病是现代社会危害人类健康的重大疾病。心肌细胞是一种传统意义上的终末分化细胞,缺血坏死或凋亡后再生困难,因此,目前临床所有的再血管化治疗难以恢复已死亡的细胞。干细胞疗法为缺血性心脏病提供了新的思路。其中骨髓来源的间充质干细胞（mesenchymal stem cells,MSCs）获取相对容易,免疫源性低,不涉及道德伦理学及法律问题,在体外培养容易大量扩增且仍然保留＂干细胞＂特性，而成为修复损伤心肌的最佳候选细胞。

人胃癌裸鼠原位移植瘤模型的建立及其活体荧光成像检测

目的:建立可动态实时监测的人胃癌裸鼠原位移植瘤模型。方法:将稳定表达荧光素酶的人胃癌细胞SGC-7901^(fLuc+)注入裸鼠后肢根部皮下形成皮下移植瘤。待皮下移植瘤瘤块长至直径0.5 cm时,剥取肿瘤组织,应用叠合法将瘤块原位移植于裸鼠胃小弯处,形成原位移植瘤模型。利用小动物活体荧光成像系统,每4日监测移植瘤的进展情况。荷瘤3周后,解剖荧光成像阳性小鼠,利用H-E染色、光镜下观察移植瘤的形态。结果:应用小动物活体荧光成像系统,可在荷瘤裸鼠胃部检测到逐渐增强的荧光信号。荷瘤裸鼠胃部存在肿瘤包块贴附于胃壁,包块直径为0.5~1.0 cm,包块周围与相邻组织器官边界清晰,未见粘连,检查腹腔未见转移,未见腹水形成。应用叠合法构建人胃癌裸鼠原位移植瘤模型成功率为95%(19/20)。对荷瘤胃组织H-E染色后,可见异常肿瘤细胞,肿瘤包膜完整,符合胃癌组织学特征。结论:成功建立了操作简便、成瘤率高的可动态监测的人胃癌裸鼠原位移植瘤模型,为研究胃癌发生机制、研发抗癌药物提供了理想的实验工具。

抗氧化因子Nrf2对H_(2)O_(2)诱导的人黑素细胞氧化应激水平和抗氧化基因表达的影响

干预人黑素细胞中激活转录因子NF-E2相关因子2(Nrf2)的表达,观察其对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导的氧化损伤作用,以及对Nrf2下游相关抗氧化基因表达影响。方法将siRNA或pCMV6-XL5-Nrf2瞬时转染入PIG1细胞,从而上调或者下调Nrf2的表达,检测黑素细胞内活性氧簇(ROS)和丙二醛(MDA)浓度、细胞增殖情况,以及下游抗氧化基因还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸[NAD(P)H]、醌氧化还原酶(NQO-1)、血红素氧化酶(HO-1)和谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)的表达。结果H_(2)O_(2)预处理可促进PIG1细胞中ROS和MDA的生成。上调Nrf2的表达可在人黑素细胞中抑制H_(2)O_(2)诱导的ROS和MDA产生,促进细胞增殖及Nrf2核转位,增强NQO-1、HO-1及γ-GCS的表达,而下调Nrf2表达可观察到相反的结果。结论在人黑素细胞中干预抗氧化因子Nrf2的表达可通过影响Nrf2相关抗氧化酶的活性来调控H_(2)O_(2)诱导的黑素氧化损伤及细胞增殖。

白癜风患者血清亚油酸的水平及其对CD8^+T细胞的作用

目的探究白癜风患者外周血中亚油酸(linoleic acid,LA)的水平及其对外周血CD8^+T细胞的作用。方法利用超高效液相色谱-质谱非靶向代谢联用技术检测8例白癜风患者及8例健康对照者血清中代谢物LA的水平,采用流式细胞术检测5例白癜风患者及5例健康对照者外周血中CD8^+T细胞的活化及杀伤性分子表达情况,最后体外常规培养5例患者外周血CD8^+T细胞,予以LA刺激,明确LA对白癜风患者外周血CD8^+T细胞活化及杀伤分子表达的影响。结果与健康对照相比,白癜风患者血清中LA水平显著升高(P<0.05),且外周血CD8^+T细胞过度活化(P<0.05)并高表达毒性杀伤分子颗粒酶B(granzyme B,GzmB,P<0.05)、穿孔素(perforin,PRF,P<0.05);进一步体外试验发现LA显著抑制白癜风患者外周血CD8^+T细胞的活化及毒性杀伤效应分子的表达。结论进展期白癜风患者血清中LA水平上调,可抑制CD8^+T细胞活化及杀伤效应功能,帮助机体重建自身免疫紊乱后平衡状态。