电离辐射对EL-4细胞的p53蛋白及其下游基因MDM2 mRNA和蛋白表达的影响

采用流式细胞术和 Ｎｏｒｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ杂交检测了 Ｘ射线照射后 ＥＬ－４细胞中 ｐ５３蛋 白及其下游基因 ＭＤＭ２ｍＲＮＡ和蛋白表达的变化，以探讨 Ｘ射线照射诱导 ＥＬ－４细胞 Ｇ１期 阻滞的分子机制。结果表明：经 ４Ｇｙ Ｘ射线照射后的 ＥＬ－４细胞， ｐ５３蛋白表达在照射后 ２ｈ增 高， ４ｈ达峰值，持续至照射后 ２４ｈ（ｐ＜ ０．０５～ ０．００１）； ＭＤＭ２蛋白的表达在照射后 ４～２４ｈ 明显升高（ｐ＜ ０．０５～ ０．０１）。进一步观察 Ｘ射线照射后 ＭＤＭ２ ｍＲＮＡ 水平的时程变化后 发现，在经 ４Ｇｙ Ｘ射线照射后的 ＥＬ－４细胞中， ＭＤＭ２ ｍＲＮＡ水平在照射后 １～８ｈ有增高 趋势，其中， ２ｈ明显升高（ｐ＜０．０１）。结果表明； Ｘ射线照射 ＥＬ－４细胞可通过 ｐ５３蛋白诱 导 ＭＤＭ２蛋白表达，从而限制 Ｇ１期阻滞的时间，使 ＤＮＡ损伤修复后的细胞重新进入细胞周 期。

电离辐射对小鼠胸腺细胞和脾细胞p53基因mRNA和蛋白表达的影响

采用流式细胞术和 Northern blot法检测了不同剂量 X射线全身照射后 ,小鼠胸腺细胞和脾细胞中 p53基因 m RNA和蛋白表达的变化。结果表明 ,2 .0 Gy X射线全身照射后 ,小鼠胸腺细胞 p53阳性细胞百分数与对照相比 ,在照后 1h开始升高 ,8h达最高 ,以后逐渐下降。不同剂量 X射线照射后 ,小鼠胸腺细胞和脾细胞中 p53基因 m RNA水平的观测结果表明 ,75m Gy及 2 .0 Gy全身照射后 1～ 4 8h,小鼠胸腺细胞和脾细胞中 p53m RNA水平均未见明显的变化 ;0 .5～ 6.0 Gy X射线全身照射后 4 h,小鼠胸腺细胞和脾细胞中 p53m RNA水平亦未见明显的改变。结果提示 ,X射线全身照射可诱导小鼠淋巴细胞 p53蛋白表达 ,其 p53蛋白表达增加是通过转录后机制实现的。

肋间神经阻滞复合全身麻醉对胸腔镜手术患者血流动力学的影响

目的探讨肋间神经阻滞复合全身麻醉(INB)对胸腔镜手术患者血流动力学的影响。方法选择2014年1月-2016年1月该院进行胸腔镜肺叶切除的患者100例,按照完全随机分组原则分为对照组和实验组。对照组患者接受单纯静脉诱导、静-吸复合维持全身麻醉,实验组患者接受INB。分别评估两组患者术后的视觉模拟疼痛得分(VAS)和血流动力学指标的变化,比较治疗前后患者免疫功能变化。其中血流动力学指标包括心率(HR)、收缩压(SBP)和脉搏氧饱和度(Sp O2),免疫功能指标包括血清中T细胞亚群CD4+、CD4+/CD8+含量。结果术后不同时间点实验组患者VAS得分均明显小于对照组患者(P<0.05)。术毕时对照组患者SBP和HR明显高于实验组患者(P<0.05)。治疗后实验组患者的CD4+、CD4+/CD8+均明显高于对照组(P<0.05)。结论 INB可以更好地控制胸腔镜患者术后的心血管反应,减轻对患者免疫功能的抑制,值得临床推广。

小剂量辐射抑制肿瘤细胞播散的机理研究

观察了静脉注入肿瘤细胞前24h，75mGyX射线全身照射对小鼠免疫功能的影响。结果表明照射组小鼠胸腺S期细胞百分数于照射后4d，胸腺CD3+细胞百分数于照射后2、8d，脾细胞IL－2和γIFN分泌于照射后4d，脾脏NK细胞活性于照射后2、4、6和8d均较假照射组明显增高（P＜0．05～0．01）。提示小剂量辐射增强机体免疫功能可能与其抑制肿瘤细胞播散有关。

p53及其下游基因在电离辐射诱导小鼠胸腺细胞G_1期阻滞中的作用

采用流式细胞术和Northernblot检测了X射线全身照射后的昆明系小白鼠胸腺细胞的细胞周期、p53及其下游基因表达的变化。结果表明：（1）2GyX射线全身照射后4h，小鼠胸腺细胞G1期细胞百分数明显高于假照射组，24h达峰值；持续至照射后48h；（2）2Gy照射后p53蛋白表达在照射后1～8h明显增高，p21蛋白表达在照射后4～48h明显增高，而GADD45蛋白表达未见明显变化；（3）2GyX射线照射后小鼠胸腺细胞WAF1基因转录从照射后1h开始升高，照射后2h达峰值，持续至照射后24h，48h恢复至正常水平。照射后GADD45基因转录无明显变化。结果提示，2GyX射线全身照射可诱导小鼠胸腺细胞G1期阻滞，p53－WAF1通路在电离辐射诱导小鼠胸腺细胞G1期阻滞中起重要作用。

[Ca^(2+)]i在低剂量辐射诱导脾细胞免疫适应性反应中的作用

为探讨胞浆内游离钙离子浓度 ( [Ca2 +]i)在低剂量辐射诱导脾细胞免疫适应性反应中的作用 ,本文采用 Fura- 2 /AM双波长荧光测定法观察了不同剂量 X射线全身照射后小鼠脾细胞内 [Ca2 +]i的变化及低剂量辐射诱导的适应性反应。结果表明 ,小鼠接受 1.0～ 6.0 Gy X射线全身照射后 2 4 h,脾细胞内[Ca2 +]i呈剂量依赖性下降 ( p <0 .0 5～ p <0 .0 1) ,而小鼠接受 0 .0 75～ 0 .2 Gy较低剂量 X射线全身照射后 2 4 h,脾细胞内 [Ca2 +]i却明显高于假照射组 ( p<0 .0 1)。同时证实 ,预先给予 0 .0 75Gy低剂量 X射线全身照射可减轻其后 2 .0 Gy X射线全身照射对脾细胞内 [Ca2 +]i的抑制作用。提示低剂量辐射诱导脾细胞内 [Ca2 +]i的升高可能在低剂量辐射诱导脾细胞免疫适应性反应中起重要作用。

用Fura-2双波长荧光法测定低剂量电离辐射对小鼠脾细胞游离钙的影响

目的：探讨低剂量电离辐射免疫增强效应的机理。方法：采用Ｆｕｒａ－２／ＡＭ 双波长荧光测定法研究了低剂量电离辐射全身照射后小鼠脾Ｔ淋巴细胞内游离钙离子浓度（〔Ｃａ２＋ 〕ｉ）对次佳浓度Ｃｏｎ Ａ（５ ｍ ｇ／Ｌ）反应性的变化。结果：静息状态下的小鼠脾淋巴细胞内游离钙离子浓度为９５．０±１４．０ ｎｍ ｏｌ／Ｌ，ＣｏｎＡ 可使小鼠脾Ｔ淋巴细胞内游离钙离子浓度增加６９．４±７．６ ｎｍ ｏｌ／Ｌ，上升至峰值时间为７９．２ ｓ。７５、１００ 和２００ ｍ Ｇｙ 全身照射后２４ ｈ，Ｃｏｎ Ａ 诱导的小鼠脾Ｔ淋巴细胞内游离钙离子动员明显高于假照射组（Ｐ＜ ０．０１）。结论：低剂量电离辐射的免疫兴奋效应与其增强淋巴细胞内〔Ｃａ２＋

电离辐射对小鼠胸腺和脾细胞MDM2 mRNA和蛋白表达的影响

目的 :探讨 X射线全身照射诱导小鼠胸腺和脾细胞 G1期阻滞的分子机制。方法 :采用流式细胞术和斑点印迹杂交检测 X射线全身照射后昆明系小鼠胸腺和脾细胞中 MDM2 m RNA和蛋白表达的变化。结果 :2 Gy X射线全身照射后 4～ 8h小鼠胸腺细胞 MDM2蛋白的表达明显升高(P<0 .0 5)。时效和量效观察发现 ,无论是 75m Gy还是 2 Gy X射线全身照射 ,小鼠胸腺和脾细胞中 MDM2 m RNA水平在照后 1～ 48h均未见明显变化 ;0 .5～ 6Gy X射线全身照射后 4h,胸腺和脾细胞中 MDM2 m RNA转录亦未见显著改变。结论 :X射线全身照射可诱导小鼠淋巴细胞MDM2蛋白表达 ,从而限制 G1期阻滞的时间 ,使

p53基因状态与辐射诱导的G_1期阻滞

Ｇ１期阻滞是细胞对ＤＮＡ损伤作出的一种保护性反应，它与ｐ５３基因状态密切相关。本文对Ｇ１期阻滞的发生机制、生物学意义及ｐ５３突变对辐射诱导Ｇ１期阻滞的影响进行综述。

腹部神经阻滞联合静吸复合全麻在老年腹腔镜疝修补术中的应用

目的探讨腹部神经阻滞联合静吸复合全麻在老年腹腔镜疝修补术中的应用效果。方法回顾性分析于医院行腹腔镜疝修补术的90例老年患者资料,其中45例行静吸复合全麻者为对照组;另45例采用静吸复合全麻联合腹部神经阻滞者为观察组。记录两组不同时点时平均动脉压(MAP)、心率(HR)、疼痛程度及麻醉不良反应。结果观察组麻醉后10 min、手术开始时MAP明显高于对照组,HR明显低于对照组,P<0.05;其余各时点时MAP和HR无明显差异,P>0.05。观察组术后不同时点时VAS评分明显低于对照组,P<0.05。观察组不良反应发生率明显低于对照组,P<0.05。结论腹部神经阻滞联合静吸复合全麻在老年腹腔镜疝修补术中具有较好的麻醉效果,且对患者生命体征的影响较小,镇痛效果明显且安全,因此具有推荐价值。

4GyX射线照射对EL-4细胞cyclin B1及cdc2 mRNA水平的影响

采用流式细胞术和半定量 RT-PCR 的方法分别检测 4Gy X 射线照射后 EL-4 细胞不同细胞周期时相和EL-4 细胞内 cyclin B1 及 cdc2 mRNA 水平的时程变化,以探讨 X 射线照射诱导 EL-4 细胞 G2 期阻滞的分子调控机制。 结果表明,4Gy X 射线照射 EL-4 细胞后 2h,G2期细胞开始明显增多,4—8h 达峰值(p<0.001)。EL-4 细胞内 cyclin B1 mRNA 水平于照射后 1h 开始下降,24h 降至最低值,为假照组的 57.7 %,72h 恢复至正常水平。EL-4 细胞中 cdc2 mRNA 水平于照射后 12h 开始降低,24—48h 降至最低水平,分别为假照组的59.2% 和 58.9%,72h 恢复至假照组水平。结果提示, 4Gy X 射线照射可诱导 EL-4 细胞 cyclin B1 及 cdc2 mRNA水平明显下降,直接导致 MPF 活性减少是引发 G2 期阻滞的关键。

电离辐射诱导EL-4淋巴瘤细胞G_1期阻滞及相关蛋白的表达

探讨X射线诱导EL 1细胞G1期阻滞及相关蛋白的表达。采用PI荧光标记 ,流式细胞术检测细胞周期的变化。用单克隆抗体免疫荧光标记 ,流式细胞术检测蛋白表达的变化。结果表明 ,2 0Gy和 4 0Gy照射后 12 72h ,G1期EL 4细胞百分数显著高于假照射组 ( p <0 0 5- p <0 0 0 1)。 4 0Gy照射后EL 4细胞 p53蛋白表达从照射后 2h开始明显增高 ,持续至照射后2 4h ( p <0 0 5- p <0 0 0 1) ;p2 1蛋白表达在照射后 2h开始明显增高 ,持续至照射后 4 8h ( p <0 0 5- p <0 0 0 1) ;GADD4 5蛋白表达在照射后 2h开始明显增高 ,持续至照射后 4 8h ( p <0 0 5- p <0 0 0 1) ;MDM 2蛋白表达在照射后 4h开始明显增高 ,持续至照射后 2 4h ( p <0 0 5- p <0 0 0 1)。结果提示 ,中等剂量X射线照射可诱导EL 4细胞G1期阻滞。p53、p2 1和GADD4 5蛋白表达在电离辐射诱导EL

低剂量 X 射线全身照射诱导脾淋巴细胞内[ Ca^(2+) ]_i 及 C D71 表达的适应性反应

为 了观察低 剂量 Ｘ 射 线全身照 射诱导脾 淋巴细 胞内［ Ｃａ２ ＋ ］ ｉ 及 Ｃ Ｄ７１ 表 达的 适应 性反应。采用 Ｆｕｒａ２ 负载，双 波长荧 光测定法 检测 细胞 内［ Ｃａ２ ＋ ］ ｉ 浓 度。 采用 单克 隆 抗体 免 疫荧 光标记，流 式细胞术 检测淋巴 细胞 Ｃ Ｄ７ １ 表达。发现 ００７５ Ｇｙ 低 剂量 预照 射 能明 显减 轻 其后 ２０ Ｇｙ 攻击剂量 照射对 细 胞 内［ Ｃａ２ ＋ ］ ｉ 及 Ｃ Ｄ７ １ 的 抑 制 作 用 。低 剂 量 辐 射 能诱 导 脾 淋 巴 细 胞［ Ｃａ２ ＋ ］ ｉ 及 Ｃ Ｄ７ １ 表达的适 应性反 应。此变 化可能是 低剂量 辐射诱导 Ｔ 淋巴细胞 免疫适 应性反 应的 重要 机制之一。

X射线全身照射对小鼠胸腺细胞p53、p21、GADD45及MDM2蛋白表达的影响

目的：观察电离辐射全身照射对小鼠胸腺细胞ｐ５３、ｐ２１、ＧＡＤＤ４５ 及ＭＤＭ２ 蛋白表达的影响。方法：采用间接免疫荧光标记，流式细胞术检测蛋白表达的变化。结果：２ Ｇｙ Ｘ射线照射后１～８ ｈ ｐ５３ 蛋白表达显著增高；照射后４～４８ ｈ ｐ２１ 蛋白表达显著增高；ＭＤＭ２ 蛋白在照后４ ｈ 及８ ｈ 显著增高；而ＧＡＤＤ４５ 蛋白表达在照后１～４８ ｈ 内无明显变化。结论：电离辐射可诱导胸腺细胞ｐ５３、ｐ２１ 及ＭＤＭ２ 蛋白表达增高。此结果将对辐射诱导胸腺细胞Ｇ１ 期阻滞的分子通路研究有重要意义。

低剂量X射线对荷瘤小鼠局部大剂量照射抑瘤作用的影响

目的：探讨低剂量全身照射对局部肿瘤大剂量照射抑癌作用的影响。方法：采用昆明系小鼠皮下接种S180腹水肉瘤细胞为实验肿瘤模型；荷瘤小鼠局部10Gy或2．5Gy×4次X射线照射前12h或24h接受50，75，100和150mGy全身照射，观察局部照后21d的肿瘤生长百分数。结果：50，75和100mGy全身照射可明显增强局部肿瘤大剂量照射的抑瘤效果；局部照前12h比24h接受低剂量照射的增强效应更明显；局部肿瘤分割剂量照射比单次大剂量照射前的低剂量全身照射的增强效应更显著。结论：低剂量全身照射可增强局部肿瘤大剂量照射的抑癌作用，其增强效应的基本规律可能具有临床意义。

不同麻醉方法对行肝切除术患者缺血再灌注损伤的影响

目的探究并分析不同麻醉方法对行肝切除术患者缺血再灌注损伤的影响。方法选取2014年1月~2016年1月收治的40例肝切除术患者,按照随机数字表法将其分为观察组和对照组,每组20例。对照组采用七氟烷和舒芬太尼进行维持,观察组患者采用异丙酚和瑞芬太尼进行维持。观察并记录下两组患者一般情况以及肝门阻断前、阻断时、阻断30 min、阻断60 min、术后1 d血流动力学情况(包括心率、中心静脉压和平均动脉压)和ALT(谷草转氨酶)、γ-GGT(γ-谷氨酰转移酶)、MDA(丙二醛)、T-SOD(总超氧化物歧化酶)水平。结果两组患者一般情况、肝门阻断前后HR、MAP、CVP等血流动力学参数比较组间差异无统计学意义(P>0.05)。重复测量方差分析结果显示两组患者肝门阻断前后ALT浓度比较组间差异有统计学意义(P<0.05),肝门阻断时患者ALT浓度有所升高,随着时间推移,两组患者ALT浓度逐渐下降,而术后1 d患者ALT浓度明显较阻断前升高,但观察组患者ALT浓度明显小于对照组,组间差异具有统计学意义(P<0.05)。两组患者肝门阻断前后γ-GGT浓度比较组间差异有统计学意义(P<0.05),观察组患者肝门阻断后γ-GGT浓度有所降低,阻断后60 min明显低于阻断前,组间差异有统计学意义(P<0.05),而术后1d则有所回升,与阻断前γ-GGT浓度相比组间差异无统计学意义(P>0.05)。对照组患者肝门阻断后γ-GGT浓度无明显降低,而术后1 d与阻断前相比明显升高,组间差异有统计学意义(P<0.05)。两组患者肝门阻断前后MDA浓度比较差异明显,两组患者肝门阻断后MDA浓度有所升高,术后1 d达到最高,但观察组患者升高水平明显低于对照组,组间差异有统计学意义(P<0.05)。两组患者肝门阻断后T-SOD浓度有所降低,但观察组患者降低水平明显小于对照组,组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论异丙酚-瑞芬太尼维持能有效减少肝切除术患者肝门阻断后缺血再灌注损伤,且相对于七氟烷-舒芬太尼维持,并不增加患者血流动力学波动,值得临床推广。

右美托咪定雾化或滴鼻在儿童镇静中的效果

目的分析右美托咪定雾化或滴鼻在儿童镇静中的应用效果。方法于2016年1月至2018年6月收集浙江大学舟山医院手术治疗的120例患儿,分为观察组(n=60)和对照组(n=60)。观察组经鼻给予右美托咪定注射液(2μg/kg),其中滴鼻给药的患儿作为A组(n=30),雾化给药的患儿作为B组(n=30);对照组口服右美托咪定(2μg/kg)。记录并比较各组患儿镇静程度、用药接受程度、平均动脉压(MAP)、心率(HR)、血氧饱和度(SPO2)、低氧血症、入睡时间、苏醒时间、术后躁动、不良反应。结果①A组和B组Funk各项分值均较对照组高(t=4.47~5.23,均P<0.05)。②对照组用药接受较差者为20.00%,A组为53.33%,B组为40.00%,A组高于B组和对照组(χ^2值分别为4.24、20.32,均P<0.05),B组高于对照组(χ^2=13.95,P<0.05)。③用药前及用药后三组患者MAP、HR、SPO2及低氧血症发生率比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。④A组、B组入睡时间较对照组更短(t值分别为5.12、5.97,均P<0.05)。A组1例患儿出现SPO2<95%,但未发生明显不良反应,1例患儿出现恶心呕吐;B组1例患儿出现恶心呕吐;对照组1例患儿出现恶心呕吐,1例出现嗜睡。结论2μg/kg右美托咪定滴鼻和2μg/kg右美托咪定雾化吸入镇静效果均较2μg/kg右美托咪定口服效果好,安全性高,但口服的接受程度高,经鼻给药更易引起嗜睡。

在腹腔镜胆囊切除术中瑞芬太尼复合七氟烷的麻醉效果观察及对血流动力学的影响

随着微创外科的不断发展,腹腔镜胆囊切除术正逐渐发展成为一种门诊手术,因此,其对于围术期的麻醉处理不仅要安全、有效,还要求作用和苏醒迅速,以提高工作效率和麻醉的安全性。2008年12月-2009年12月我院将瑞芬太尼复合七氟烷应用于腹腔镜胆囊切除术中，取得了良好效果，现将结果报告如下。

七氟醚和丙泊酚用于麻醉维持对患者脑氧代谢及认知功能的影响

目的 探讨七氟醚和丙泊酚用于麻醉维持对患者脑氧代谢及认知功能的影响.方法 选取2014年8月-2015年8月舟山医院收治的急症创伤患者70例,采用数字随机法将其分为对照组和观察组,每组35例.其中对照组术中麻醉维持采用丙泊酚;观察组术中麻醉维持采用七氟醚.比较2组在麻醉维持过程中不同时间点脑氧代谢变化情况;且对患者麻醉前后MMSE评分、TMT完成时间以及苏醒后不良反应发生率进行比较.结果 对照组与观察组在诱导后2min（T2）,插管后2min（T3）SjvO2值较麻醉前（T1）明显升高,Da-jvO2与COER值则较T1时明显降低,且差异均具有统计学意义（P〈0.05）.2组在各时段组间差异无统计学意义.对照组术后TMT完成时间延长,MMSE评分降低,与术前相比差异具有统计学意义（P〈0.05）.观察组患者TMT完成时间以及MMSE评分手术前后无显著性差异.2组不良反应发生率差异不具有统计学意义.术后对照组患者呼唤睁眼时间,定向力恢复时间以及肛门排气时间均晚于观察组,且差异具有统计学意义（P〈0.05）.结论 七氟醚和丙泊酚均能维持手术期间脑氧供需平衡,七氟烷对患者术后认知功能改变的影响减少.