T细胞共刺激分子及其亚群在胃癌和大肠癌组织中表达的意义

目的探讨T细胞共刺激分子及其亚群在胃癌、大肠癌发生及预后中的作用。方法应用流式细胞术检测38例胃癌、42例大肠癌患者和21例健康人(对照组)外周血T细胞亚群及其共刺激分子CD28的表达。结果T细胞共刺激分子CD28(CD28+CD3+)表达:胃癌组为(25.80±10.56)%,大肠癌组为(28.95±9.29)%,均明显高于对照组的(0.82±0.98)%,P<0.01;总T细胞(CD3+)表达:胃癌组为(53.61±13.84)%,大肠癌组为(55.96±10.68)%,均明显低于对照组的(72.07±7.83)%,P<0.01;CD4+T细胞(CD4+CD3+)表达:胃癌组为(29.84±9.71)%,大肠癌组为(33.75±9.04)%,也均明显低于对照组的(38.79±5.08)%,P<0.01,P<0.05;细胞毒T细胞(CTL,CD8+CD28+CD3+)表达:胃癌组为(1.57±1.99)%,大肠癌组为(1.93±2.61)%,均明显高于对照组的(0.02±0.04)%,P<0.01;胃癌组CD8+抑制性T细胞(CD8+CD28-CD3+)和CD4/CD8比值明显低于对照组〔(16.06±6.94)%vs(20.56±6.54)%,P<0.05;(1.10±0.51)%vs(1.36±0.31)%,P<0.05〕;大肠癌组调节性T细胞(CD4+CD25+CD3+)明显高于对照组〔(19.74±6.89)%vs(13.72±3.08)%,P<0.01〕。胃癌组和大肠癌组患者手术前和手术后1周外周血T细胞亚群(除外胃癌组的CD3+细胞和CD28+CD3-细胞)的差异无统计学意义(P>0.05)。结论胃癌和大肠癌患者T细胞数量明显减少,T细胞共刺激分子CD28表达增高。胃癌患者CD4+T细胞显著减少;大肠癌患者调节性T细胞显著增加。

原因不明习惯性流产患者外周血T细胞亚群变化

目的分析外周血T细胞亚群改变在原因不明习惯性流产(UHA)发病中的可能作用。方法应用流式细胞术检测60例UHA(非孕期)患者和20例正常非孕(NNP)妇女外周血T细胞亚群表达水平。结果UHA较NNP总T细胞和T细胞共刺激分子CD28+表达水平明显升高(P<0.05,P<0.01);细胞毒T细胞亚群(CTL)比例和CD8+CD3-淋巴细胞群UHA组也较NNP组显著升高(P<0.01)。而CD4+CD25+T(Tr)细胞亚群比例显著下降(P<0.01)。CD4+CD29+T(Ti)细胞亚群和CD4/CD8比值,UHA和NNP表达无显著差别(P>0.05)。结论UHA患者存在外周血T细胞亚群比例失调,Tr细胞群比例下降可能与UHA发病有一定关联。

胰岛素自身抗体与胰岛素抵抗的关系

目的 通过对糖尿病患者血清胰岛素自身抗体 (IAA)的检测 ,了解 IAA与胰岛素抵抗 (IR)产生是否有关联及其与高血压和微血管病变发生之间的内在联系。 方法 采用 EL ISA方法检测 30 9例糖尿病患者血清中 IAA。 结果 糖尿病患者 IAA总检出率为 6 7.31%。IAA阳性病例中 ,伴发血管病变者 (70 .5 4%～ 75 .31% )较无并发症者 (18.5 2 % )显著增高 (P<0 .0 1) ,微血管病变的发生率 (39.48% )与高血压的发生率 (2 9.45 % )差异无显著性 (P>0 .0 5 )。不同性别 IAA检出率 (6 5 .6 4%和 6 9.18% )差异也无显著性 (P>0 .0 5 )。 结论 IAA阳性者微血管病变和高血压的发生机率均较 IAA阴性者明显增高 ,IAA可能是导致 IR重要因素。

医学生科研意识与能力培养的探索

当今医学生培养的方向是培养医学生知识追求、科学研究、借鉴能力、开拓创新等文化、心理、思维素质等的综合培养。针对传统教学模式重知识传授 ,轻素质和能力培养 ,普遍存在对医学生科研价值认识不足。医学生的科研意识不强 ,科研水平普遍不高等现象。该文就如何在素质教育实施过程中 ,培养医学生的科研意识和能力作一些探讨。

幽门螺杆菌粘附作用的体外研究

置幽门螺杆菌(HP)悬液于含人喉癌上皮细胞(Hep-2)或人胃癌上皮细胞(MKN-28)的培养瓶内,经2h或3.5h培养后观察HP对细胞的粘附情况。结果发现HP能成丛地粘附在上皮细胞表面,少数侵入胞浆内。HP对MKN-28粘附率明显高于对Hep-2细胞者。随菌龄的延长或菌株的变异,HP的粘附作用明显减弱。1%D-甘露糖对HP的粘附性有部分阻抑作用。

急性阑尾炎细菌学分析

关于急性阑尾炎的微生物学分析,尤其是从厌氧菌角度探索,早在30年代末、40年代初美国的 Altenier 等就做了许多开拓性研究。由于抗菌素的滥用和菌谱的变动以及人类生活活动的改变,从不同角度继续探讨急性阑尾炎的细菌学,对研究这种常见的疾病的发病原因和治疗将会有所帮助。我室自1984年4月～1986年12月对附属协和医院收集的阑尾炎脓液标示本52份进行细菌学检测和药敏试验,现将结果分析如下。

急性绞窄性肠梗阻肠道细菌移位实验观察

本文通过36只小白鼠的急性绞窄性小肠梗阻动物模型观察肠道定植细菌移位到系膜淋巴结及其他器官(肝、脾、心、肺及腹膜腔)。结果发现:梗阻15min,系膜淋巴结等器官细菌检出率达50％以上,2h后,腹膜腔渗液和肝脏细菌培养全部阳性。移位的菌群主要是大肠杆菌、脆弱拟杆菌群、肠球菌和厌氧球菌等,与临床内源性感染菌群相似。梗阻发生15,30,60,90,120min,后需氧菌移位的机率无显著性差异(P>0.05),而厌氧菌则以15,60,120min组检出较高。脏器以系膜淋巴结捡出最高,其次是肝、脾及腹膜腔。

腰椎间盘突出症髓核组织磷脂酶A_2表达的临床研究

目的探讨磷脂酶A2在腰椎间盘突出症诱发腰腿痛中的可能作用。方法①术前1d收集腰椎间盘突出症患者的一般临床资料,包括病程、年龄、性别等,并进行患者的腰腿痛评定;②采集术中标本进行冰冻切片,应用SP法行免疫组织化学检测sPLA2及cPLA2在髓核组织中的表达;③应用SPSS11.5统计软件进行分析。结果①实验组髓核中的sPLA2及cPLA2表达率明显高于对照组,且与患者的疼痛程度密切相关;②髓核中sPLA2及cPLA2的表达位置主要为多核大细胞。结论磷脂酶A2在腰椎间盘突出症诱发腰腿痛中发挥着重要的病理作用,且其表达与退变髓核可能存在一定关系。

上消化道溃疡、胃癌患者胃液与胃粘膜的菌谱分析

目的：了解上消化道溃疡和胃癌患者的胃液与胃粘膜的菌谱构成。方法：对７５例消化性溃疡和５７例胃癌患者胃液与胃粘膜进行菌谱分析。结果：（１）胃粘膜细菌阳性检出率溃疡组为９４．２３％，胃癌组为１００．００％，胃液细菌检出率溃疡组和胃癌组分别为３６．００％，７８．９５％。（２）细菌阳性检出组胃液ｐＨ均值为４．７７±２．４４，阴性组为２．０５±０．８１，两者差异有显著性（Ｐ＜０．０１）。ｐＨ值升高与细菌检出率呈正相关。（３）胃液菌谱主要由四联球菌、甲型链球菌及奈瑟氏菌等构成，胃粘膜菌谱以厌氧菌为主。（４）溃疡组与胃癌组菌群构成不同，后者亚硝化菌株、类杆菌及梭菌等检出较前者多。

溶血磷脂酸对人类视网膜色素上皮细胞生物学功能的影响研究

目的:研究溶血磷脂酸(lysophosphatidic acid,LPA)对体外培养人类视网膜色素上皮(human retinal pigment epithelia-lium,hRPE)细胞增殖活力、分化特性及免疫活性等生物学功能的影响。方法:采用MTT法检测体外培养hRPE细胞增殖活力;角蛋白及α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)免疫细胞化学染色方法分析体外培养hRPE细胞分化特性;流式细胞术检测hRPE细胞表面HLA-ABC、HLA-DR、ICAM-1的表达。结果:加药后第2d开始LPA组吸光度明显高于对照组(P<0.001);角蛋白18表达对照组较LPA组强(uc=-12.683,P<0.001),α-SMA表达对照组较LPA组弱(uc=10.402,P<0.001);hRPE细胞表面HLA-ABC、HLA-DR、ICAM-1的阳性细胞率和平均荧光强度组间差异无统计学意义(各指标均P>0.05)。结论:LPA明显促进hRPE的增殖活力,促进hRPE转分化,在PVR形成过程中起潜在的促进作用,但对hRPE免疫活性无影响。

幽门螺杆菌球形转化的超微结构研究

延长培养时间诱导幽门螺杆菌（Ｈｐ）的球形转化，以电镜结合光镜观察了Ｈｐ的常规涂片、负染色、金属投影及超薄切片样品。发现螺杆状Ｈｐ可通过分节或芽生过程生成球形菌。少数球形Ｈｐ能进行二分裂，表明其具有存活力和繁殖力。绝大多数已呈球形Ｈｐ的陈旧培养，若更换培养基重新传代，Ｈｐ又呈螺杆状，证实作为一个群体球形Ｈｐ是可逆转的。本文也讨论了Ｈｐ球形转化在流行病学及临床方面的意义。

慢性腹泻患者肠道菌群的分析

目的探讨慢性腹泻患者肠道微生态的菌群变化情况。方法对６４例慢性腹泻患者、３０例健康人的粪便进行１３种厌、需氧菌培养。结果６４例慢性腹泻患者肠道菌群均发生显著失调，表现双歧杆菌、肠球菌显著低于健康人（Ｐ＜０．０５），优杆菌、韦荣氏球菌、产气荚膜梭菌显著高于健康人（Ｐ＜０．０１）。结论慢性腹泻患者肠道菌群发生显著失调，抗生素是影响肠内菌群紊乱的重要因素。

人骨髓间质干细胞体外扩增、冻存及初步鉴定

目的探索人骨髓间质干细胞(hMSC)的体外分离、扩增、冻存、复苏的方法。方法无菌条件下抽取骨外伤髓内钉固定手术髓腔内容物,应用Ficoll-Paque分离液分离hMSC,通过传代扩增细胞,“慢冻速融”进行细胞冻存、复苏;流式细胞仪检测hMSC的表面标志。结果hMSC容易分离获取、体外扩增迅速、冻存复苏简便,复苏后细胞形态保持不变。流式细胞仪检测结果显示,CD34、CD45阴性,CD29及CD71、CD90阳性表达率分别为96.9%,99.1%及4.1%。结论hMSC库有望建立,为组织工程、细胞移植的研究提供种子细胞。

骨形态发生蛋白-2和Ⅱ型胶原在退变腰椎间盘髓核组织中的表达及意义

目的:探讨骨形态发生蛋白-2(BMP-2)和Ⅱ型胶原在退变腰椎间盘髓核中的表达及其意义。方法:应用原位分子杂交(ISH)和免疫组织化学法,检测30例(男23例,女7例)退变腰椎间盘髓核(退变组)和8例(男6例,女2例)无明显退变腰椎间盘髓核(对照组)中BMP-2和Ⅱ型胶原mRNA和蛋白的表达情况;应用Image-ProPlus5.0图像分析软件测定各指标的平均灰度值。结果:退变组BMP-2的mRNA和蛋白(109.51±8.32和104.48±14.24)表达较对照组(146.93±16.35和146.38±19.53)增强(P<0.05和P<0.01);而退变组Ⅱ型胶原mRNA和蛋白(139.49±16.05和140.34±18.26)表达较对照组(113.09±15.28和113.72±13.59)减弱(P<0.01)。退变组中,BMP-2和Ⅱ型胶原mRNA、蛋白表达均呈一定的负相关关系(r分别为-0.602和-0.614,P<0.01)。结论:在椎间盘退变过程中BMP-2可能是一个重要的调节因子;其对椎间盘退变的调节作用与Ⅱ型胶原有一定关系;BMP-2在退变椎间盘中的表达增强可能是一种保护性的反应。

腰椎间盘髓核细胞体外培养及细胞生物学特性研究

目的:提取大鼠腰椎髓核细胞体外培养并观察其细胞生物学特性。方法:显微解剖下分离30日龄SD大鼠的腰椎髓核细胞,体外单层培养,应用MTT检测PDGF-BB和IL-1β处理对培养细胞增殖的影响,同时观察细胞不同时期的超微结构形态学变化。结果:大鼠的腰椎髓核细胞体外单层培养生长扩增良好,没有失去髓核细胞基本生物学特性。结论应用SD大鼠可以建立合格的腰椎髓核细胞体外培养体系。

明胶酶与肿瘤侵袭转移的研究进展

明胶酶是基质金属蛋白酶(MMP)中一类非常重要的亚型,包括MMP2和MMP9。最近几年,人们对MMP2、MMP9及其抑制剂作了大量研究,以了解其生理及病理学方面的重要意义。目前,以MMP精细结构及功能分析为基础而设计的MMP抑制剂,已被广泛应用于肿瘤转移的动物模型以及人类癌症的临床研究。

阴道镜联合DNA倍体分析对宫颈上皮内瘤样病变治疗的意义

目的探讨阴道镜联合DNA倍体分析指导宫颈上皮内瘤样病变(CIN)临床治疗的意义。方法采用阴道镜联合流式细胞仪对宫颈脱落细胞进行细胞周期和DNA倍体分析和病理组织学检查,对66例患者宫颈脱落细胞进行瘤变分析,指导临床治疗方法的选择。结果宫颈脱落细胞DNA异倍体阴性者阴道镜和组织病理学诊断均属CINⅠ;阴道镜CINⅡ、Ⅲ均检出异倍体细胞。阴道镜CINⅠ者异倍体细胞检出率为71.4%,与组织病理诊断符合率达80%;阴道镜CINⅢ与组织病理诊断符合率达100%;阴道镜诊断CINⅡ患者,组织病理学诊断CINⅠ为44.0%、CINⅡ32.0%、CINⅢ24.0%。结论阴道镜联合宫颈脱落细胞DNA倍体分析有助于宫颈病变组织恶性度的判断,尤其对CINⅠ/Ⅱ患者临床治疗有指导意义。

骨肉瘤程序性死亡因子配体1的表达及临床意义

目的通过检测程序性死亡因子配体1(PD-L1)在骨肉瘤组织中的表达,探讨其与骨肉瘤患者临床特征及预后的相关性。方法选取2006年1月至2012年12月,福建医科大学附属第一医院初诊为骨肉瘤并接受手术切除术的72例患者为研究对象,收集经病理确诊的患者骨肉瘤石蜡标本,采用免疫组织化学(IHC)方法检测组织中PD-L1的表达,以PD-L1肿瘤细胞表达超过5%为阳性。同时收集患者的临床资料,进行统计学分析。结果在72例骨肉瘤组织样本中,22例(30.6%)呈PD-L1阳性。PD-L1的表达与患者年龄、性别、肿瘤位置以及肿瘤大小无相关性(P均>0.05)。单因素分析结果表明,患者的年龄、性别、肿瘤位置和肿瘤大小均与无进展生存(PFS)和总生存(OS)中位时间无关(P均>0.05);接受新辅助化疗患者的PFS中位时间(68.0个月,95%CI33.8~102.2个月)和OS中位时间(68.0个月,95%CI 34.6~101.4个月)均长于未接受新辅助化疗患者(22.0个月,95%CI 16.8~27.2个月;30.0个月,95%CI 20.6~39.4个月)(P均<0.05);PD-L1阳性骨肉瘤患者PFS中位时间(10.0个月,95%CI0.0~20.7个月)和OS中位时间(28.0个月,95%CI 11.1~45.0个月)均短于PD-L1阴性患者(44.0个月,95%CI21.0~67.0个月;52.0个月,95%CI31.4~72.6个月)(P均<0.05)。多因素分析结果显示:肿瘤大小是骨肉瘤患者PFS期的独立影响因子(P<0.05);是否接受新辅助化疗以及肿瘤是否为PD-L1阳性均是骨肉瘤患者PFS期和OS期的独立影响因子(P均<0.05)。结论骨肉瘤患者中部分肿瘤呈PD-L1阳性,是否接受新辅助化疗以及PD-L1是否阳性均是骨肉瘤患者预后不良的独立影响因子。阻断程序性死亡因子(PD-1)/PD-L1的免疫疗法可能是PD-L1阳性骨肉瘤患者可选择的新型治疗方式。