五宝胶囊对哮喘小鼠肺泡灌洗液中Th1/Th2、Th17/Treg失衡及趋化因子的影响

目的观察民族药五宝胶囊对卵清白蛋白(ovalbumin,OVA)所致的哮喘小鼠肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluids,BALF)中Th1/Th2、Th17/Treg失衡及趋化因子Eotaxin、IL-8、MCP-1的影响。方法BALB/c小鼠随机分为5组(正常组、模型组、地塞米松组、五宝胶囊低、高剂量组),采用OVA致敏和激发的方法复制哮喘模型。HE、PAS染色观察小鼠肺组织病理学变化,快速瑞氏-吉姆萨染色法观察BALF中各类炎症细胞数目,ELISA测定小鼠BALF中IFN-γ、IL-4、IL-17A、IL-10、Eotaxin、IL-8、MCP-1的含量。结果五宝胶囊能够显著减轻哮喘小鼠肺组织炎症浸润和黏液的分泌,降低各类炎症细胞数目及BALF中IL-4、IL-17A、Eotaxin、IL-8、MCP-1的生成(P<0. 01,P<0. 05),并能明显升高IFN-γ、IL-10的含量(P<0. 01,P<0. 05)。结论五宝胶囊可能通过调节BALF中Th1/Th2、Th17/Treg相关细胞因子平衡及抑制趋化因子Eotaxin、IL-8、MCP-1的生成来发挥防治哮喘的作用。

清热润燥口服液对哮喘小鼠气道炎症及气道黏液高分泌的影响

目的 探讨清热润燥口服液对哮喘小鼠气道黏液高分泌、肺泡灌洗液(BALF)中Treg/Th17相关细胞因子及趋化因子的影响。方法 将40只清洁级BALB/c雌性小鼠分为正常组、模型组、地塞米松(阳性药)组及清热润燥口服液低、高剂量组,每组8只,采用OVA复制哮喘小鼠模型。检测血清中IgE、OVA-IgE水平,取BALF进行白细胞总数计数和各类炎症细胞计数,取右肺中叶固定并进行PAS染色,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测BALF中气道黏液高分泌相关因子IL-13、IL-9、MUC5AC分泌,Treg/Th17相关因子IL-17A、IL-10水平,以及趋化因子IL-8、MCP-1水平。结果 清热润燥口服液高、低剂量组可延长哮喘小鼠引喘潜伏期,减少白细胞总数,降低哮喘小鼠气道黏液的分泌水平,改善BALF中IL-13、IL-9、MUC5AC、IL-17A、IL-10、IL-8、MCP-1水平和血清中IgE、OVA-IgE水平。结论 清热润燥口服液可能通过降低MUC5AC的分泌、调节Treg/Th17细胞失衡及趋化因子的水平来改善哮喘症状。

化痰活血方通过IL-13信号通路对哮喘小鼠肺组织MUC5AC分泌的影响

目的观察化痰活血方如何调控哮喘小鼠肺组织IL-13信号通路相关分子,干预MUC5AC的生成。方法建立小鼠哮喘模型(卵蛋白诱导),分别给予化痰活血方高、中、低剂量组(30、15、7.5 g/kg)。造模及药物干预结束后取小鼠肺组织,采用荧光定量PCR检测MUC5AC基因变化,免疫组化法检测IL-13/MUC5AC通路中各蛋白变化。结果化痰活血方能下调MUC5AC基因和蛋白表达(P<0.01),抑制哮喘小鼠肺组织中IL-13、IL-4Rα、Phospho-IL-4Rα、IL-13Rα1、Phospho-IL-13Rα1、Gab2、Phospho-Gab2蛋白表达(P<0.05,P<0.01),上调FOXA2蛋白表达(P<0.01)。结论化痰活血方可干预哮喘小鼠肺组织中IL-13通路上下游多个分子,抑制MUC5AC的生成。

清热润燥口服液对哮喘小鼠ILC2s上下游细胞因子的影响

目的通过清热润燥口服液干预卵清蛋白(OVA)致敏的哮喘小鼠,观察其对哮喘小鼠Ⅱ型固有淋巴细胞(ILC2s)数量及其上下游细胞因子的影响。方法将BALB/c小鼠(雌性)分为空白对照组、模型对照组、阳性对照组(地塞米松组,1 mg/(kg·d))、清热润燥口服液低、高(4.32、8.64 g/(kg·d))剂量组,共40只。使用OVA为致敏剂诱导哮喘小鼠模型,HE染色观察小鼠肺组织的病理改变;酶联免疫吸附(ELISA)测定检测小鼠肺泡灌洗液(BALF)中ILC2s上下游细胞因子Eotaxin、IL-25、IL-33、TSLP、IL-4、IL-5及IL-6含量;免疫组化法检测肺组织ILC2s上下游细胞因子IL-33和IL-5的表达;流式细胞术和免疫双荧光染色检测肺组织中ILC2s的数量及生成。结果与空白对照组比较,模型对照组小鼠出现肺组织炎性细胞浸润和支气管壁增厚的病理变化,BALF中ILC2s上下游细胞因子Eotaxin、IL-25、IL-33、TSLP、IL-4、IL-5及IL-6的含量升高(P<0.01),肺组织中ILC2s上下游细胞因子IL-33及IL-5的表达升高(P<0.01)、ILC2s的数量及生成增多(P<0.01)。与模型对照组比较,清热润燥口服液低高剂量明显改善哮喘小鼠肺组织病理损伤,降低BALF中ILC2s上下游细胞因子表达(P<0.01)、下调肺组织中ILC2s上下游细胞因子IL-33及IL-5的表达(P<0.05,P<0.01)和减少ILC2s的数量及生成(P<0.01)。结论清热润燥口服液可以降低OVA诱导的哮喘小鼠ILC2s的数量及其上下游细胞因子和下调肺组织中IL-33及IL-5的表达,进而起到防治哮喘的作用。

化痰活血方对哮喘小鼠肺泡灌洗液中趋化因子水平以及Th17相关细胞因子的影响

目的研究化痰活血方(Huatan Huoxue Fang,HTHXF)对卵清蛋白(Ovalbumin,OVA)诱导的哮喘小鼠肺泡灌洗液(Bronchoalveolar lavage fluids,BALF)中趋化因子Eotaxin、IL-8、MCP-1及Th17细胞分化调控相关因子IL-1β、IL-21和IL-23生成的影响。方法雌性BALB/c小鼠48只随机分为正常组(C)、模型组(M)、地塞米松组(D)、化痰活血方低剂量组(HL)、化痰活血方中剂量组(HM)和化痰活血方高剂量组(HH)共6组,8只/组。各组于实验第1,8,15天腹腔注射OVA混悬液致敏(正常组注射生理盐水),第21~27天雾化吸入OVA诱导哮喘小鼠模型。于实验第21~27天雾化激发前1h灌胃给予各组药物。实验第28天收取BALF,采用ELISA法测定哮喘小鼠BALF中Eotaxin、IL-8、MCP-1、IL-1β、IL-21和IL-23的水平。结果化痰活血方能明显降低哮喘小鼠BALF中Eotaxin、IL-8、MCP-1、IL-1β、IL-21和IL-23的水平。结论化痰活血方治疗哮喘的作用机制可能与抑制趋化因子的分泌以及调控Th17型免疫反应有关。