沙门菌、志贺菌、副溶血性弧菌多重PCR检测方法的研究

建立快速检测沙门菌、志贺菌和副溶血性弧菌的多重PCR方法[1～4]。根据沙门菌hilA基因、志贺菌ipaH基因及副溶血性弧菌TDH基因设计特异性PCR引物[5～6],被检样品经4h振荡培养后金属浴裂解制备DNA模板,使用全自动毛细管电泳核酸检测系统分析PCR扩增产物。在580、423和245bp处分别出现预期的特异性DNA条带,且无非特异扩增条带出现。敏感性试验显示沙门菌在模拟标本中的检测灵敏度为101～2cfu/mL、志贺菌为101cfu/mL、副溶血性弧菌为102cfu/mL。该方法操作方便、分析时间短、特异性和灵敏度高,可用于公共卫生突发事件食源性病原菌的快速检测。