亚硫酸氢盐测序法检测小鼠胚胎Oct4启动子区甲基化

应用亚硫酸氢盐测序技术,以昆明小白鼠几种不同时期体内胚为研究对象,对其单拷贝基因Oct4启动子区进行甲基化检测。基因组经低熔点琼脂糖包埋、亚硫酸氢盐修饰后,运用巢式PCR对处理后的DNA进行两轮扩增,扩增产物通过琼脂糖凝胶电泳检测和单克隆测序进行分析。结果表明,亚硫酸氢盐测序法是一项敏感而有效的DNA甲基化检测手段。

CT仿真支气管内镜的临床应用评估

目的 评价CT仿真支气管内镜 (CTVB)的临床应用价值及限度。材料与方法 使用CTVB对 44例患者行气管、支气管树内表面成像 ,全部病例均有纤维支气管镜 (纤支镜 )对照并经病理证实。结果 CTVB对腔内病变诊断的敏感性为 75 .4% ,其特异性较低 ,假阳性率高。结论 CTVB作为一种无创诊断手段 。

重组人干扰素α2b注射液稳定性研究

目的 考察重组人干扰素α2b注射液的稳定性.方法 按照＆lt;中国药典＆gt;2010年三部的方法进行检测,其中干扰素蛋白纯度采用高效液相法测定,光照试验、振摇试验、冻融试验、加速试验、低温长期留样观察方法均采用药典方法.结果 除了冻融试验中反复冻融8次后和加速试验中（37±2）℃放置3个月,干扰素α2b效价下降至理论值的80%以下,其余试验抽样点均符合质量标准的规定.结论 该品在避光,2~8 ℃密闭的储存条件下性质稳定,贮存期可为2年左右.

高效液相色谱法测定重组人干扰素α-2b注射液中乙二胺四乙酸二钠含量

目的：利用高效液相色谱（HPLC）法测定重组人干扰素α-2b注射液中EDTA二钠（乙二胺四乙酸二钠）的含量。方法：将EDTA二钠与氯化铁溶液于70℃水浴中反应20 min左右;色谱柱为SunFire C18（250 mm×4.6 mm,5μm,Waters）,流动相为5%甲醇＋95%0.64 g/L四丁基溴化铵和4.1 g/L三水合乙酸钠混合液,用冰乙酸调pH值至4.0,流速1 mL/min,检测波长254 nm。结果：该测定方法线性范围为0.025-0.5 g/L,线性关系良好（r=0.9997）,加样回收率为98.27%（n=9,RSD=2.55%）。结论：本方法准确、快速、可靠,可用于重组人干扰素α-2b注射液中EDTA二钠含量的测定。

艾塞那肽单克隆抗体的制备及其ELISA检测方法的建立

艾塞那肽(exenatide)是Exendin-4的人工合成品,是首获批准应用于2型糖尿病的胰高血糖素样肽1受体激动剂(glucagon-like peptide-1 receptor agonist,GLP-1RA)[1-2]。注射给药后,通过模拟胰岛素抑制胰高血糖素的分泌,减慢胃排空和减少食欲从而达到控制血糖的效果[3-10]。研究资料表明,艾塞那肽的测定方法目前主要有高效液相法[11]和ELISA试剂盒法。其中高效液相法主要用于艾塞那肽制剂的含量、纯度等检测;ELISA方法灵敏度高,样品适用性广,可用于艾塞那肽血药浓度测定,但进口试剂盒价格十分昂贵,且难以获得,国产的试剂盒对样品的处理要求较高、不易获得稳定的检测结果。鉴于艾塞那肽的临床应用价值和未来的广泛使用,建立一种灵敏、适用性强的艾塞那肽含量检测方法具有十分重要的意义。

比色法测定聚乙二醇化重组人干扰素α2b注射液中吐温80的含量

建立比色法测定聚乙二醇化干扰素α2b(PEG-IFNα2b)注射液中吐温80含量,并评估聚乙二醇(PEG,分子量:20KD)对该测定方法的影响。

重组人干扰素α2b凝胶的制备及安全性评价

目的研制出安全有效、稳定性好的重组人干扰素α2b凝胶。方法以重组人干扰素α2b为主药,卡波姆、明胶为凝胶基质,制备重组人干扰素α2b凝胶;通过扫描电镜(SEM)观察其微观结构;对生物学活性等主要质量指标进行稳定性考察;采用豚鼠进行皮肤过敏研究、采用新西兰兔进行皮肤刺激和局部刺激研究。结果制备的重组人干扰素α2b凝胶外观光滑透明、触感细腻,电镜扫描其微观结构呈三维网络状;干扰素生物学活性稳定,外观及pH等主要质量指标在18个月内稳定;重组人干扰素α2b凝胶给予豚鼠皮肤涂抹,未见皮肤过敏反应发生;新西兰兔破损皮肤重复涂抹给予重组人干扰素α2b凝胶后,未见与供试品相关的皮肤刺激性反应;新西兰兔完整皮肤和阴道重复给予重组人干扰素α2b凝胶后,皮肤给药和阴道给药未见与供试品相关的刺激性反应。结论研制的重组人干扰素α2b凝胶具有良好的稳定性,安全性,有广阔的临床应用前景。

原发性筛窦脑膜瘤一例报告

脑膜瘤是常见的颅内肿瘤之一,但发生在颅外者甚少,原发于筛窦者更为罕见.本文报告一例如下: 女性,11岁.因鼻梁增宽增高伴流泪,继而左眼突出年余,但无视力障碍、鼻塞.拟诊为左筛窦粘液囊肿而收住入院。

磁共振显象在脑梗塞诊断中的应用

磁共振显象(MRI)应用于临床以来,提高了对缺血性脑血管(ICVD)病的诊断,我院自1990年10月～1991年1月经 MRI 诊断 ICVD35例,同时做头颅 CT 检查24例,MRI 诊断阳性率明显高于 CT,允以后颅窝脑干、小脑梗塞和小灶梗塞为著,而且 MRI 为临床不表现卒中的脑梗塞的早期诊断提供了依据。本文就 MRI 在

中低磁场MRI在后颅凹占位病变中的临床应用

为探讨磁共振成像(MRI)在后颅凹占位中的应用价值,木文对31例后颅凹占位病变分析如下: 1 资料与方法本组31例(男16,女15),年龄6～68岁,平均38.4岁。病程1周～20年,平均20.2个月,其中<6个月19例,>7个月12例。临床有头痛、头昏12例;单侧肢体运动障碍、耳鸣及听力下降各7例,行走不稳视物模糊各5例;恶心呕吐3例;单侧面部发麻伴三叉神经痛2例。其他有吞咽困难、呛水、口角歪斜等。本组28例曾作CT检查,3例曾摄内听道X线平片。

颅内动静脉畸形的MRI诊断与CT、DSA的比较

磁共振成像(MRI)可清楚地显示颅内解剖结构和病变组织,已广泛应用于颅内疾病的诊断。本文报道8例经数字减影血管造影(DSA)证实的颅内动静脉畸形(AVM)的MRI影像特征,并与CT和DSA影像进行比较分析。资料和方法 1 对象我院1990年10月～1991年6月,经MRI检查诊断的8例颅内AVM,其中男5例,女3例,年龄17～47岁,平均31岁。

184例慢性非单纯性化脓性中耳炎的临床与X线对照分析

统计手术后经病理证实的184例慢性非单纯性化脓性中耳炎病例。术前乳突X线提示胆脂瘤或有骨破坏为112例,诊断符合率60.9％慢性乳突炎或正常72例,误诊率39.1％。说明乳突X线摄片对诊断慢性非单纯性化脓性中耳炎有一定价值,但不是唯一依据。临床检查发现鼓膜松弛部穿孔,即使X线不支持也应作乳突手术。

HPLC法测定重组人干扰素α2b注射液中吐温80的含量

目的采用HPLC法测定重组人干扰素α2b注射液中吐温80的含量。方法按设置的色谱条件对检测重组人干扰素α2b注射液中吐温80含量的HPLC方法进行专属性验证、系统适应性验证、线性范围测定、实验内重复性验证、日间重复性验证、最低检测限测定、准确性验证,并对3批重组人干扰素α2b注射液中吐温80的含量进行检测。结果该测定方法具有专属性;系统适应性良好;线性范围为0.031 25～2.5 mg/ml,R2=0.999 7,线性关系良好;实验内重复性,峰面积和浓度的RSD值分别为0.71%和0.56%;日间重复性,保留时间和峰面积的RSD值分别为0.47%和2.76%;最低检测限为10 mg/L;加样回收率分别为101.99%、99.96%和102.2%,RSD=1.16%;3批人干扰素α2b注射液中吐温80的相对含量分别为0.940、0.936和0.950 mg/ml,分别为标示量的94.0%、93.6%和95.0%。结论本方法准确、快速、可靠,可用于重组人干扰素α2b注射液中吐温80含量的测定。

聚乙二醇化重组人干扰素α2b注射液中游离聚乙二醇含量的测定

目的建立测定聚乙二醇(polyethylene glycol,PEG)化重组人干扰素α2b(Peg-IFNα2b)注射液中游离PEG含量的高效液相色谱-蒸发光散射检测方法,并进行方法的验证。方法以Sepax Bio-C18为固定相,流动相A为0.1%三氟乙酸-水溶液,流动相B为0.1%三氟乙酸-90%乙腈-10%水溶液,梯度洗脱,蒸发光散射检测器检测不同浓度PEG对照品及Peg-IFNα2b注射液样品,建立高效液相色谱-蒸发光散射检测法,并对方法进行专属性、线性范围、检测限及加样回收率验证。结果高效液相色谱显示,PEG对照品与混有PEG对照品的Peg-IFNα2b注射液色谱峰分离度良好,且无其他色谱峰干扰;PEG对照品在6.25~100.00μg/mL范围内线性良好,R2=0.9903;最低检测限约为1.56μg/mL;低、中、高3个浓度的PEG对照品加样回收率分别为107.51%、103.52%和95.99%。结论建立的方法简单、准确、快速,可用于测定Peg-IFNα2b注射液中游离PEG含量。

高效液相色谱法检测聚乙二醇化重组人干扰素α2b注射液中N-羟基琥珀酰亚胺含量

目的建立检测聚乙二醇化重组人干扰素α2b(PEGylated recombinant human interferonα2b,PEG-IFNα2b)注射液中N-羟基琥珀酰亚胺(N-hydroxy succinimide,NHS)含量的高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)法。方法以TSK G3000SW(7.8 mm×300 mm,10μm,TOSOH)为色谱柱,用20 mmol/L PB(p H 7.0)-145 mmol/L Na Cl-5%异丙醇为流动相,流速为0.6 ml/min,检测波长为260 nm,建立检测PEG-IFNα2b注射液中NHS含量的HPLC方法,进行专属性、系统适应性、准确性验证,并确定该方法的线性范围、定量限和最低检测限。用建立的方法检测3批PEG-IFNα2b注射液中NHS的含量。结果该方法专属性、系统适应性及准确性良好;线性范围为0.00 977~2.50μg/ml(R2=0.999 985);最低定量限为0.002 4μg/ml(0.002%),最低检测限为0.001 2μg/ml(0.001%)。3批PEG-IFNα2b注射液样品中均未检出NHS,表明样品中NHS小于0.001%。结论建立的HPLC法准确、可靠,可用于PEG-IFNα2b注射液中NHS含量的测定。