谷胱甘肽与D型氨基酸非共价复合物的质谱

为了研究谷胱甘肽和D型氨基酸的非共价相互作用,将一定化学剂量比的还原型谷胱甘肽与D-苯丙氨酸、D-组氨酸或D-谷氨酰胺在室温下混合后,温育1h,使反应达到平衡.电喷雾质谱测量结果表明,在生理pH条件下,谷胱甘肽可以和D型氨基酸经反应生成非共价复合物.串级质谱中的碰撞诱导解离(CID)以及紫外光谱进一步确认了非共价复合物的生成.为了避免严重的离子化效率和质谱信号相互抑制作用,对谷胱甘肽和D-谷氨酰胺的相互作用作了定量的评估.配制一系列不同初始浓度的谷胱甘肽和D型氨基酸的混合溶液,并用电喷雾质谱测定混合溶液中不同质点的质谱峰强度,计算了谷胱甘肽与三个D型氨基酸结合形成的复合物的解离常数.计算结果表明,谷胱甘肽可以和D型氨基酸结合形成不同键合强度的非共价复合物,其稳定性按照D-谷氨酰胺、D-苯丙氨酸、D-组氨酸的次序逐渐增大.

电喷雾质谱法研究谷胱甘肽与L型芳香性氨基酸非共价复合物

为探索谷胱甘肽和L型芳香性氨基酸的非共价相互作用,将一定化学剂量比的还原型γ-谷胱甘肽分别与L型芳香性氨基酸(包括苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸)在室温和生理pH条件下混合后,温育1 h,生成非共价复合物,并使反应完全.电喷雾质谱测量结果揭示谷胱甘肽和L型芳香性氨基酸反应可以生成非共价复合物.在二级串级质谱MS2测得的复合物碎片离子峰中,除芳香性氨基酸离子峰外,还包括谷胱甘肽及其它再次碎裂产生的b2和y2碎片离子,进一步确认了非共价复合物的形成.紫外光谱也证实了电喷雾质谱的实验结果.为避免严重的离子化效率差异和质谱信号的相互抑制作用,定量评估了谷胱甘肽和酪氨酸的相互作用,结果显示反应物的初始浓度应该选择在5×10-5～3.00×10-4mol/L范围内.用质谱滴定法测定了谷胱甘肽与3个芳香性氨基酸非共价复合物的解离常数,结果表明,谷胱甘肽复合物的稳定性按Tyr,Trp和Phe次序依次增大.

脉冲激光沉积非晶态Ni-V_2O_5复合薄膜及其电化学性能研究

首次报道了用 35 5nm脉冲激光沉积非晶态Ni V2 O5复合薄膜电极的电化学性能 .采用不同摩尔比的NixV2 O5靶 (x =0 .1,0 .3,0 .5 ) ,在不同的基片温度 (Ts)和O2 气压力下制备了Ni V2 O5复合薄膜 .XRD和SEM测定表明 ,在不锈钢基片上 ,Ts=30 0℃和氧气压力为 14Pa沉积 0 .5h得到的是非晶态的Ni V2 O5薄膜 .将此非晶态的Ni0 .3 V2 O5薄膜电极用于锂电池的正极 ,与纯V2 O5薄膜相比 ,不仅具有良好的放电速率性能和高的比容量 ,而且其充放电循环稳定性优异 .该薄膜电极在放电速率为 2 0C时测得的比容量达 2 0 0mAh/ g ,并经 10 0

脉冲激光沉积制备氧化铋薄膜的电致变色性质

通过电位阶跃和循环伏安结合现场电感偶合分光光度计(CCD)测量了脉冲激光沉积的四方结构Bi_2O_3薄膜的电致变色性质.结果表明,在波长为630 nm处出现一个明显的吸收峰,Bi_2O_3薄膜电极的着色时间为30s.吸光度-电位谱图表明,当电位在3.5-0.7 V之间变化时,Bi_2O_3薄膜的颜色可明显地呈现由透明到暗棕色的可逆变化,重复次数可达50次,在630 nm测得的着色效率约为15 cm^2·C^(-1).

谷胱甘肽与氨基酸非共价复合物的碎片化反应

为了探讨非共价复合物的碎片化反应机理,选择谷胱甘肽和氨基酸复合物研究影响碎片化反应的主要因素。串级质谱结果表明,碰撞气体密度(CGT)和碰撞能量是影响非共价复合物碎片化反应的两个主要因素,对谷胱甘肽复合物碎片化产物的生成途径会有明显的影响。当碰撞气体密度恒定在50×1013mole-cules/cm2,碰撞能量在小于100 eV范围内,复合物His-GSH都能发生碎裂,断裂位点容易发生在非共价键上,生成原来组分[His+H]+和[GSH+H]+离子,但没有发生进一步碎裂。当碰撞能量一定(恒定为30eV),碰撞气体密度为50×1013molecules/cm2时,His-GSH复合物碎裂后的产物同样为[His+H]+和[GSH+H]+。然而,当碰撞气体密度上升至75×1013molecules/cm2时,除非共价键发生碎裂外,共价键也会发生碎裂,产生更小的碎片离子y2,b2。当碰撞气体密度上升为175×1013molecules/cm2时,His也开始碎裂,生成m/z110[His-H2O-CO+H]+。三级串级质谱MS3实验确认,Lys-GSH复合物中谷胱甘肽碎裂后产生的y2碎片离子会进一步碎裂。

电喷雾电离源测定印刷线路板阵列离子阱的分析性能

电喷雾电离源(ESI)测定了印刷线路板材料制成的四通道PCB矩形离子阱中一个通道的的分析性能。结果表明,质谱峰检测到的离子信号的种类和强度明显受到离子动能的影响。当离子动能低于18 eV,则得到的质谱峰主要为精氨酸Arg离子(m/z 175.2),增加其离子动能则Arg离子(m/z 175.2)易碎裂,发生脱胍基、脱水等反应。在正弦波的射频模式下测定了离子质量隔离和离子质量选择激发,以SWIFT缺口频率为50～60 kHz,75～85 kHz和130～145 kHz分别隔离了m/z 175.2,117.3和71.8的离子;用频率为55、80和135 kHz的正弦波(振幅为1.0 V)选择激发弹出了m/z 175.2,117.3和71.8的离子。在氦气气氛下,频率为102 kHz正弦波可以使得Arg离子(m/z 175.2)发生碎裂,得到m/z 157.2,130.3和117.3碎片离子。电流积分法的测定结果表明,在256 kHz共振激发时离子测定效率为46.3%,在边界弹出时,离子测定效率约为9.7%。

电喷雾质谱研究甲醇诱导的溶菌酶构象变化

为了研究甲醇诱导对溶菌酶构象的影响,用电喷雾质谱(ESI-MS)结合圆二色性光谱(CD)在pH 2.0的条件下测定不同甲醇浓度的溶菌酶构象。在甲醇浓度上升到70%前,溶菌酶的ESI质谱图中电荷状态分布没有太大的变化。然而,当甲醇浓度超过75%,以16+为中心的高电荷态分布开始出现,并可以观察到两簇离子峰,表明溶菌酶的三级结构已发生变化。与此同时,圆二色性光谱显示溶菌酶的螺旋变性态的百分率明显上升,其二级结构也部分发生变化。由此可见,当甲醇浓度超过75%,溶菌酶构象将会由折叠态转变为非折叠态。差示扫描量热曲线(DSC)结果显示,固体溶菌酶溶解于5%甲醇溶液后,峰顶温度Tm将由固体的79.6℃上升到81.8℃,表明固体溶菌酶溶解于水后,热稳定性略有升高。

3-苯基偶氮-5-磺基水杨酸与钕(Ⅲ),铜(Ⅱ)络合物的测定

在ｐＨ３．８酸性条件下合成了３－苯基偶氮－５－磺基水杨酸与Ｎｄ（Ⅲ）的酸式络合物，在弱碱性条件下合成了该染料与Ｎｄ（Ⅲ）的羟式络合物及与Ｃｕ（Ⅱ）的络合物，对这些络合物进行了元素分析、热重分析，并测定了电导和红外光谱，确定了分子式，讨论了可能的配位环境。Ｎｄ（Ⅲ）的络合物中羧酸根均以二齿形式配位，偶氮基皆未参与配位，羟式络合物中酚基则参与配位。在Ｃｕ（Ⅱ）的络合物中，羧酸根以二齿形式配位，酚基，偶氮基也同时参与了配位。

抗抑郁化合物SIPI5358与环糊精形成的非共价复合物

用电喷雾电离质谱(ESI-MS)和串级质谱(MS/MS),并结合紫外光谱、荧光光谱等方法,研究一种芳烷醇哌嗪类抗抑郁化合物SIPI5358与α-、β-、γ-环糊精(CD)制备得到的非共价复合物.质谱分析结果显示,SIPI5358分子可以和α-CD生成配合比为1∶1的非共价复合物,而与β-、γ-CD生成不同配合比的非共价复合物.串级质谱的结果进一步验证β-CD与SIPI5358非共价复合物的组成.用紫外光谱和荧光光谱实验对液相中非共价复合物的形成进行了辅助研究,结果均再次验证了非共价复合物的生成.荧光光谱实验测得SIPI5358与β-CD反应的生成常数Kf=3.45×103 mol.L-1.

缓激肽多肽片段间非共价作用的质谱研究

以缓激肽(R1P2P3G4F5S6P7F8R9)分子作为研究模型,用电喷雾质谱研究缓激肽分子碎片片段之间的非共价相互作用,探讨了影响气相多肽分子构象稳定的氢键作用.合成了与缓激肽分子在位置1断裂形成的碎片一致的RPPGFS和PFR多肽序列,与在位置2断裂形成碎片一致的RPPGF和SPFR多肽,以及N端或者C端去掉精氨酸的相应碎片多肽.实验结果表明,上述两个断裂位置产生的碎片多肽分别进行反应后,都能发生非共价作用.在断裂方式1下,PFR多肽在去掉C端的精氨酸R后,与其他大多数多肽不发生非共价结合,表明PFR中的R在缓激肽气相分子的构象中发挥重要的作用.而在断裂方式2下,去掉N端或者C端精氨酸的多肽之间都存在非共价结合,即C端带有丝氨酸的SPF或SPFR多肽碎片仍然可以与N端碎片发生氢键结合,表明丝氨酸很可能处于转角的位置.通过对碰撞诱导解离(CID)的碰撞能量分析,发现多肽RPPGFS和PFR,以及多肽RPPGF和SPFR之间氢键结合较强,而同时去掉N端和C端精氨酸得到的多肽之间的氢键结合较弱.质谱滴定法定量测得的RPPGFS和PFR的结合常数为3.53×103,与RPPGF和SPFR的结合常数(3.16×103)相接近,它们均大于去除精氨酸的PPGF和SPF的结合常数(1.25×103).质谱滴定实验结果进一步确认了碰撞诱导解离的分析结果,表明缓激肽分子两端的精氨酸之间的氢键作用是气相缓激肽分子构象稳定的重要因素之一.

哌嗪衍生物和环糊精分子非共价作用的分析

采用电喷雾质谱(ESI-MS)和核磁共振谱(1HNMR)等方法研究了抗抑郁哌嗪衍生物化合物SIPI5838,SIPI5357和SIPI5358与α-,β-或γ-环糊精(CD)分子生成的非共价复合物及其键合位点。质谱分析结果表明,在水溶液中,SIPI5838分子可以与α-,β-或γ-环糊精分子通过反应生成非共价复合物,其中与β-环糊精可以生成配合比为1:1或1:2的非共价复合物,与α-或γ-环糊精分子则生成配合比为1:1的非共价复合物。SIPI5357与α-,β-或γ-环糊精(CD)分子仅生成配合比为1:1的非共价复合物。核磁共振谱(1HNMR)表明,α-环糊精主要与SIPI5838分子中的苯基结合,β-环糊精可同时与SIPI5838分子中的苯基和萘基结合配合比1:2的非共价复合物,而γ-环糊精则主要与SIPI5838分子中的萘基结合。溶解度实验表明,SIPI5358与α-,β-及γ-环糊精在液相中的结合常数分别为15.4,29.2和175.2mol/L。

抗体可以作为半抗原二硝基氟苯免疫靶向治疗的载体

目的:了解半抗原二硝基氟苯(DNFB)结合乙型肝炎免疫球蛋白(HBIG)后对其抗体功能的影响.方法:常温下把HBIG(13mg/500μLPBS)水溶液分别与不同剂量(2、4、8mg)的DNFB混合,组成2、4、8mg管,混匀过夜后离心.取2、4mg管及未加DNFB的HBIG水溶液对照管,各取半量对半稀释,以HiTrap分子筛柱脱盐,3个洗脱液再分别作对半系列稀释11次,3组共组成36个标本.ELISA法检测乙肝表面抗体的效价.取2、4mg管的另一半分别予饱和硫酸铵沉淀后取上清,以紫外光光度分析仪测定A340,与加入不同剂量DNFB的5个系列浓度作内标的对照管上清相比较,计算相应管中HBIG结合掉的DNFB量.结果:2、4mg管及对照组,经双因素方差分析及q检验,三组间同稀释度间吸光差值(A450-A630)无差异,而各稀释度间则有非常显著差异(P<0.01).饱和硫酸铵沉淀结合分光光度法测定证实2、4mg管中6.5mgHBIG分别结合DNFB0.67mg和0.86mg,即每一个HBIG分子分别结合88.72及113.48个DNFB半抗原分子,约占HBIG氨基酸残基的6.12%和7.86%.结论:免疫球蛋白(抗体)可作为半抗原DNFB免疫靶向治疗慢性病毒感染或肿瘤的一种有效载体.

醇类分子诱导的肌血球素构象变化

系统研究了各种醇类分子对肌血球素构象变化的影响.结果表明,在pH=4,V(醇)/V(水)=30/70的溶液中,各种不同的醇类分子可以导致肌血球素构象的变化,且这种变化与各种醇的不同分子结构有关,如醇的烷基和结构变化会导致不同程度蛋白质分子构象的变化,并呈现出一定的规律性.随着直链烷基基团的增大,醇分子对蛋白质分子结构的诱导变性能力提高;仅改变醇分子结构时几乎产生相同的诱导效应,但会带来蛋白质分子内离子配位和电子自旋态的改变;用氟原子取代醇分子上的氢原子,在一定程度上对于hMb和aMb具有选择性的稳定作用.实验方法包括电喷雾电离质谱、圆二色谱、和紫外光谱等.

电喷雾质谱研究气相中环糊精与锂离子的非共价复合物

为了探索环糊精和锂离子的非共价相互作用，一定计量比的α-环糊精（α-CD）、β-环糊精（β-CD）、七-（2，6-二-氧-甲基）-β环糊精（DM-β-cD）和七-（2，3，6-三-氧-甲基）-β-环糊精（TM-β-CD）分别与氯化锂混合，在室温下反应10min使达到平衡．溶剂组成为含70％乙腈的水溶液，甲酸含量为0．1％．正离子模式下，电喷雾质谱的结果表明环糊精可以和锂离子结合，并生成1：1化学计量比的非共价复合物．碰撞诱导解离观察到一系列带有锂的环糊精的碎片，表明碰撞后复合物失去了葡萄糖单元，进一步确认了该复合物的生成．质谱滴定法测定了四种复合物Li＋α-CD、Li＋β-CD、Li＋DM-β-CD、Li＋TM-β-CD的解离常数Kd1分别为1．87×10^-5、2．67×10^-5、3．36×10^-5、3．05×10^-5mol／L．Li＋和β-CD复合物的解离常数小于Li＋和DM-β-CD复合物，其原因为部分甲基化的DM-β-CD具有较大的空间位阻．Li＋和TM-β-CD复合物的Kd1接近于Li＋和DM-β-CD复合物，表明β-CD疏水腔的大口完全甲基化的TM-β-CD，与β-CD疏水腔的大口部分甲基化的DM-β-CD与锂离子结合能力相接近，该结果意味着锂离子与DM-β-CD疏水腔的结合位点很可能位于DM-β-CD疏水腔的小口．密度泛函理论计算结果表明，-个Li＋可以和α-CD的四个相邻的氧原子结合，四个相邻的氧原子分别来自于伯羟基和糖苷键，它确认了Li＋位于α-CD疏水腔的小口．对[α-CD＋Li]＋复合物而言，一个Li＋可以通过静电作用，在小口与α-CD疏水腔作用，并形成非特异性结合的主客体复合物．

碱性溶液中甲醇分子诱导的肌血球素构象变化

考察了不同pH值的碱性溶液中甲醇分子对诱导肌血球素构象变化的影响.电喷雾电离质谱(ESI-MS)测量结果表明,当pH分别为11.0,11.4,12.0时,不同体积分数的甲醇(30%,50%,70%及90%)和水混合溶液将诱导肌血球素的构象变化.当pH=11.0时,肌血球素在溶液中均以hMb为主要形态存在(即血红素稳定存在于肌红蛋白中);当pH=11.4时,30%甲醇中的肌血球素仍以hMb为主,但升高甲醇比例会导致hMb上的辅基脱落生成aMb(蛋白质分子);当pH=12.0时,溶液中的肌血球素均以aMb为主.但当应用负离子质谱测量模式时,检测出的肌血球素负离子均以aMb构象为主.同时采用圆二色谱(CD)及紫外-可见(UV-V is)光谱等研究发现,pH值和甲醇含量分别决定蛋白质分子的二级和三级结构的变化.

哌嗪衍生物SIPI5357与环糊精分子非共价复合物的制备与分析

报道了用电喷雾电离质谱(ESI-MS)和紫外光谱(UV)等方法研究一种具有抗抑郁活性的芳烷醇哌嗪类化合物SIPI5357与α-环糊精(α-CD)和β-环糊精(β-CD)制备得到的非共价复合物。质谱分析结果显示,SIPI5357分子可以与环糊精分子以1∶1的关系生成非共价复合物。使用紫外分光光度法对液相中非共价复合物的形成进行了辅助研究,得到了同样的结果。溶解度实验表明,这些非共价复合物的形成可以显著地提高此哌嗪类化合物在水溶液中的溶解度,使得它作为高效的口服或注射药物成为可能。此外,根据溶解度实验的结果,还计算了SIPI5357和两种环糊精分子在液相中的生成常数,它们分别为β-环糊精-SIPI5357:262L/mol/L,α-环糊精-SIPI5357:63.4L/mol/L。两种非共价复合物的稳定程度为β-环糊精-SIPI5357>α-环糊精-SIPI5357。

碱金属离子对甘氨酸五肽气相解离过程的影响

为了获得更多的多肽结构信息,采用结构简单的甘氨酸五肽(简写为GGGGG或G5)作为模型,研究了碱金属离子(Li+、Na+、K+、Rb+)对甘氨酸五肽GGGGG气相解离过程的影响.将一定化学计量比的甘氨酸五肽分别和四种碱金属盐溶液混合后,静置10h,使反应达到平衡.电喷雾质谱结果表明,四种碱金属离子均可以在溶液中与甘氨酸五肽形成非共价复合物,其中主要组分为碱金属离子与G5配合比为1:1和2:1的非共价复合物.质谱碰撞诱导解离(CID)时的碰撞能量为25eV.气相碰撞诱导解离实验结果表明,在配合比为1:1的复合物中,其碎片化程度按照Li+、Na+、K+、Rb+的次序依次减小,Rb+的复合物碎裂过程中生成了不常见的c、z离子;在配合比为2:1的复合物中,其碎片化程度按照Li+、Na+、K+、Rb+的次序依次增大.与1:1的非共价复合物相比,Na+、K+、Rb+的2:1复合物的气相解离显得更加容易.除Li+外,两个碱金属离子对G5的活化能力明显较单个碱金属离子强,它们可以诱导多肽在更多位点断裂,生成更多类型的碎片离子.

非对称三角形电极线形离子阱的模拟研究

三角形电极线形离子阱具有结构简单、易加工和质量分析性能好等优点。本研究使用理论模拟方法研究了两种非对称三角形电极线形离子阱内部电场成分分布及质量分析能力:离子出射方向上两个电极角度相同,但与另外两个相同电极的角度不同;离子出射方向上一个电极角度与其它3个相同电极的角度不同。模拟结果表明,当三角形电极线形离子阱出射方向上的一个电极角度为137°,另外3个电极角度为140°时,线形离子阱内部同时引入了奇数阶场和偶数阶场,当扫描速度为1900 Da/s,分析m/z=609 Da的离子的质量分辨率可达到7186。同时,线形离子阱的灵敏度和精度也得到明显提升。

α-氨基酸及其酯化物侧链对其β-环糊精复合物稳定常数的影响

为了探索α-氨基酸及其酯化物的侧链R基团对其与环糊精非共价复合物结合强度的影响,将一定摩尔比的β-环糊精(β-CD)分别与L型正缬氨酸(n-Val)、亮氨酸(Leu)、苯丙氨酸(Phe)、天冬氨酸(Asp)、天冬氨酸-4-苄酯(Asp-4-benzyl ester)和天冬氨酸-4-叔丁酯(Asp-4-t-butyl ester)在室温下混合,反应平衡后采用电喷雾电离质谱进行竞争反应检测,并以改进的质谱滴定结合曲线拟合法计算结合常数.结果表明,它们均可形成摩尔比为1∶1的非共价复合物.在2组竞争反应中,复合物的结合强度顺序分别为[β-CD∶Asp-4-benzyl ester+H]^+>[β-CD∶Asp-4-t-butyl ester+H]^+>[β-CD∶Asp+H]^+以及[β-CD∶Phe+H]^+>[β-CD∶Leu+H]^+>[β-CD∶n-Val+H]^+.质谱滴定曲线拟合法测得[β-CD∶n-Val+H]^+,[β-CD∶Asp+H]^+,[β-CD∶Asp-4-t-butyl ester+H]^+,[β-CD∶Asp-4-benzyl ester+H]^+,[β-CD∶Leu+H]^+和[β-CD∶Phe+H]^+的稳定常数(lgK_(st))分别为1.81,2.54,3.14,3.26,3.36和3.67,结合强度依次增强.竞争反应的定性分析结果与质谱滴定定量法测得结合强度结果的趋势一致.由于所选用的α-氨基酸及其酯化物客体的羧基端(—COOH)和氨基端(—NH_2)均相同,且都为亲水基团,仅有侧链R基团不同,因此在溶液中客体分子受疏水驱动与β-CD主体靠近并结合时,侧链R基团的疏水力和极性2个因素起重要作用.由于客体分子体积小,其碳端的羧基还可与β-CD大口或小口边缘的羟基形成氢键,使复合物更加稳定.

质谱法研究气相中18-冠醚-6与氨基酸的非共价相互作用

利用电喷雾电离质谱研究了在气相条件下18-冠醚-6与20余种天然氨基酸及其异构体间的非共价相互作用。定性结果表明,在气相中18-冠-6可以与氨基酸形成化学计量比为1∶1的非共价复合物。配制一系列不同浓度的18-冠-6分别与固定浓度的氨基酸反应,利用质谱测得反应物和产物的质谱峰,计算冠醚分别与L-苯丙氨酸、L-酪氨酸、L-赖氨酸和L-天冬氨酸反应的复合物结合常数lg Ka分别为3.90、3.75、4.06和3.64,基于此建立了校准曲线。通过竞争反应实验,以上述4种氨基酸与冠醚复合物的结合常数为参考值,可推算得到其余氨基酸与冠醚的结合常数。实验结果表明,冠醚-氨基酸复合物的稳定性与氨基酸的种类相关,节碱性氨基酸以及侧链是烷基(或氢原子)的氨基酸对冠醚的亲和性更好,而酸性氨基酸(如L-丝氨酸)以及侧链上有酰胺键的氨基酸,对冠醚的亲和性较低。研究了18-冠-6对L型氨基酸及其D型异构体的手性选择性,结果表明,18-冠-6只能识别部分中性氨基酸。