鸡胚骨骼肌组织M-CAT结合因子的初步鉴定

采用偶联ＣＡＴＴＧＣＴ寡核苷酸的ＤＮＡ亲和层析柱从发育１３ｄ鸡胚骨骼肌核抽提物中分离到两种核蛋白．ＳＤＳ－ＰＡＧＥ结果表明，被ＤＮＡ亲和柱滞留的两种核蛋白分子量分别为３０ｋＤ和３２ｋＤ．凝胶阻滞结合竞争分析显示，纯化的核蛋白可与Ｍ－ＣＡＴ共有序列ＣＡＴＴＣＣＴ特异结合．Ｓｏｕｔｈｗｅｓｔｅｒｎ印迹技术确定仅３０ｋＤ分子可直接识别、结合ＣＡＴＴＣＣＴ元件，但３２ｋＤ分子却不能．结果提示，３０ｋＤ分子为依赖ＤＮＡ的Ｍ－ＣＡＴ结合因子。

发育阶段M-CAT结合因子的组织分布及表达动力学

采用胶阻滞和ＤＮＡ蛋白质印迹技术分析了鸡胚和雏鸡发育不同阶段骨骼肌、心肌、胗、肝和脑组织核抽提物中ＭＣＡＴ结合因子（ＭＣＢＦ）与含ＣＡＴＴＣＣＴ、ＣＡＴＴＧＣＴ核心序列的寡核苷酸的相互作用．胶阻滞实验结果表明，被检的五种组织均有ＭＣＢＦ结合活性存在，但结合模样不完全相同；两寡核苷酸探针与同一骨骼肌核抽提物结合模样也不相同．采用两寡核苷酸为探针对五种组织核抽提物进行ＤＮＡ蛋白质印迹分析均检出一分子质量约３０ｋｕ核因子，提示３０ｋｕ核因子是存在于五种组织中的普遍因子，该因子可直接或以同二／多聚体结合ＣＡＴＴＣＣＴ、ＣＡＴＴＧＣＴ序列，属ＭＣＢＦ结合活性的基本组成成分．除普遍因子外，胶阻滞分析结果不排除各组织存在的特异因子通过蛋白质蛋白质相互作用、与３０ｋｕ因子形成杂聚体结合ＤＮＡ的可能性．骨骼肌组织３０ｋｕ因子在胚胎发育１８天前表达，出生后消失．

生物化学,踏歌而来——《生物化学》绪论课的教学设计与授课技巧分享

高等教育各门课程的第一节课通常是绪论,用以介绍本门课程的学习目的、主要内容,授课安排、考核方式等。其讲授效果直接关系到学生对本门课程的兴趣。在所有医学院校以及设有生命科学相关专业的院校,《生物化学》都是非常重要的必修基础课程。由于生命体的组成物质结构复杂,种类繁多,物质代谢途径相互联系,学生在学习《生物化学》课程时普遍感到深奥难懂。良好的开端,是成功的一半,“课程绪论”在整门课程的授课中发挥着举足轻重的作用。本人在北京大学医学部为基础医学、临床医学、药学、护理学等多个专业主讲《生物化学》20余年。在绪论部分,除了介绍教学安排、课堂要求和考核方式等常规内容,还将动听的生化歌曲、丰富的教学资料、以及医学人文相关内容融入课堂。经实践多年,获得了较为满意的授课效果,希望能对同行们的生物化学教学有所启发和帮助。

从近年Nobel奖项看生命科学进展

本文分析了近20年（1989－2008）诺贝尔生理学或医学奖以及化学奖中与生命科学有关的奖项资料.从基因表达调控与基因技术、细胞周期与细胞凋亡的分子机制、细胞信号转导的分子机制、泛素介导的蛋白质降解机制以及病原体研究5个方面进行概要归纳.它展示了近20年生命科学的发展历程,供广大科研、教学人员及研究生参考.

乙酰胆碱受体γ亚基基因-204/-50片段与鸡发育阶段骨骼肌核因子的相互作用

目的：分析鸡乙酰胆碱受体（ａｃｅｔｙｌｃｈｏｌｉｎｅｒｅｃｅｐｔｏｒｓ，ＡＣｈＲ）γ亚基基因与不同发育阶段鸡骨骼肌核因子的相互作用。方法：以ＡＣｈＲγ基因２０４／５０片段为探针，与孵化９～１８ｄ的鸡胚和出生后１ｄ、２周雏鸡骨骼肌核抽提物进行凝胶阻滞和Ｓｏｕｔｈｗｅｓｔｅｒｎ印迹分析。结果：凝胶阻滞实验显示，９ｄ、１３ｄ鸡胚骨骼肌核抽提物与γ基因２０４／５０片段结合反应可形成明显的阻滞条带，１８ｄ后阻滞条带明显减弱。Ｓｏｕｔｈｗｅｓｔｅｒｎ印迹分析显示，９～１８ｄ肌核抽提物中有２种核因子可识别、结合γ基因２０４／５０片段，相对分子质量分别为３００００和５３０００。采用２种实验方法在出生后的核抽提物中未检出ＤＮＡ结合活性。结论：ＡＣｈＲγ基因２０４／５０片段可被３００００和５３０００两种核因子识别，两因子在鸡胚发育的９～１８ｄ表达，出生后消失。它们可能对鸡ＡＣｈＲγ基因的转录激活起作用。

BTF2／TFⅡH的多功能与PolⅡ转录

ＢＴＦ２，又称ＴＦⅡＨ，为一多亚基蛋白质复合物，具有解链酶、依赖ＤＮＡ的ＡＴＰ酶及磷酸激酶活性，参与ｍＲＮＡ转录起始以及与转录偶联的核苷酸切除修复过程，在转录起始复合物形成过程中，ＢＴＦ２／ＴＦⅡＨ在有ＴＦⅡＥ存在时，可使ＲＮＡ聚合酶Ⅱ的羧端区域（ＣＴＤ）、ＴＢＰ及有关转录因子磷酸化．磷酸化反应可影响转录起始复合物中的蛋白质－蛋白质相互作用，调节转录起始，因此，ＢＴＦ２／ＴＦⅡＨ是一种重要的基本转录因子．

端粒酶与衰老关系初探

真核生物染包体末端均具有一种称为端区(Telomere)的特殊结构。这一结构的核苷酸链富含G,如人的端区含TTAGGG重复片段,四膜虫的端区含TTGGGG重复片段等。端区具有保护DNA双链末端。

鸡烟碱样乙酰胆碱受体γ亚基启动子中的M-CAT结合特性(英文)

鸡骨骼肌烟碱样乙酰胆碱受体 ( ACh R)γ亚基基因启动子含有几个 M- CAT元件 ,为γ亚基基因表达其全能活性所必需 .为探索 M- CAT元件结合功能特性 ,分析了 γ亚基启动子近转录起始点 - 67/ - 61位的 M- CAT元件与核因子的相互作用 .突变及结合试验证明 ,M- CAT核心序列结合几种测试组织中的核蛋白产生高迁移的 DNA-蛋白质复合物 ;侧翼序列结合肝以外的几种组织不同的核蛋白质 ,产生低迁移的 DNA-蛋白质复合物 .Southwestern印迹 ( DNA印迹 )技术在 1 3d鸡胚所有被检测的组织核抽提物中只检出了 30 k D的核蛋白 .结果提示 ,30 k D因子在多种组织普遍表达 ,可直接以单体或同质二聚体形式结合 M- CAT元件 ;而结合侧翼序列的不同组织因子结合DNA时可能需依赖普遍表达的 30 k D因子的存在 .

Beclin1与自噬及肿瘤的关系

细胞自噬控制着细胞内蛋白质和细胞器的降解,对于细胞生长及维持稳态发挥着重要作用。自噬的调节是一个复杂过程,这其中涉及到许多分子的调控。Beclin1是酵母自噬基因Atg6/Vps30的同系物,也是哺乳动物参与自噬的特异性基因,它通过对自噬的调节,在肿瘤的发生、发展中起着重要作用。Beclin1对自噬和肿瘤的调节不是孤立的,相反,它能与多种分子相互作用,形成不同复合体而发挥作用。越来越多的研究不断揭示出Beclin1新的作用机制,本文将对Beclin1的研究进展做一综述。

医学生对不同职称和专业背景教师PBL教学效果的评估

目的分析"以问题为基础学习"教学方法中医学生对不同职称、不同年龄、专业/非专业背景带教教师评估的成绩,为加强培训、提升教学效果提供理论依据。方法对2012年2月至2013年6月期间学生对全体PBL带教教师评估的数据进行统计分析,比较医学生对不同职称、不同年龄、专业/非专业背景带教教师评估成绩的差异。结果学生对教授评估的成绩显著高于副教授和讲师(P<0.01),对50岁以上教师评估的成绩显著高于年轻教师(P<0.05),对具有案例相关知识的专业带教教师"准备与态度"和"交流与反馈"两个方面的评估显著高于非专业背景教师(P<0.05)。结论学生对不同职称、年龄和专业/非专业带教教师的评估存在一定差异,为保证教学效果,需要加强PBL师资培训。

GAPDH功能多样性

3-磷酸甘油醛脱氢酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH)一直以来被认为是一种只分布在细胞质中、仅在糖酵解过程中起关键作用的酶。但是近年来,越来越多的研究表明GAPDH是一种多功能蛋白,且在细胞核、细胞质、生物膜上均有定位。如在细胞核内,GAPDH参与tRNA出核、mRNA稳定性调节、DNA损伤修复、组蛋白转录调控、凋亡及神经退行性疾病发生等。在细胞质中,GAPDH有磷酸激酶活性、催化微管聚合的功能及参与细胞保护。在生物膜上,GAP-DH可促进膜融合、参与膜转运等。

低年级医学生批判性思维现状及与基础医学课程成绩的相关性

目的分析低年级医学生批判性思维现状及与基础医学课程成绩的相关关系,为批判性思维的培养提供依据。方法以中文版批判性思维能力测量表评估北京大学二年级临床医学专业学生批判性思维现状,并分析与其基础医学课程平均成绩和单科成绩的相关性。结果 99名有效反馈的量表显示低年级医学生批判性思维整体较强,总分平均为306。7项特质平均分都显示为正性,其中"求知欲"(46.76)和"分析能力"(45.24)平均分较高,"批判性思维的自信心"(40.84)和"寻找真相"(41.79)平均分较低。相关性分析显示批判性思维总分和"开放思想"特质与基础课程平均成绩呈正相关,"开放思想"特质与每门课程成绩都呈正相关(P<0.05)。结论批判性思维及开放思想特质与低年级医学生的成绩呈正相关,需要在学习过程中加以培养。

胡椒碱对C57BL/6小鼠胆囊结石形成的影响

目的观察胡椒碱对实验性C57BL/6小鼠胆囊结石形成的影响。方法C57BL/6小鼠30只,对照组10只,普通饮食;结石组10只,喂含1%的胆固醇饮食;用药组10只,喂含1%的胆固醇饮食和胡椒碱(30mg/kg体重)。4周后分别用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及化学方法检测肝组织Scp2mRNA水平和胆脂的变化,胆固醇饱和指数(CSI)用Carey表计算。结果结石组9只出现胆囊结石,10只出现胆固醇结晶,胡椒碱组和对照组无结石和结晶形成,与结石组相比,胡椒碱组肝Scp2mRNA水平和胆囊胆汁CSI明显降低。结论胡椒碱在明显抑制实验性C57BL/6小鼠胆囊结石形成的同时,显著降低肝Scp2mRNA水平和胆汁CSI,这是否与胡椒碱的防止结石形成有关有待进一步的研究。

超分散剂对不饱和聚酯树脂/氢氧化铝复合体系热性能的影响

主要研究了端羧基及端胺基聚酯型超分散剂对不饱和聚酯树脂/氢氧化铝(UPR/ATH)复合体系热性能的影响。研究表明:GC022、GC032高摩尔质量超分散剂使复合体系中ATH失结晶水温度较高,GCO22、GC023端羧基超分散剂使树脂分解温度提高较大,ATH及超分散剂的加入使复合体系的固化程度略有下降,端胺基超分散剂最为明显,超分散剂的含量对复合体系的热变形温度影响存在一个最佳值,GC022为2%左右,端羧基超分散剂对UPR/ATH复合体系的热变形温度的改善优于端胺基超分散剂,高摩尔质量的分散剂优于低摩尔质量的分散剂。

体外过氧化物酶体增殖物激活受体-γ在舒林酸抗大肠肿瘤机制中的作用

目的:对比观察舒林酸、过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(peroxisomeproliferators-activatedreceptor-gam-ma,PPARγ)激动剂和PPARγ拮抗剂对结肠癌细胞增殖和凋亡的影响,初步探讨舒林酸抑制大肠肿瘤是否通过PPARγ起作用。方法:根据所加药物将结肠癌细胞株HT-29分为6组:舒林酸组,15-去氧-△12,14-前列腺素J2(15-deoxy-△12,14-prostaglandinJ2,15d-PGJ2,PPARγ激动剂)组,GW9662(PPARγ拮抗剂)组,舒林酸+GW9662组,15d-PGJ2+GW9662组及空白对照组,培养24和48h后,进行增殖细胞核抗原(proliferationcellnuclearantigen,PCNA)的免疫细胞化学染色测定各组细胞增殖情况;并收集各组细胞,用流式细胞仪AnnexinV-FITC/PI双染法测定各组细胞的凋亡。结果:(1)各组结肠癌细胞增殖情况:加药24和48h后PCNA表达的阳性率,对照组为33.2%±4.5%及25.0%±4.7%;舒林酸组为11.8%±3.7%及8.6%±1.9%;15d-PGJ2组为11.2%±2.5%及11.4%±2.1%;GW9662组为35.3%±4.3%及26.8%±3.9%;舒林酸+GW9662组为16.5%±5.3%及12.2%±2.4%;15d-PGJ2+GW9662组为21.0%±4.8%及21.5%±4.2%。(2)各组结肠癌细胞凋亡率:加药24h后各组细胞凋亡率,对照组为13.0%±1.0%;舒林酸组为41.0%±2.6%;15d-PGJ2组为11.5%±0.6%;GW9662组为12.4%±0.9%;舒林酸+GW9662组为33.6%±2.3%;15d-PGJ2+GW9662组为13.0%±1.0%。加药48h后各组细胞凋亡率,对照组为14.0%±3.4%;舒林酸组为95.3%±1.5%;15d-PGJ2组为31.5%±2.3%;GW9662组为13.0±1.9%;舒林酸+GW9662组为86.8%±0.4%;15d-PGJ2+GW9662组为12.9%±1.0%。结论:舒林酸与PPARγ激动剂作用相似,均可以抑制结肠癌细胞的增殖和促进结肠癌细胞的凋亡,二者作用均可被PPARγ的拮抗剂所拮抗,说明舒林酸作为PPARγ配体,其抑制结肠癌细胞增殖和促进结肠癌细胞凋亡的作用可能与激活PPARγ有关。

C57BL/6小鼠胆结石形成中固醇载体蛋白2的mRNA水平和胆固醇饱和指数增高

目的观察C57BL/6鼠胆囊结石形成过程中肝固醇载体蛋白2(SCP2)mRNA水平及胆囊胆汁中胆固醇饱和指数的变化。方法C57BL/6鼠20只,分为结石组和对照组。对照组喂普通饲料,结石组采用1%的胆固醇饮食4周;RT-PCR方法检测肝SCP2 mRNA水平的变化;全自动生化仪检测胆脂,并计算胆固醇饱和指数。结果胆囊结石组肝SCP2 mRNA水平显著升高,胆汁胆固醇饱和指数亦显著增加。结论肝SCP2的表达及胆汁CSI的增高呈正相关。

大鼠骨骼肌肌质网序列非依赖性的DNA结合蛋白

目的：观察大鼠骨骼肌肌质网上是否存在非核ＤＮＡ结合蛋白。方法：应用差速离心及蔗糖密度梯度离心法分离大鼠骨骼肌肌质网膜蛋白，用３２Ｐ标记的ＤＮＡ进行Ｓｏｕｔｈｗｅｓｔｅｒｎ印记杂交。结果：在大鼠骨骼肌肌质网膜中存在两种ＤＮＡ结合蛋白，相对分子质量分别是８３０００、５８０００，这２种蛋白质可与不同的线状双链ＤＮＡ，环状ＤＮＡ及单链ＤＮＡ结合。

荜拔油不皂化物抑制C57BL/6小鼠胆囊结石的形成

目的:观察荜拔油不皂化物对实验性C57BL/6小鼠胆囊结石形成的抑制作用。方法:C57BL/6鼠30只,每组10只,模型周期4周,对照组喂饲普通饮食;模型组喂含1%的胆固醇饮食;用药组喂含1%的胆固醇饮食和荜拔油不皂化物(30mg/kg体重)灌胃。结果:模型组9只出现胆囊结石,10只出现胆固醇结晶;荜拔油不皂化物组1只出现胆囊结石和结晶;对照组无结石和结晶形成。与模型组相比,荜拔油不皂化物组和对照组的肝氨肽酶N(APN)mRNA及胆囊胆汁胆固醇饱和指数(CSI)明显降低。结论:荜拔油不皂化物明显抑制高胆固醇饮食诱发的小鼠胆囊结石的形成,可能通过降低肝脏APN mRNA水平及胆囊胆汁胆固醇饱和指数发挥作用。

应对方式通过学习倦怠影响学习成绩的探究

目的:探讨医学生应对方式改善学习倦怠进而提高学习成绩的现象,并分析其原因。方法:以"基于问题学习"(Problem-based learning,PBL)为例,以北京大学2016级临床医学专业三年级学生为研究对象,课程前后应用"大学生学习倦怠调查量表"评估学习倦怠情况,课程结束后以"简易应对方式问卷"调查应对倾向,统计PBL课程结束后的考试成绩。PBL学习前后完成学习倦怠量表和应对方式问卷的学生共201人(78.82%),其中男生114人(56.7%),女生87人(43.3%)。结果:相关性分析显示应对方式中的积极应对维度与PBL之后学习倦怠(r=-0.400,P<0.001)及情绪低落(r=-0.366,P<0.001)、行为不当(r=-0.312,P<0.001)和成就感低(r=-0.351,P<0.001)3个因子呈显著负相关,与学习成绩得分(r=0.180,P<0.01)呈显著正相关;消极应对维度与学习倦怠(r=0.223,P<0.01)及情绪低落(r=0.224,P<0.01)、行为不当(r=0.204,P<0.01)2个因子呈显著正相关,与成就感低和学习成绩无显著相关性。中介效应分析显示,积极应对维度对学习成绩的影响完全是通过学习倦怠发挥的作用,中介效应占比为62.01%。积极应对维度高分组学生,在PBL学习之后,学习倦怠尤其情绪低落因子显著减轻。结论:学生积极应对维度,可以通过减轻学习倦怠发挥提高学习成绩的作用。