玉米RAPD程序优化研究及其初步探讨

本文以黄早四、汶黄、Mo17等我国主要玉米自交系为材料,使用国产PCR仪,对玉米RAPD分析中PCR过程的DNA模板浓度,扩增反应的循环数进行了研究,并针对国产PCR扩增仪(PCR—90AD)的特点,确定了DNA变性,引物和模板DNA结合,引物沿模板延伸3个步骤的时间。实验结果表明玉米PCR过程使用10～15ng的模板DNA,在94℃模板变性时间1分30秒,36℃引物退火2分钟,72℃引物延伸2分30秒,扩增循环35～40周期条件下扩增效果较好,使用这一RAPD程序研究不同自交系间遗传差异,结果与系谱法基本一致,而同一自交系的10个单株之间,RAPD带型是一致的。本实验建立了适合玉米RAPD分析的PCR程序及条件,为RAPD分析法应用于玉米的遗传研究打下了良好的基础。

抗阿特拉津(Atrazine)转基因大豆植株的田间检测表现

地面(出苗前)或植株(幼苗分枝期)喷施Atrazine液后,从田间观测及考种结果看,未导入抗性基因的大豆对照株受害严重,或枯死或严重减产;导入抗性基因的大豆植株后代F_4、F_5代基本不受影响,单株产量与未喷液的对照株相近或略高。这显示了导入的抗性基因对Atrazine的抵抗作用。通过喷施Atrazine已筛选出了多个抗性较强的株系,有望从中进一步筛选出抗性稳定的株系,用到大田生产。

RAPD技术在玉米纯系离子束诱变材料中的初步应用

用ＲＡＰＤ技术检测经离子束处理过的玉米纯系Ｍ０的ＤＮＡ，发现玉米纯系Ｍ０在１５８４～１３３０ｂｐ之间的２０９２基因组ＤＮＡ发生了变化。认为运用ＲＡＰＤ分析经离子束处理的材料，是检测材料基因组ＤＮＡ发生诱变情况的一种简便方法。

玉米自交系杂种优势类群与杂优模式构建的初步研究

以15个来源不同的玉米自交系及其105个双列杂交组合为材料,通过RAPD分析技术及试验材料的多点田间鉴定,初步研究了玉米自交系杂种优势类群的划分和利用模式的构建。根据RAPD分类与杂种优势分类、系谱追踪的比较研究,认为RAPD技术在玉米自交系杂种优势群划分上应用是可行的。通过对杂优类群间F_1产量,杂种优势与配合力的测定结果的综合分析,提出了7个杂种优势利用模式。

两种凝胶电泳系统对SSR标记多态性的影响

利用 35个SSR引物和 14个玉米自交系直接比较了 3%Metaphor琼脂糖凝胶和 12 %聚丙烯酰胺凝胶电泳对SSR位点多态性水平的影响。结果表明 ,两种凝胶系统检测出的等位基因数目和基因多态性水平存在显著差异 ,12 %聚丙烯酰胺凝胶在区分微小差异片段能力上明显高于 3%Metaphor琼脂糖凝胶。另一方面在两种电泳检测系统下 ,14个自交系之间的遗传相似系数相关性 (r =0 516)达到了极显著水平 (P <0 0 1)。在 10个具有最大多态性信息量的SSR引物中 ,8个在两种凝胶系统中保持相同。利用 8个引物可以对供试自交系进行初步鉴定。笔者认为 ,3%Metaphor琼脂糖凝胶电泳比较适合在遗传作图或基因定位研究中应用 ;而在品种指纹图谱分析或遗传多样性研究中 ,应采用 12

采用RAPD分子标记、表型和杂种优势聚类分析法对玉米自交系类群的划分

以１５个我国生产上常用的玉米自交系为试验材料，采用表型性状、杂种优势和ＲＡＰＤ分子标记三种聚类分析方法对玉米自交系的组群划分进行了比较研究。结果表明，表型聚类因以表型性状为依据，受环境影响较大，其聚类结果与实际系谱来源出入较大。与表型性状聚类相比，杂种优势聚类与已知系谱来源更接近。ＲＡＰＤ分子标记，具有标记性状数量较多，不受生长发育时期限制和环境影响，无功能性表型效应，无上位及多效作用等诸多优点，其聚类结果与已知系谱符合率较高。

玉米自交系遗传变异的RFLP分析(英文)

利用RFLP标记研究了 13个玉米 (ZeamaysL .)自交系的遗传变异。从 30对探针 /酶组合中筛选出杂交带型清晰、稳定、重复性好的 2 4对组合 ,在 13个自交系中获得 85个等位基因杂交片段 ,平均每个位点为 3.3条 ,平均多态性指数为 0 .499。 13个自交系之间的遗传相似系数为 0 .5 2 3～ 0 .80 2 ,平均为 0 .6 49。UPGMA聚类分析表明 ,供试自交系共分为 5个类群 ,分群结果与其系谱关系基本吻合 ;表明利用RFLP标记可以研究玉米自交系之间的遗传关系 ,并将无系谱记载的自交系划分到相应类群中。

玉米抗病虫基因的染色体定位研究进展

分子标记技术的发展为目标基因定位提供了新手段。本文在McMullen和Simcox(1 995 )的研究基础上综述了近几年来玉米抗病虫基因的分子标记定位最新研究结果 ,发现这些抗性基因或数量性状位点 (QTL)均不同程度地连锁在一起 ,聚集成几群 ,位于染色体的特定区域。由于在同一聚群内经常发现不同抗性基因对不同病原菌 (虫 )的抗性反应 ,因此这些抗性基因间的功能关系目前还不清楚。研究抗病虫基因或OTL的染色体位置 ,发现许多抗性位点的产生与染色体片段重复有关。为应付快速演化的病原菌 (虫 )侵染 ,存在对新小种具有专化抗性的基因群是必要的。染色体上的特定区域在某一时期可能快速进化 ,以获得足够力量来抵抗共演化的病原菌 (虫 )的侵染。玉米抗病虫基因在染色体上聚群存在 。

玉米自交系RAPD分析中的样品选择

近年来分子标记技术在我国农业科研中的应用已受到了广泛的重视。分子标记样品的代表性如何将对研究结果产生影响，因此，研究分子标记的取样问题具有一定的现实意义。本文对以玉米自交系为样品，进行分子标记分析时的取样技术进行了探讨。在对玉米自交系中黄204基因组DNA进行RAPD分析时，同一引物8个单株及其混合样品的扩增结果中，单株6在564bp处比其它单株多一条较强的谱带，而8个单株的混合样品的扩增结果中也有一条同样的谱带。而丹340、旅9、5003等其它自交系的10个单株及其混合样品的RAPD谱带是一致的。说明中黄204单株6的遗传背景与其它单株不同，不能代表中黄204，如用它们的混合样品进行RAPD分析，就会得出错误的结果。可以看出，分子标记分析中的取样技术是检测结果可靠性不可忽视的重要因素之一。

抗atrazine转基因大豆的抗性遗传及某些生理、农艺性状

抗ａｔｒａｚｉｎｅ基因导入大豆植株后不仅在Ｆ１代获表达，且已遗传到后代（１９９年已至Ｆ７代）。通过正交与反交试验证明，其Ｆ１代植株对ａｔｒａｚｉｎｅ的抗性性状均与其母本性状一致，即该性状为母系遗传，为细胞质基因，位于叶绿体ＤＮＡ上。通过导入抗性基因株与未导入抗性基因的对照株的光合速率测定、成分分析及农艺性状（株高、百粒重、单株产量）测定表明，两类植株间无明显差异。在喷施ａｔｒａｚｉｎｅ情况下，转基因株能表现出抗性。

应用RAPD分子标记识别苜蓿种群关系

应用ＲＡＰＤ分子标记识别苜蓿种群关系傅骏骅Ｋ．Ｐ．Ｐａｕｌｓ（中国农业科学院作物育种栽培研究所北京１０００８１）（加拿大圭尔夫大学作物系）１９９０年美国Ｊ．Ｇ．Ｋ．Ｗｉｌｌｉａｍｓ和Ｊ．Ｗｅｌｓｈ等先后报道了ＰＣＲ技术──随机扩增多态ＤＮＡ（Ｒａｎｄ...

利用RFLP和SSR标记划分玉米自交系杂种优势群的研究

利用 RFL P和 SSR标记对 2 9个玉米自交系进行杂种优势群划分 ,筛选出 56个多态性 RFL P探针酶组合 ,6 6对多态性 SSR引物 ,分别在供试材料中检测到 187个和 2 32个等位基因变异。两种方法比较表明 ,SSR标记的平均多态性信息量 (PIC,0 .54)高于 RFLP(0 .4 2 ) ;但对供试材料的遗传多样性评价基本一致 ,平均遗传相似系数 (GS)分别为 0 .6 4和 0 .6 2。综合 RFL P和 SSR分析结果进行聚类分析 ,将供试材料划分为四平头 ,旅大红骨 ,L SC,BSSS和 PA五个类群 ,划分结果与系谱分析基本一致 ,并把系谱来源不清的种质划分到相应的杂种优势群。其中 PN群的确认 ,进一步完善了我国玉米种质杂种优势群的基本框架 ,为育种实践提供了有价值的信息。

利用 RFLP、SSR、AFLP和 RAPD标记分析玉米自交系遗传多样性的比较研究

利用 ＲＦＬＰ、ＳＳＲ．ＡＦＬＰ和ＲＡＰＤ ４种分子标记方法研究了 １５个玉米（Ｚｅａ ｍａｙｓ Ｌ．）自交系的遗传多样性，同时对４种标记系统进行比较。在供试材料中筛选到具多态性的ＲＦＬＰ探针酶组合５６个，６６对ＳＳＲ引物，２０个ＲＡＰＤ引物和９个ＡＦＬＰ引物组合，分别检测到多态性带１６７、２０１、８７和１０８条。ＳＳＲ标记位点的平均多态性信息量（ＰＩＣ）最大（０．５４），ＡＦＬＰ标记位点最小（０．３６），但ＡＦＬＰ标记具有最高的多态性检测效率（Ａｉ，３２．２）。４种分子标记所得遗传相似系数相关性显著，比较相关系数表明 ＲＡＰＤ可靠性较低。依据 ４种分子标记结果将 １５个供试自交系划分为塘四平头、旅大红骨、兰卡斯特、瑞德和ＰＮ共５个类群，与系谱分析基本一致。认为ＳＳＲ和ＲＦＬＰ两种分子标记方法适合进行玉米种质遗传多样性的研究。