Sec62对结直肠癌细胞的增殖作用及其潜在机制

目的探索Sec62对结直肠癌细胞的增殖作用及其潜在机制。方法应用Western blotting技术在结直肠癌细胞和永生化正常结肠上皮细胞中检测Sec62蛋白的表达。依据结直肠癌细胞中Sec62蛋白的表达情况,选取两株结直肠癌细胞分别构建Sec62过表达稳定转染细胞及其对照(NC:过表达阴性对照组,以过表达组阴性对照病毒转染细胞;OE:过表达组,以过表达慢病毒转染细胞)和Sec62敲减稳定转染细胞及其对照(shNC:敲减阴性对照组,以敲减组阴性对照病毒转染细胞;KD-1:敲减组1,以敲减慢病毒1转染细胞;KD-2:敲减组2,以敲减慢病毒2转染细胞)。采用CCK-8、平板克隆形成等增殖相关体外实验检测稳定转染组及其对照组细胞的增殖能力。构建裸鼠皮下移植瘤模型评估Sec62对结直肠癌细胞体内增殖能力的影响,将24只雄性BALB/c裸鼠随机分为NC、OE、shNC、KD-14组,每组6只,将稳定转染组及其对照组细胞分别接种于裸鼠腹股沟处,5周后处死裸鼠,观察各组裸鼠皮下成瘤形成情况。采用流式细胞术检测稳定转染组及其对照组细胞周期变化。利用Western blotting检测稳定转染组及其对照组细胞周期相关蛋白Cyclin D1、CDK4和PCNA的表达。结果Western blotting发现Sec62在结直肠癌细胞中的表达显著高于正常结肠上皮细胞(P<0.01)。CCK-8和平板克隆实验结果均表明与NC细胞相比,OE细胞的增殖能力增强(P<0.05),而与shNC相比,KD-1和KD-2细胞的增殖能力明显降低(P<0.05)。裸鼠皮下移植瘤模型显示Sec62过表达细胞种植后形成的皮下肿瘤质量显著高于NC(P<0.01),而Sec62敲减(KD-1)细胞种植后裸鼠皮下成瘤的质量低于shNC(P<0.01)。流式细胞术检测细胞周期的结果显示,Sec62表达升高后细胞周期进程加快,而Sec62表达被抑制后细胞周期停滞。Western blotting结果表明,与NC细胞相比,OE细胞中Cyclin D1、CDK4和PCNA蛋白表达水平升高,而与shNC细胞相比,KD-1和KD-2细胞中Cyclin D1、CDK4和PCNA蛋白表达水平降低。结论Sec62可通过调控结直肠癌细胞的细胞周期影响结直肠癌的体内外增殖,从而在结直肠癌细胞的恶性增殖中发挥促癌作用。

清柏溃结汤对结肠炎小鼠肠道黏膜通透性的影响

目的 探讨清柏溃结汤对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的溃疡性结肠炎(UC)小鼠肠黏膜通透性的影响及其可能的机制.方法 将30只小鼠随机分为空白对照组、清柏溃结汤预防组和结肠炎模型组.采用2.5% DSS制作C57B/L小鼠UC模型.清柏溃结汤预防组和结肠炎模型组予饮用DSS造模,同时清柏溃结汤预防组予清柏溃结汤(0.02 ml/g体质量),结肠炎模型组和空白对照组给予等量生理盐水,每2天灌肠1次.每日记录小鼠体质量、粪便、精神状态等一般活动情况.实验第24天予异硫氰酸荧光素-D(FITC-D)灌胃后再处死小鼠,检测血清FITC-D荧光值;观察小鼠结肠病理组织学变化;检测杯状细胞阳性颗粒积分吸光度A;免疫组化检测MMP-9表达水平,并进行统计学分析.结果 与结肠炎模型组相比,清柏溃结汤预防组小鼠的疾病活动指数(DAI)(3.50±0.50比4.75±0.43,P< 0.05)、血清FITC-D(0.27±0.10比0.52±0.04,P<0.01)、结肠组织病理评分(HI)(2.67±0.47比6.00± 0.82,P<0.01)和MMP-9免疫组化评分(3.00± 1.00比7.50± 1.50,P<0.01)均显著降低,杯状细胞阳性颗粒积分吸光度A(5284.40± 294.20比2612.21 ±377.10,P<0.01)显著升高.结论 清柏溃结汤能改善结肠炎小鼠疾病活动度和结肠组织损伤,降低肠黏膜通透性.清柏溃结汤对结肠的保护作用可能和抑制炎症因子,减少杯状细胞的损伤,从而改善肠黏膜通透性有关.

克罗恩病合并再生障碍性贫血死亡四例分析

检索并分析空军军医大学附属西京消化病医院IBD数据库2006年至2019年1月的数据,共检索到CD合并再生障碍性贫血死亡病例4例,其中1例因小肠穿孔死亡,1例因病情进展自杀死亡,2例因疾病消耗和进展死亡。CD合并再生障碍性贫血是一种罕见但十分严重的临床综合征,发病机制尚未明确,经典治疗方案效果欠佳,患者预后差、死亡率高,异体造血干细胞移植可能有效。