食物中毒样品中金黄色葡萄球菌及肠毒素检测

[目的]对3个可疑食物中毒样品进行金黄色葡萄球菌及肠毒素检测。[方法]按照GB/T4789.10-2003进行金黄色葡萄球菌检测,同时设计4对引物,分别扩增金黄色葡萄球菌的耐热核酸酶基因(nuc基因)和相关肠毒素基因(SEA、SEB、SECs),建立一种快速检测金葡菌和肠毒素的方法。[结果]3个样品通过增菌接种,均检出有完全溶血环、G+葡萄球菌,血浆凝固酶阳性的金黄色葡萄球菌;Baird-Parker直接计数菌落结果分别为:9.6×107cfu/g、1.5×105cfu/g、1.7×108cfu/g;PCR检测3个样品均扩增出了金黄色葡萄球菌nuc基因(279bp)和肠毒素A(SEA)基因(288bp)。[结论]3个样品中均检出含有葡萄球菌肠毒素A的金黄色葡萄球菌,是引起该次食物中毒的主要原因。

蜂胶与三种化学防腐剂抑菌性能的比较

目的研究蜂胶与某些化学防腐剂的抑菌性能及其稳定性。方法采用肉汤稀释法和定量抑菌试验法,对蜂胶及三种化学防腐剂抑菌性能进行比较观察。结果蜂胶对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌和黑曲霉菌的最低抑制浓度依次为7.8、31.25和31.25 g/L。苯甲酸钠对金黄色葡萄球菌最低抑制浓度为62.5 g/L,山梨酸和山梨酸钾对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌和黑曲霉菌的最低抑制浓度达到125 g/L以上。含10 g/L的蜂胶溶液对金黄色葡萄球菌作用10 min,抑菌率可达99.92%;对大肠埃希菌作用20 min,抑菌率仅为67.22%。苯甲酸钠、山梨酸、山梨酸钾对金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌作用20 min,抑菌率均达不到50%。含量10 g/L蜂胶经55℃存放14 d,对金黄色葡萄球菌杀灭效果无明显下降。结论蜂胶对细菌繁殖体和霉菌都有较强的抑菌作用,其储存性能稳定;蜂胶抑菌性能明显优于苯甲酸钠、山梨酸、山梨酸钾等防腐剂。

紫外线-乙醇联合使用对克洛诺菌属的协同杀菌效果

为探讨紫外线-乙醇联合使用是否对克洛诺菌属产生协同消毒效果,对0.1%稀释复原婴儿配方奶粉分别用乙醇,氢氧化钠和紫外线对克洛诺菌属NC830的杀菌效果进行了调查。结果表明,体积分数为50%和25%的乙醇处理仅引起3.65和4.05 mL-1的杀灭效果,而使用体积分数为75%的乙醇,阪崎克洛诺菌的水平下降5.46 mL-1(对数值)。质量分数为1.0%,2.5%,5.0%的氢氧化钠杀灭效果分别达到4.84,5.44和6.46mL-1(对数值)。紫外线分别作用克洛诺菌属10,20,30 min,杀灭效果分别达到1.14,2.03和2.89 mL-1(对数值)。经过30 min的处理,紫外线、乙醇和两者联合使用对阪崎克洛诺菌杀灭值分别为2.81,3.85和5.07 mL-1(对数值),紫外线-乙醇联合使用对阪崎克洛诺菌产生协同消毒效果。

HIV抗体筛查实验室质量管理体系的建立

艾滋病是一种危害人类生命健康的传染病，目前已成为全球关注的公共卫生和社会问题．因此提高实验室检测水平，建立规范化的HIV抗体筛查实验室（简称实验室）对发现HIV感染者和AIDS患者的临床诊断起着重要作用。按照卫生部的《全国艾滋病检测工作管理办法》（简称《办法》）和《艾滋病检测技术规范》（简称《规范》），结合《检测和校准实验室能力的通用要求》的管理要求，从组织结构、程序、过程、资源四部分建立质量管理体系，使相关检验活动的有效运行达到实验室管理的科学化、规范化、程序化，从而提高检测的准确性，确保检验工作质量。

转基因食品PCR定性检测技术的研究

目的建立简便、快速、灵敏、特异的植物源性转基因食品DNA检测技术。方法针对转基因植物技术中载体上常用花椰菜花叶病毒的35S启动子和根农杆菌的NOS终止子特异基因序列,设计合成特异的引物对35S、NOS,利用基因PCR扩增技术检测转基因食品。结果引物对35S、NOS分别成功从转基因大豆中扩增出195bp和180bp特异的DNA带。结论基于35S启动子和NOS终止子基因序列的PCR扩增技术是一种简便、快速、灵敏、特异的转基因食品DNA检测技术。

酯酶同工酶法在净普力灭蚊作用机制研究中的应用

目的通过对净普力筛选的致倦库蚊体内酯酶同工酶量的变化研究,以揭示酯酶同工酶在净普力灭蚊中所起的作用。方法不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳法。结果净普力处理组与空白对照组酯酶同工酶电泳均可见3条带(分别称之为A、B和C带),其迁移率分别为0.42、0.45和0.51,显示两组蚊虫都表达了3种不同的酯酶同工酶。采用4种不同的上样量和2种不同的取样方法所得的电泳结果具有一致性。处理组与对照组相比,明显可见A带和C带颜色加深,显示这两种酶表达量增加;而B带颜色变浅,显示该酶表达量减少。结论酯酶同工酶法可用于灭蚊机制研究。

示波极谱法测定空气中的锡

国内车间空气中锡的测定方法有原子吸收法和催化极谱法,但灵敏度均不太高,不适合大气中痕量锡的测定。我们在文献的基础上,对大气中痕量锡的示波极谱测定法进行了研究。方法原理是锡-茜素络合物在乙酸-乙酸钠缓冲液(pH2.20)中于-0.60V(Vs.SCE)左右产生一良好的吸附波。二阶导数峰高与锡浓度在0.0025～0.6μg/ml之间呈良好线性关系。方法灵敏度高、选择性好、峰形稳定、抗干扰能力强,用拟定方法不经分离直接测定了大气中的痕量锡,取得满意结果。

2016-2023年南昌市儿童诺如病毒胃肠炎疫情的流行特征及病原学分析

目的分析2016年3月―2023年2月南昌市诺如病毒(norovirus,NoV)引发儿童胃肠炎疫情的流行特征及基因型别分布,为儿童病毒感染性胃肠炎防控提供科学依据。方法对2016年3月―2023年2月南昌市儿童NoV胃肠炎疫情及个案资料进行流行病学特征分析,采集病例肛拭子、粪便标本或呕吐物,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RT-PCR)进行NoV GⅠ和GⅡ基因群鉴定,核酸检测阳性标本采用特异引物扩增,所得扩增产物测序后进行基因型别及重组分析。结果共调查处理儿童NoV胃肠炎疫情89起,其中幼托机构49起,小学40起,平均每起疫情涉及14.71例病例,总患病率为3.18%。报告病例男女比为1.22∶1.00,平均流行时间约3 d。疫情高发月份为10月―次年2月,城区幼托机构为疫情高发场所。共采集823份病例样本,NoV核酸阳性率为55.65%。GⅠ群NoV 6起,GⅡ群81起,混合感染2起。73起测序成功,经比对分析出14个基因重组亚型。NoV GⅠ群有GⅠ.3[P13]、GⅠ.6[P11]、GⅠ.4[P4]型;GⅡ群以GⅡ.2、GⅡ.6和GⅡ.7亚型为主,有11个重组亚型。GⅡ群疫情中GⅡ.2[P16]型占比最高,优势基因型由GⅡ.2向其他型别转变。结论南昌市近年儿童NoV胃肠炎疫情主要集中于城区幼托机构,冬季高发。引起疫情的主要病原体是GⅡ群NoV,以GⅡ.2[P16]型为主的多种基因重组型同时流行。

BK多瘤病毒microRNA研究进展

BK多瘤病毒(BK polyomavirus,BKV)是一种人群普遍易感的病毒,可导致约10%的肾移植受者进展为病毒性肾病,近年来随着器官移植手术的广泛开展而备受关注。microRNA是一类新近发现的由20~23个核苷酸构成的非编码RNA分子,通过抑制或定向裂解目标mRNA后转录调控基因表达。宿主和病毒都可以编码microRNA,且宿主与病毒间存在microRNA-mRNA相互作用的机制。BKV可表达microRNA,由病毒基因组晚期编码区转录,与病毒早期编码区互补而调控早期基因表达及病毒复制。BKV microRNA在病毒性肾病进程的作用和功能尚不清楚,深入研究BKV microRNA参与宿主和病毒之间的相互作用将对疾病早期诊断、治疗和预防提供新的思路。

从集体性腹泻病人中检出副溶血性弧菌

目的探讨分子生物学(PCR法)在副溶血性弧菌鉴定中的意义。方法用传统微生物检验方法分离、鉴定病原菌,同时用分子生物学PCR方法进行验证。结果从腹腔病人19份标本中分离出14株可疑菌,PCR特异性扩增带在250bp～500bp之间且靠近250bp片段,其大小为285bp左右。本次共检样品19件,检出该菌14件,其检出率为74%。结论经过细菌形态学、生化反应、溶血试验确定该菌为副溶血性弧菌,分子生物学PCR方法结果一致。

南昌市2011-2022年学校流感样病例暴发疫情流行特征及影响因素

目的 分析南昌市2011-2022年学校流感样病例暴发疫情的流行特征以及影响因素,为防控学校流感暴发提供参考依据。方法 收集南昌市2011-2022年学校流感样病例暴发疫情现场流调相关资料和呼吸道样本病原学检测结果,进行流行病学和病原学分析。结果 共收集南昌市2011-2022年报告流感样病例暴发疫情142起,累计报告发病数2 880例,患病率为1.89%。共采集呼吸道样本1 263份,流感病毒核酸阳性总检出率为58.91%。2017-2019年暴发疫情数占比最高,2011-2013年最低,疫情主要发生在11月至次年3月(占79.58%),呈现明显的季节性特征;场所分布主要以小学为主,占暴发疫情总数的70.42%(100/142);2011-2022年各型流感病毒均有检出,每年有2种及以上型别的流感病毒流行,暴发流行的优势毒株总体呈现以甲型流感病毒H1N1、甲型流感病毒H3N2和乙型流感病毒BV交替流行的趋势。2011-2019年南昌市学校流感样病例暴发疫情呈持续上升趋势,2020-2022年新冠疫情期间,南昌地区采取多种非药物防控措施进行管控新冠疫情,各种学校流感样病例暴发疫情数量和流感病毒核酸阳性病例数均下降。疫情涉及班级平均数为(3±2)个,疫情持续时间平均为(8±4)d。结论 南昌市学校流感样病例暴发疫情以冬春季高发,城区小学是流感暴发的高发场所。新冠疫情非药物防控措施对流感的流行趋势有影响,应持续监测及时掌握学校流感病毒的活动情况。

2013-2018年南昌市重症肺炎病例中甲型流感病毒感染状况分析

目的分析南昌市重症肺炎病例的甲型流感病毒分布特征和发病特点,为重症肺炎病例的临床防治提供依据。方法收集2013年4月～2018年3月南昌市重症肺炎病例的呼吸道样本和病例资料,进行病原学和流行病学分析。结果 2013年4月～2018年3月共检测来自南昌市17家医疗机构的261例重症肺炎病例,检出甲型流感病毒核酸阳性77例,总阳性率为29. 50%。其中包括39例新甲H1NI病例、13例季节性H3、16例人感染H7N9禽流感、3例人感染H10N8禽流感。甲型流感病毒重症肺炎病例主要发生在冬春季(12月至次年5月),年龄中位数48岁,其中男性48例,女性31例。2013-2018年南昌市报告21例人感染H7N9/H10N8禽流感病例,90. 48%(19/21)的病例通过不明原因肺炎监测发现,病死率33. 33%。结论南昌市重症肺炎病例中近三成感染甲型流感病毒,其中新甲H1NI流感病毒为主要流行株,死亡病例均为禽流感病毒感染。

2013—2018年江西省南昌市重症肺炎病例流行病学特征分析

目的分析江西省南昌市重症肺炎病例的流行病学特征,为重症肺炎病例的临床防治提供依据。方法收集2013年4月至2018年3月南昌市重症肺炎病例的呼吸道样本和病例资料,进行病原学和流行病学分析。结果来自17家南昌市医疗机构的261例重症肺炎病例,检出流感病毒核酸阳性81例,阳性检出率为31.03%。其中包括新甲H1(43例)、季H3(13例)、人感染H7N9禽流感(18例)、人感染H10N8禽流感(3例)和乙型流感(4例)。重症肺炎病例主要集中在冬春季(12月至次年5月),男女性别比为1.69∶1。病例年龄最小为1月龄,最大为95岁。21例人感染H7N9/H10N8禽流感病例,病死率33.33%。90.48%(19/21)的病例通过不明原因肺炎监测发现,年龄中位数为69岁,大部分病例有基础性疾病和明确禽类接触史。结论南昌地区重症肺炎病例流感病毒以新甲H1流感病毒流行为主,应及时发现新型流感病毒,坚持监测工作常态化,做好传染病防控工作。

2012年江西省南昌市手足口病病原学监测结果分析

目的分析江西省南昌市2012年临床诊断为手足口病患者标本的病原学检测结果,为手足口病的临床诊治和防控提供实验室依据。方法采用实时荧光定量反转录-聚合酶链反应(real time RT-PCR)对2012年1—12月间1028例医院诊断为手足口病的患者标本核酸进行鉴定分型,并统计分析。结果临床诊断为手足口病的患者标本1028份中,632份为肠道病毒通用阳性,总阳性率为61.48%,其中肠道病毒71型(EV71)、柯萨奇病毒A组16型(Cox A16)、EV71和Cox A16混合感染、其他肠道病毒阳性检出率分别为39.0%、10.21%、0.09%和12.16%。病原学检测阳性标本中男女性别比为1.8∶1;发病年龄段主要集中在5岁以下儿童(94.36%),尤其是3岁以下男童。结论 2012年南昌地区手足口病的主要病原体为EV71,且较2009—2011年有上升趋势。

645例HIV抗体筛查阳性样本确证检测分析

目的对645例HIV抗体筛查阳性标本确证实验结果进行分析,给HIV抗体检测工作提供指导依据。方法采用免疫印迹法(WB)对645例HIV抗体筛查阳性检测样品进行确证检测,对确证结果不确定者进行随访复查。结果 645例筛查阳性者中,确证HIV-1抗体阳性550例,阳性率为85.3%;阴性56例,阴性率为8.7%;不确定结果 39例,占筛查阳性的6%。反应条带gp160和gp120的出现率最高,分别为100%、99.5%;p17和p55出现率较低,为63.5%和40.5%。不确定者中,p24出现单一带型最多占56.4%,7例转为确定者带型分别为gp160/p24、gp160/p24/p66、gp160/p66。结论确定为HIV-1抗体阳性者带型,各带型出现的几率有所差别,HIV抗体不确定者,存在一定的假阳性,应谨慎处理,加强随访检测。

3种核酸提取方法检测甲型H1N1流感病毒的比较

目的选择常见的3种核酸提取方法,比较其对低拷贝数甲型H1N1流感病毒核酸检测的敏感性差异,为实验室应用和结果的评价提供依据。方法对已确定阳性的甲型H1N1流感病毒标本,作10-1～10-4系列稀释,选用Promega公司全自动核酸提取仪及配套试剂盒、QIAGEN公司Rneasy MiniKit和国产H公司提取试剂盒3种核酸提取方法提取上述标本核酸模板,采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(荧光RT-PCR)对其进行评价。结果在对不同拷贝数流感病毒的检测中,3种核酸提取方法以Promega公司全自动核酸提取仪提取效率最高,以此提取效率作为100%,则QIAGEN Rneasy MiniKit和国产H公司提取试剂盒的平均提取效率依次为83.27%、55.70%。经方差分析,3种方法之间存在显著性差异(P<0.05)。结论各试剂之间提取核酸的效率存在显著差异,建议根据实际情况采用合适的核酸提取试剂和方法。

2011年-2015年南昌市流感监测哨点医院病原学检测结果分析

目的了解2011年-2015年南昌市流感病毒流行情况,为科学制定流感防控策略提供参考依据。方法收集2011年1月-2015年12月南昌市哨点监测医院流感样病例标本,采用实时荧光定量反转录PCR（real-time RTPCR）反应进行病毒核酸检测分型,阳性标本接种MDCK细胞进行病毒分离,血凝抑制实验鉴定。结果共检测流感标本核酸3 856份,阳性标本829份,阳性率为21.5%;其中新甲型H1N1、季节性H3、B型阳性率分别为4.69%、10.8%、5.9%。各年度阳性率差异有统计学意义（χ2=160.38,P〈0.01）。不同年龄组流感病毒检出结果差异有统计学意义（χ2=12.93,P〈0.01）,其中以5岁~年龄组阳性率最高（25.8%）,0岁~年龄组阳性率最低（14.6%）。流感病毒在各监测年度冬春交季有1个流行高峰。结论南昌市2011年-2015年有3种毒株呈现共同或先后交替流行。新型人禽流感病毒的活跃对南昌市流感病毒流行态势造成了一定的影响。

食品从业人员肠道细菌CTX-M型超广谱β-内酰胺酶的携带状况研究

目的调查食品从业人员肠道革兰阴性细菌CTX-M型超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)基因的携带状况及基因型分布。方法选择140名食品从业人员健康体检时的肛拭子标本,用加入头孢曲松钠的营养琼脂平板筛选样本中革兰染色阴性耐药菌,PCR方法扩增blaCTX-M耐药基因,对阳性扩增产物进行测序以明确CTX基因亚型。结果 140份肛拭样本中有125份样本中分离到头孢曲松钠耐药革兰阴性菌,携带率为89.3%(125/140)。125株耐药菌株中CTX-M的检出率为97.6%;五组CTX中检出率最高的为CTX-M-9组56.0%,其次为CTX-M-1组38.4%,有4株菌同时检测到CTX-M-9组和CTX-M-1组酶。通过序列比对,共检测到9种CTX基因亚型,检出率最高的是CTX-M-14和CTX-M-15。结论食品行业从业人员对β-内酰胺类药物普遍存在有抗性的肠道细菌,产CTX-M型超广谱β-内酰胺酶的革兰染色阴性细菌广泛存在,鉴于其工作特点,获得并导致耐药菌传播的风险性很高。