NF-κB反义核酸对胰腺癌细胞ICAM-1表达及侵袭转移能力的影响

目的研究核因子-κB(NF-κB)亚单位p65反义寡核苷酸(ASODN)对人胰腺癌细胞细胞间粘附分子-1(ICAM-1)表达及侵袭转移能力的影响。方法设计合成p65ASODN,体外转染人胰腺癌细胞株PANC-1,用流式细胞仪和荧光显微镜检测转染效率,用RT-PCR检测p65及ICAM-1mRNA的表达,用四甲基偶氮唑盐(MTT)法和细胞侵袭实验分析细胞增殖能力和侵袭转移能力的改变。结果p65ASODN可成功转染PANC-1细胞;转染后,p65及ICAM-1mRNA表达明显减弱(P<0.01);细胞增殖活性和侵袭转移能力明显下降(P<0.01)。结论脂质体介导的p65ASODN能有效抑制p65基因的表达,从而降低细胞的侵袭转移能力,p65ASODN可能主要通过下调ICAM-1基因的表达发挥抗侵袭转移的作用。

hsa-miR-759促进胃癌细胞SGC-7901增殖的机制研究

世界范围内,胃癌发病率在所有恶性肿瘤中居第4位,其致死率则位于第2位,我国是胃癌高发国家,每年新增病例约占全球新增数量的40%.由于我国早期胃癌诊断率较低,治疗方法多以手术切除为主,这使得胃癌的致死率高于世界平均水平,因此,寻找胃癌诊断的新方法以及治疗的新途径尤为重要[1].目前,早期胃癌临床治疗多以手术为主,内镜下黏膜切除术（EMR）和内镜下黏膜下剥离术（ESD）是主要的2种手术方法[23].临床原发肿瘤的切除,通常对于肠型黏膜内癌,病灶部位无溃疡或溃疡疤痕的胃癌有较好的效果,而对伴有远处转移的胃癌多数是无法治愈的.对于进展期或复发性的肿瘤,化疗的作用有限,

胰腺外伤的诊断和治疗

目的探讨胰腺外伤的诊治经验,提高治愈率。方法回顾性分析我院1991年2月至2005年7月收治的28例胰腺外伤患者的病例资料。结果28例患者中4例行保守治疗;24例行手术治疗,其中行清创止血引流术12例,行胰尾加脾切除术2例,行远侧胰腺切除、近端胰腺U形缝扎术7例,行近端胰腺U形缝扎、远端胰腺空肠Roux-en-Y吻合术2例,行胰头修补引流术1例。治愈25例,死亡3例。发生胰瘘3例、切口感染1例、切口裂开1例。结论根据胰腺外伤的程度,选择合理的治疗方法是提高胰腺外伤治愈率的关键。

反义寡核苷酸阻断NF-кB对胰腺癌细胞增殖活性影响的研究

目的:研究核因子-кB(NF-кB)亚单位p65反义寡核苷酸(ASODN)对人胰腺癌细胞增殖活性的影响,探讨p65 ASODN治疗胰腺癌的可行性。方法:设计合成p65ASODN,体外转染人胰腺癌细胞株PANC-1,用流式细胞仪和荧光显微镜检测转染效率,用RT-PCR分析p65 mRNA的表达,用四甲基偶氮唑盐(MTT)法和克隆形成试验分析细胞增殖能力。结果:流式细胞仪和荧光显微镜检测表明,p65 ASODN可成功转染PANC-1细胞;转染后,RT-PCR结果显示反义治疗组、空脂质体组和空白对照组p65 mRNA相对表达量分别为0.24±0.05、0.37±0.04和0.39±0.03,反义治疗组p65基因表达显著下降,P=0.000;MTT检测结果显示,在转染后24、48和72h反义治疗组吸光度(OD)值均降低,细胞增殖受到抑制,抑制作用在转染后48h最为明显,P<0.01;克隆形成试验结果显示,反义治疗组、空脂质体组和空白对照组的克隆形成率分别为(14.9±3.3)%、(23.3±2.0)%和(25.8±2.5)%,反义治疗组克隆形成率显著下降,P=0.000。结论:脂质体介导的p65ASODN能有效抑制胰腺癌PANC-1细胞株p65基因的表达,从而降低细胞增殖活性,可能对胰腺癌有治疗作用。

miRNA765高表达对胃癌耐药细胞株BGC-823/CDDP耐药性的影响

目的观察miRNA765高表达对胃癌顺铂(CDDP)耐药细胞株BGC-823/CDDP耐药性的影响。方法将PCR扩增的包含miRNA765前体的基因序列克隆至真核表达载体,构建miRNA重组表达载体;阳离子脂质体转染重组质粒到BGC-823/CDDP细胞。转染后48 h,Real-Time PCR和Western blotting法分别检测细胞中miRNA765和细胞因子诱导的凋亡抑制因子1(CIAPIN1)蛋白的相对表达量;采用不同浓度CDDP处理转染后48 h的BGC-823/CDDP细胞,24和48 h后MTT法检测细胞活性并计算细胞对于CDDP的半抑制浓度(IC50)。采用终质量浓度为1μg/mL的CDDP处理基因干预后的BGC-823/CDDP细胞,双染法检测细胞凋亡率。结果 BGC-823/CDDP细胞内miRNA765的相对表达量明显低于其亲本细胞BGC-823,CIAPIN1蛋白相对表达量则明显高于其亲本细胞株(均P<0.01)。在BGC-823/CDDP细胞内高表达miRNA765可明显抑制CIAPIN1蛋白的表达,转染后48 h的CIAPIN1蛋白表达量明显低于未转染组(P<0.01);miRNA765高表达可明显降低BGC-823/CDDP细胞的耐药能力,48 h后IC50值从(18.27±3.92)μg/mL降至(1.50±0.43)μg/mL(P<0.05)。转染48 h后,BGC-823/CDDP细胞的凋亡率从(10.1±1.7)%上升至(53.4±7.9)%(P<0.01)。结论 miRNA765高表达可以明显降低胃癌耐药细胞株BGC-823/CDDP的耐药能力。

替米沙坦通过上调PPAR-γ促进结肠癌SW480细胞TIMP-1表达的实验研究

目的探讨替米沙坦能否通过上调PPAR-γ促进结肠癌SW480细胞TIMP-1表达。方法使用替米沙坦对SW480细胞进行干预。在不同时间点(0、24和72h)使用MTT法对SW480细胞活性进行测定;使用PT-PCR对在不同时间点(0、24和72h)细胞表达的TIMP-1和PPAR-γmRNA进行测定;使用western blotting对在不同时间点(0、24和72h)细胞表达的TIMP-1和PPAR-γ蛋白进行测定。结果替米沙坦干预后SW480细胞活性逐渐降低,明显低于对照组(均P<0.05),且各时间点间的细胞活性存在显著统计学差异(均P<0.05);不同时间点(0、24和72h)TIMP-1、PPAR-γmRNA和蛋白的表达呈时间依赖性递增(均P<0.05)。结论本实验表明,替米沙坦可能是通过上调PPAR-γ的表达促进TIMP-1的合成和分泌,导致SW480细胞生长和侵袭能力的降低。

结肠腺癌患者血清miR-551b-3p和miR-143表达水平及临床意义

目的探讨结肠腺癌患者血清miR-551b-3p和miR-143的表达水平及临床意义。方法选取2018年1月~2019年4月解放军第四五四医院手术活检病理确诊的87例结肠腺癌患者作为病例组,选取同期结肠息肉患者106例作为对照组,记录患者基本信息并使用qPCR方法对两组患者循环血中miR-551b-3p和miR-143表达水平进行检测,并与结肠腺癌的分期和分级的关系进行分析。结果病例组患者循环血中miR-551b-3p和miR-143水平明显低于对照组患者(P均<0.05);结肠腺癌分化差、TNM分期晚、有淋巴结转移和远处转移的患者循环血中miR-551b-3p和miR-143水平下降更加明显(P均<0.05)。结论miR-551b-3p和miR-143可能参与了结肠腺癌肿瘤的增殖、分化及转移过程,循环血中miR-551b-3p和miR-143有望成为诊断和预测结肠腺癌预后的指标,但仍需扩大样本量进一步研究证实。

低氧环境地高辛通过抑制HIF-1α下调结肠癌HCT 116细胞VEGF表达的实验研究

目的研究低氧环境下地高辛能否通过抑制HIF-1α下调结肠癌HCT 116细胞VEGF的表达。方法将HCT 116细胞分为常氧组(Normoxia组)、低氧组(Hypoxia组)和低氧+地高辛组(Hypoxia+Digoxin组)。在低氧环境下对结肠癌HCT 116细胞使用地高辛干预,在3个不同时间点(0、24和72h)使用MTT法对HCT 116细胞活性进行检测;同时在干预24小时后分别采用RT-PCR法和western blotting法对HCT 116细胞VEGF和HIF-1α的mRNA和蛋白水平进行检测。结果低氧环境下HCT 116细胞活性呈时间依赖性下降,差异均有统计学意义(均P<0.05);且在各时间点低氧+地高辛组细胞活性较低氧组细胞下降更加明显,差异均有统计学意义(均P<0.05)。在干预24小时后,HCT 116细胞VEGF和HIF-1αmRNA和蛋白的表达水平较未干预细胞明显降低(均P<0.05)。结论在低氧环境下,地高辛可以通过抑制HIF-1α的合成下调结肠癌HCT 116细胞VEGF的表达,抑制肿瘤细胞增殖。

普外科手术治疗甲状腺肿瘤的临床疗效解析

目的解析甲状腺肿瘤所使用的普通外科手术治疗的过程与效果。方法收集本院自2011年9月到2013年10月治疗的80例甲状腺肿瘤患者划分成研究组与对照组,两个组分别取40个样本,在这之中,研究组的病患使用普通外科手术进行医治,另一组的病患则使用保守医治法。通过观察解析研究组的术后状况,对比两个组别的临床治疗效果与治疗后一年内,甲状腺肿瘤患者病灶的康复与复发情况。对比结果显示:研究组病患做一台手术平均要用时(65.4±9.4)分钟,手术过程中的平均出血量(36.4±8.5)毫升,每个病患住院的平均周期是(7.2±0.4)ml,发现肿瘤及术后并发症的概率是7.4%,值得一提的是,在院方的术后护理之后,发病患者的并发症状都已消失。院方通过针对两组病患长达一年的随访,随访成功的概率都是百分之百。研究组的临床总有效率是82.5%,明显优于另一组的57.4%,这一差距具备统计学上的意义,P<0.05。研究组病患的甲状腺肿瘤复发概率是15%,比对照组5%的复发率要高,然而这一差距并没有统计学上的意义,P>0.05。据此可知:以普通外科手术的方式治愈甲状腺肿瘤的步骤较为简便,手术需要的时间比较少,患者出血量较少,术后康复较快,并且治疗效果较为显著,然而患者的复发率比较大。因此如何减少甲状腺肿瘤的术后复发率±然是临床医学的难题,业内采取的普遍措施是和保守疗法相结合。

N-乙酰半胱氨酸通过下调缺氧诱导因子-1α抑制胃癌SGC-7901细胞MMP-9的表达的实验研究

目的研究N-乙酰半胱氨酸(NAC)能否通过下调低氧环境诱导的HIF-1α抑制胃癌SGC-7901细胞MMP-9的表达。方法首先将胃癌SGC-7901细胞分为3组,分别为常氧组(Normoxia组)、低氧组(Hypoxia组)和低氧+NAC组(Hypoxia+NAC组)。在低氧环境下对胃癌SGC-7901细胞使用NAC干预,在3个不同时间点(0h、24h和72h)使用MTT法对SGC-7901细胞活性进行检测;同时在干预24h后,分别采用RT-PCR法和western blot法对SGC-7901细胞MMP-9和HIF-1α的mRNA和蛋白水平进行检测。结果低氧环境下SGC-7901细胞活性呈时间依赖性下降,差异均有统计学意义(P<0.05);且在各时间点低氧+NAC组细胞活性较低氧组细胞下降更加明显,差异均有统计学意义(P<0.05)。在干预24h后,SGC-7901细胞MMP-9和HIF-1αmRNA和蛋白的表达水平较未干预细胞明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论在低氧环境下,NAC可以通过抑制HIF-1α的合成下调胃癌SGC-7901细胞MMP-9的表达,抑制肿瘤细胞的增殖。

有上腹部手术史的腹腔镜胆囊切除术580例报告

目的探讨对有上腹部手术史者行腹腔镜胆囊切除术（laparoscopic cholecystectomy，LC）的可行性及手术特点。方法回顾性分析我院1994年4月-2008年5月对有上腹部手术史的580例行LC的临床资料。结果本组成功完成手术528例，手术成功率为91．0％；中转开腹52例，中转率为9．0％。全部病人痊愈出院，无术后并发症发生。结论对有上腹部手术史的病人可常规行LC。

γ-分泌酶抑制剂DAPT通过下调NOTCH1信号通路抑制结肠癌HCT116细胞增殖的实验研究

目的探讨γ-分泌酶抑制剂DAPT能否通过下调NOTCH1信号通路抑制结肠癌HCT116细胞增殖,以及对Hes1基因表达的影响。方法使用不同浓度的DAPT(0μM、1μM和10μM)对结肠癌HCT116细胞进行干预。在不同时间点(0h、24h和48h)使用MTT法对HCT116细胞活性进行测定。在干预48h后,使用RT-PCR对在不同浓度(0μM、1μM和10μM)DAPT干预后细胞NOTCH1和Hes1mRNA的表达水平进行测定。使用western blot对在不同浓度(0μM、1μM和10μM)DAPT干预后细胞NOTCH1和Hes1蛋白表达水平进行测定。结果使用不同浓度DAPT(0μM、1μM和10μM)对结肠癌HCT116细胞进行干预后,细胞活性呈时间依赖性和浓度依赖性降低,差异均存在显著统计学意义(P均<0.05)。不同浓度DAPT(0μM、1μM和10μM)干预48h后,结肠癌HCT116细胞NOTCH1和Hes1mRNA和蛋白的表达水平呈浓度依赖性的下降,差异均存在显著统计学意义(P均<0.05)。结论本实验表明γ-分泌酶抑制剂DAPT可以通过下调NOTCH1信号通路,抑制结肠癌HCT116细胞增殖。

柯里拉京通过下调NOTCH1信号通路抑制胃癌SGC-7901细胞增殖的实验研究

目的探讨柯里拉京能否通过下调NOTCH1信号通路抑制胃癌SGC-7901细胞的增殖,以及对Hes1表达的影响。方法使用不同浓度的柯里拉京(0μg/ml、10μg/ml和100μg/ml)对胃癌SGC-7901细胞进行干预。在不同时间点(0、24和48h)使用MTT法对SGC-7901细胞活性进行检测。干预48h后,使用qPCR和western blot对在不同浓度(0μg/ml、10μg/ml和100μg/ml)柯里拉京干预后,细胞NOTCH1、Hes1mRNA和蛋白的表达水平进行分析。结果使用不同浓度柯里拉京(0μg/ml、10μg/ml和100μg/ml)对胃癌SGC-7901细胞进行干预后,细胞活性呈时间依赖性和剂量依赖性下降,差异均有统计学意义(P<0.05)。不同浓度柯里拉京(0μg/ml、10μg/ml和100μg/ml)干预48h后,胃癌SGC-7901细胞NOTCH1及Hes1 mRNA和蛋白的表达水平呈剂量依赖性降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论柯里拉京可通过下调NOTCH1/Hes1信号通路抑制胃癌SGC-7901细胞增殖,同时为柯里拉京用于临床治疗胃癌等恶性肿瘤奠定了实验基础。

老年大肠癌同时性肝转移的外科治疗

目的探讨老年大肠癌同时性肝转移的外科治疗。方法对86例大肠癌同时性肝转移的老年患者进行回顾性分析。结果行同期根治性切除者平均生存期34．07个月，姑息性切除平均生存期12．43个月，单纯结肠造口平均生存期5．6个月。结论术前正确评估可切除性，合理的围手术期处理，老年大肠癌肝转移行根治性手术切除是可行的，也是最好的治疗选择。

腹膜后小肠肿瘤样包裹1例

患者男，67岁，因发现右上腹肿块2月余入院。肿块无进行性增大，无发热、腹痛、消瘦、便血，偶有腹胀不适，既往无腹膜炎病史。查体：腹软，肝脾未及，右下腹触及-15cm×17cm大小光滑肿块，质韧，上界不清，活动度小，无压痛。CT示右中下腹部不规则软组织密度影，和小肠关系密切，肿块向前及前腹壁，密度不均，增强不均匀强化。

腹腔镜手术治疗胃肠肿瘤的临床效果研究

目的观察探讨腹腔镜手术用于治疗胃肠肿瘤患者的临床效果与可行方法。方法回顾分析我院近一年(2015年5月-2016年5月)收治的胃肠肿瘤患者68例,根据临床治疗方案实施的不同,将68例胃肠肿瘤患者分为实验组和对照组。实验组34例胃肠肿瘤患者全部行腹腔镜手术来治疗,而对照组34例胃肠肿瘤患者采用的是常规开腹手术方案。观察记录两组患者手术治疗后的各项指标数据,包括手术时间、手术中出血量、胃肠功能排气时间、住院时间、并发症发生情况。结果手术操作时间、手术中患者的出血量、手术后患者胃肠功能排气时间、患者住院时间等指标比较上,采用腹腔镜手术治疗下的实验组34例患者,临床实效性均显著优于对照组34例患者,有统计学意义(P<0.05)。实验组34例,手术后出现切口感染1例,吻合口漏2例,并发症发生率为8.8%;对照组34例,手术后出现切口感染3例,吻合口漏3例,肠梗阻2例,并发症发生率为23.5%。两组比较,卡方检验值为5.165,差异显著有统计学意义(P=0.022,<0.05)。结论腹腔镜手术方法用于治疗肠胃肿瘤临床患者,安全有效、效果突出。

脱细胞基质生物补片在嵌顿性腹股沟斜疝中的应用

目的探讨脱细胞组织基质生物补片在嵌顿性腹股沟斜疝病人治疗中的应用价值。方法选择2014年6月至2017年5月间共36例符合入选标准的嵌顿性腹股沟斜疝病人,使用脱细胞基质生物补片行腹股沟疝Lichtenstein平片无张力修补术,记录病人手术前后的临床参数,观察并分析术后并发症及复发情况。结果术后随访观察12~48个月,未出现生物材料过敏病例,出现伤口渗液2例,伤口感染1例,阴囊积液2例,无慢性疼痛和局部异物感,无复发病例。结论在嵌顿性腹股沟斜疝病人的治疗中应用脱细胞基质材料的生物补片行平片无张力疝修补手术,效果良好,不增加术后相关并发症,具有一定应用前景。

知母皂苷B-Ⅱ纳米纤维膜制备及体外抗肿瘤活性的初步研究

目的:探索知母皂苷B-Ⅱ纳米纤维膜的制备方法,为后续进行体内相关研究打好基础。方法:将知母皂苷B-Ⅱ与聚乳酸(PLLA)按照不同比例制成知母皂苷B-Ⅱ纳米纤维膜;分别采用扫描电镜、红外光谱分析、LC-MS/MS检测方法对纤维膜理化性质表征、生物相容性、缓释性能等进行测试;采用CCK-8法检测载药纳米膜缓释药物抑制胃癌细胞的增殖情况。结果:12%的知母皂苷B-Ⅱ浓度为最佳载药浓度;在制备载知母皂苷B-Ⅱ纳米纤维的过程中,静电纺丝技术能保持两种组分各自的化学特征及物理性质;知母皂苷B-Ⅱ对纤维膜的热稳定性影响不大,两者相容性较好;知母皂苷B-Ⅱ纳米纤维膜可有效释放知母皂苷B-Ⅱ,明显抑制BGC-823细胞的增殖活性,在48 h、72 h与对照组细胞相比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:知母皂苷B-Ⅱ纳米纤维膜通过缓释药物可有效抑制BGC-823细胞的增殖能力。