白细胞介素22对乙醛诱导下肝星状细胞增殖活化的影响及其机制

目的研究白细胞介素22（IL-22）对乙醛诱导的肝星状细胞（HSC）活化增殖的影响，并探讨抗氧化轴Nrf2-keapl—ARE在该作用中的地位。方法体外培养HSC—T6，采用不同浓度（25、50、100、200、400μmol／L）的乙醛刺激24、48h后，四甲基偶氮唑盐法测定细胞增殖率以筛选出最佳造模条件。用最适浓度的乙醛（200μmol／L）处理HSC—T624h后，再分别用不同浓度的IL-22（10、20、50ng／m1）干预24h，四甲基偶氮唑盐法测定细胞增殖情况，同时采用Westernblot和免疫细胞化学检测Nrf2、α-平滑肌肌动蛋白的表达情况，分光光度法检测培养上清液中丙二醛（MDA）、谷胱甘肽（GSH）含量的变化。采用SPSS17．0软件进行统计学分析，结果以均数±标准差（X±s）表示，P〈0．05为差异有统计学意义。多组样本均数的两两比较采用One-wayANOVA分析。结果乙醛刺激后HSC增殖活化明显增强，以200μmol／L作用48h最为明显。加用梯度浓度的IL-22干预后，表现为剂量依赖性地抑制HSC活化增殖，IL-2210、20、50ng／ml组增殖移植率分别为14％、25％、35％垆值均〈0．05）。Westernblot和免疫组织化学检测结果均显示各组HSC内Nrf2总蛋白表达无明显差异，而Nrf2核蛋白在空白对照组表达很少；当乙醛刺激后表达增加（与空白组相比，P〈0．05），加用梯度浓度IL-22干预后，Nrf2核蛋白表达进一步增加垆值均〈0．05）。分光光度法显示，与空白组相比，乙醛刺激后培养上清液中MDA、GSH水平均升高，加用梯度浓度的IL-22干预后，MDA水平显著下降，而GSH水平进一步明显升高（P值均〈0．05），二者均存在剂量依赖性。结论乙醛诱导HSC活化增殖，成功建立了酒精性肝纤维化的体外模型；IL-22对乙醛诱导的HSC活化增殖有明显的抑制作用，其机制可能与促进HSC内Nrf2核转位及下游靶基因GSH表达、增强机体抗氧化轴Nrf2-keapl-ARE的活性有关。