新型冠状病毒肺炎疫情下医学微生物学课程思政元素的挖掘与应用

医学微生物学作为一门连接基础与临床的西医基础课,承载着与思政课程同向同行的立德树人重任。为了更好地释放课程的德育效能,授课教师需要在已有思政元素的基础上与时俱进,进一步开发和拓展,从而使课程思政具有时效性、体现时代性。文章以新型冠状病毒肺炎疫情为例,就其中蕴藏的医学微生物学相关思政元素进行挖掘并应用,旨在以学生的所见所闻与亲身体会为背景,结合专业教育引导学生树立正确的社会主义核心价值观,提高医学微生物学课程思政的亲和力与感染力,从而真正实现课程的铸魂育人价值。

TSo联合IFN-γ鼻内免疫小鼠诱导的抗弓形虫脾淋巴细胞免疫应答

目的研究速殖子超声裂解物(TSo)和IFN-γ鼻内免疫小鼠经口感染弓形虫速殖子后,脾T细胞亚群的动态变化.方法将6～7周龄BALB/c小鼠100只随机分为4组,每组25只.分别用10μl PBS、20μgTSo、500 UIFN-γ和20 μg TSo十500 UIFN-γ鼻内免疫小鼠2次,间隔2周.末次免疫后第10天,用RH株弓形虫速殖子4×104个/只灌胃攻击.分别于攻击后第7、10、13、16、19天处死小鼠,制备脾淋巴细胞悬液并涂片,免疫细胞化学法检测脾CD4+、CD8+T细胞亚群.结果攻击后第16、19天TSo+IFN-γ组脾CD4+T细胞比率较第10天升高(P＜0.05);脾CD8+T细胞第10、13、16、19天呈现较高水平;CD4+/CD8+比值第10、13天出现倒置.结论TSo联合IFN-γ鼻内免疫小鼠可激发系统免疫反应,提高其细胞免疫应答水平,增强脾CD8+T细胞的细胞毒作用,抵抗弓形虫感染.鼻黏膜免疫是一种安全有效的免疫接种途径.

TSo联合IFN-γ鼻内免疫小鼠的抗弓形虫感染保护作用

目的研究速殖子超声裂解物(TSo)联合IFN-γ鼻内免疫小鼠抗弓形虫感染的保护作用. 方法将6～7周龄BALB/c小鼠100只随机分为4组,每组25只.分别用PBS 10 μl、20 μg TSo、500 U IFN-γ和20 μg TSo+500 U IFN-γ鼻内免疫小鼠2次,间隔2周.末次免疫后第10 d,用RH株弓形虫速殖子4×104个/只灌胃攻击.分别于攻击后第7、10、13、16、19 d处死小鼠,计数脑、肺、肝组织内弓形虫速殖子,观察其动态变化. 结果 TSo+IFN-γ鼻内免疫组可使受攻击小鼠脑、肺、肝组织内弓形虫速殖子数减少,攻击后第13和19 d TSo+IFN-γ组小鼠脑内速殖子数比PBS组分别减少63.92%和58.39%(P均<0.05). 结论 TSo+IFN-γ鼻内免疫小鼠可产生有效的保护性免疫,可减少脑、肺、肝组织内弓形虫速殖子数.组织内速殖子计数可以作为抗弓形虫感染保护力的重要评价指标.

抗原致敏细胞过继转移抗弓形虫感染研究进展

【摘要】将抗原致敏细胞过继转移给健康宿主能产生抗弓形虫感染的保护性免疫。抗原致敏细胞过继免疫与免疫血清中的特异性抗体被动免疫之间相互作用,一起构成宿主抗弓形虫感染的免疫保护机制。对抗原致敏细胞过继转移的研究有助于弓形虫疫苗的研制开发。

TSo联合IFN-γ鼻内免疫小鼠诱导的弓形虫IgA抗体特异性免疫应答

目的研究速殖子超声裂解物(TSo)和IFN-γ鼻内免疫小鼠经口感染弓形虫速殖子后,血清、小肠液和粪便IgA抗体分泌的动态变化。方法将6～7周龄BALB/c小鼠100只随机分为4组,每组25只,分别用10μl缓冲液PBS、20μgTSo、500UIFN-γ和20μgTSo+500UIFN-γ鼻内免疫小鼠。用RH株弓形虫速殖子4×104个/只灌胃攻击,分别于攻击后第7、10、13、16、19天处死小鼠,收集血清、小肠液及粪便,ELISA法测定IgA含量。结果各组血清IgA抗体水平在攻击后第10天达到峰值,TSo+IFN-γ组血清IgA抗体含量高于其他各组。小肠液和粪便IgA抗体含量在攻击后第13天达到峰值,在实验期各时点TSo+IFN-γ组小肠液和粪便IgA抗体含量高于其他组。小肠液与粪便IgA抗体水平呈正相关。结论TSo或IFN-γ或TSo联合IFN-γ鼻内免疫小鼠可诱导黏膜免疫,产生高水平的弓形虫特异性IgA抗体。TSo联合IFN-γ鼻内免疫优于单独免疫,免疫小鼠肠道产生大量SIgA,发挥抗虫作用。鼻黏膜免疫是一种安全有效的免疫接种途径。

经口感染弓形虫BALB/c小鼠血清及肠道分泌物中IgA抗体含量的检测

目的研究经口感染弓形虫速殖子小鼠血清及肠道分泌物中IgA含量的变化,探讨肠道粘膜免疫应答机制.方法将6～8周龄BALB/c小鼠100只随机分为对照组和感染组.感染组灌胃接种RH株弓形虫速殖子5×104个/只,对照组给予等量PBS.于感染后第2、4、6、8、10、13、16、19、22、25天,每组各5只小鼠分别处死,摘眼球采血分离血清,收集肠道冲洗液,用ELISA法测定血清及肠液IgA含量.结果对照组血清IgA抗体于第4～8天缓慢升高后保持平稳;感染组小鼠血清IgA水平从第8天起迅速升高,第10天达到高峰,之后迅速下降并接近对照组的水平,第25天再度升高.与对照组相比,感染组血清IgA水平在第10、25天显著升高(P＜0.01).肠液IgA含量明显高于血清,两组小鼠肠道冲洗液中的IgA抗体于第4、6天逐渐升高之后,对照组保持平稳,而感染组于第8天骤然下降并低于升高前的水平,之后又迅速升高,于第13天达到峰值,随后下降并接近对照组水平;第8和13天感染组IgA抗体含量显著低于和高于(P＜0.01)对照组.结论BALB/c小鼠经口感染弓形虫,可有效诱导肠道粘膜的免疫应答,产生高水平的IgA抗体,发挥局部抗虫作用;提示IgA抗体产生变化规律与虫株毒力及小鼠免疫反应特性等因素有关.

疏风宣肺解毒方药对流感病毒性肺炎小鼠Janus激酶信号转导与转录激活因子通路的影响

目的：观察疏风宣肺解毒方对流感病毒性肺炎小鼠肺组织Janus激酶信号转导与转录激活因子（JAK-STAT）通路的调控作用。方法将60只小鼠按随机数字表法分为正常组、模型组、达菲对照组和疏风宣肺方高、中、低剂量组，每组10只。应用0.05 mL的4LD50流感病毒肺适应株FM1滴鼻感染小鼠，建立小鼠流感病毒性肺炎模型；正常组以0.05 mL生理盐水滴鼻。制模成功2 h后，正常组、模型组灌服蒸馏水；达菲对照组灌服达菲（磷酸奥司他韦）2.5 g·mL-1·d-1；疏风宣肺方高、中、低剂量组分别灌服疏风宣肺解毒方药（由菊花、桑叶、杏仁、桔梗、连翘、柴胡等组成，颗粒剂），按照人与小鼠体表面积换算给药剂量，以加倍量为高剂量，折半量为低剂量，每日1次，每次0.2 mL。连续给药4 d后取小鼠肺组织，采用基因芯片技术检测小鼠JAK-STAT通路相关差异基因的表达，筛选差异表达基因的标准为：上调基因P＜0.05，且log2比值＞1，下调基因P＜0.05，且log2比值＜-1。应用实时荧光定量反转录-聚合酶链反应（RT-qPCR）测定肺组织Janus激酶（JAK）、γ干扰素（IFN-γ）的mRNA表达水平。结果与正常组比较，模型组差异表达基因STAT5〔log2（正常组/模型组）＝2.32〕、白细胞介素-4受体亚单位〔IL4RA，log2（正常组/模型组）＝4.77〕、白细胞介素-12受体〔IL12R， log2（正常组/模型组）＝1.58〕、 JAK〔log2（正常组/模型组）＝2.41〕均明显上调，干扰素（IFN）明显下调〔log2（正常组/模型组）＝-1.45〕；与模型组比较，达菲对照组〔log2（达菲对照组/模型组）＝1.51〕、方药各组〔log2（方药低剂量组/模型组）＝1.46，log2（方药中剂量组/模型组）＝1.72，log2（方药高剂量组/模型组）＝1.40〕差异表达基因IFN明显上调，STAT5〔log2（达菲对照组/模型组）＝-2.06，log2（方药低剂量组/模型组）＝-1.41， log2（方药中剂量组/模型组）＝-2.10，log2（方药高剂量组/模型组）＝-1.89〕、IL4RA〔log2（达菲对照组/模型组）＝-2.52，log2（方药低剂量组/模型组）＝-1.85，log2（方药中剂量组/模型组）＝-2.74，log2（方药高剂量组/模型组）＝-1.39〕、IL12R〔log2（达菲对照组/模型组）＝-1.48，log2（方药低剂量组/模型组）＝-0.10，log2（方药中剂量组/模型组）＝-1.58，log2（方药高剂量组/模型组）＝-0.53〕、JAK〔log2（达菲对照组/模型组）＝-1.44， log2（方药低剂量组/模型组）＝-0.88，log2（方药中剂量组/模型组）＝-1.74，log2（方药高剂量组/模型组）＝-0.53〕明显下调，模型组JAK mRNA表达较对照组明显升高（2-ΔΔCt：3.17±0.94比1.01±0.13，P＜0.05）， IFN-γ mRNA表达较对照组明显降低（2-ΔΔCt：0.15±0.48比1.01±0.12，P＜0.05）；与模型组比较，达菲对照组和疏风宣肺方高、中剂量组JAK mRNA表达均明显降低（2-ΔΔCt：2.02±0.63、1.19±0.30、1.59±0.67比3.17±0.94，均P＜0.05），达菲对照组和疏风宣肺方高、中、低剂量组IFN-γ mRNA表达升高（2-ΔΔCt：0.61±0.12、0.41±0.13、0.85±0.14、0.78±0.20比0.15±0.48，均P＜0.05）。结论疏风宣肺解毒方可通过调节JAK-STAT通路和升高IFN-γ水平，调节辅助性T细胞1/2（Th1/2）的平衡，减轻肺组织免疫病理损伤。

经口感染弓形虫诱导的小鼠肠道粘膜T细胞亚群变化

目的研究经口感染弓形虫速殖子小鼠肠道粘膜组织诱导部位与效应部位T细胞亚群的变化,探讨肠道粘膜免疫应答机制.方法将6～7周龄BALB/c小鼠100只随机分为对照组和感染组.感染组灌胃接种RH株弓形虫速殖子5×104个/只,对照组给予等体积PBS.于感染后第2、4、6、8、10 d分别处死小鼠,分离Peyer's patches(PP结)、肠系膜淋巴结(MLN)淋巴细胞、小肠上皮内淋巴细胞(IEL),用免疫细胞化学法检测CD4+、CD8+T细胞亚群.结果感染组小鼠PP结CD4+T细胞有随感染天数增加呈升高趋势,第6、8、10 d显著高于对照组(P<0.01);CD8+T细胞亦有增高趋势,但与对照组相比差异无显著性(P＞0.05);CD4+/CD8+比值第6 d起增高(P<0.05),第8 d最大(P<0.01),第10d回落(P<0.05).MLN中T细胞亚群有较弱增高趋势,无统计学意义(P＞0.05).IEL CD4+、CD8+T细胞在第6、8、10 d均增高,其中CD8+T细胞增高显著(P<0.01);CD4+/CD8+比值第6 d开始下降,两组间差异有显著性(P<0.05).结论诱导部位PP结CD4+T细胞明显增高,诱导对弓形虫抗原的处理、提呈作用;效应部位IEL CD8+T细胞增殖明显,在清除虫体的过程中起主导作用.

小鼠过继转移致敏小肠IEL抗弓形虫感染

目的研究分离自弓形虫RH株速殖子经口感染小鼠后不同时间点的小肠上皮内淋巴细胞(intraepitheliallymphocyte,IEL)过继转移抗弓形虫感染作用,探讨其作用机制。方法BALB/c鼠经口感染弓形虫速殖子5×104个/只或未感染,作为供体提供IEL。同品系受体鼠分为实验组(IEL7组、IEL9组、IEL11组、IEL13组和IEL15组)和对照组(IEL0组),每组6只小鼠。受体鼠经尾静脉分别接受分离自供体鼠经速殖子感染后第7、9、11、13、15天的致敏IEL或未致敏的IEL3×105/0.2ml只。各组小鼠过继转移后第4天,用弓形虫速殖子灌胃攻击,攻击后第13天分离纯化脑、肺、脾组织弓形虫速殖子并计数,测定肠液IgA含量。结果致敏IEL过继免疫可使受体鼠脑、肺、脾组织内弓形虫速殖子数显著减少,接受感染后第13天IEL的小鼠组织内速殖子数减少最为显著(P<0.01)脑、肺和脾组织内速殖子数比对照组分别减少81.13%,58.43%和70.97%。致敏IEL过继转移使肠道IgA水平升高,IEL11组和IEL13组显著高于IEL0组(P<0.01)。结论致敏IEL过继转移能上调肠道黏膜的免疫应答,导致黏膜特异性IgA分泌增加,诱导黏膜抗体的保护性免疫应答。IEL的这种保护作用具有致敏的时间依赖性,感染后第13天分离的致敏IEL对弓形虫感染具有最大的保护作用。

鼻内给予IFN—γ对小鼠弓形虫感染的保护作用

目的观察鼻内给予IFN-γ对小鼠弓形虫感染的保护作用。方法BALB／c小鼠经口感染弓形虫速殖子前或后鼻内给予IFN-γ，或感染前鼻内给予注射用水(对照组)，观察小鼠健康状况及死亡情况，在感染后d30处死小鼠，计数肝、脾、脑组织内弓形虫速殖子。结果感染前和感染后鼻内给予IFN-γ后小鼠存活率和体重高于对照组(P>0．05和P<0．01)，肝、脾、脑中速殖子的数量显著低于对照组(P<0．01)。结论鼻内给予IFN-γ对小鼠弓形虫感染具有保护作用。

中医护理专业医学免疫学教学改革思考

中医院校的西医基础课课时普遍较少,如何在有限课时掌握所学内容是目前要解决的问题。传统的教学模式以讲授为主,学生机械记忆应付考试,考试过后对所学内容印象不深。文章在免疫学教学实践过程中,通过优化教学内容,优选教学方法,"分阶段多层次"考核,激发学生的学习兴趣,培养学生学习的自主性和创新性。

疏风宣肺解毒方对流感病毒性肺炎小鼠基因表达谱的影响

目的:采用基因表达谱芯片技术筛选疏风宣肺解毒方治疗流感病毒感染小鼠相关的差异表达基因,初步探讨方药治疗流感的作用机制。方法:流感病毒肺适应株FM1滴鼻感染小鼠,建立小鼠流感病毒性肺炎模型,方药灌胃治疗4 d,提取肺组织总RNA,与小鼠全基因表达谱芯片杂交后进行检测。对筛选得到的药物治疗过程中的差异表达基因进行生物信息学分析。结果:基因芯片结果显示,与模型组相比,给药组表达量发生变化的基因中上调的有2 659条,下调的有2 216条。结论:疏风宣肺解毒方作用涉及免疫学方面的分子功能为:胞内信号级联放大效应,浆膜、免疫应答、细胞增生的调节,免疫防御及细胞程序性死亡等;主要调节的代谢途径有:丝裂原活化蛋白激酶信号通路、细胞因子与细胞因子受体的相互作用、肿瘤信号通路、toll样受体信号通路、信号转导及转录激活因子途径、自然杀伤细胞介导的细胞毒作用及趋化因子信号通路等。

中医药院校青年教师提高“微生物学”教学效果的策略研究

微生物学是中医药院校的医学基础课程,内容繁多,课时数少。青年教师缺乏教学经验,对教学内容和教学方法缺少设计与思考,教学效果不理想。根据授课对象及专业特点,从讲好绪论,调整教学内容、优化教学方法、重视实验教学等方面进行一些有益的尝试,取得了较好的效果。

医学微生物学课程中思政元素的探索

高校思政教育是培养社会主义建设者和接班人的主渠道。医学微生物学作为医学院校重要的公共基础课程,与人类健康密切相关,同时也承载着与思政课程同向同行的育德重任。此文从中医药自信、创新精神、辩证思维和健康防护意识4方面对医学微生物学课程蕴含的思政元素进行探索,旨在提高医学微生物学课程的铸魂育人效果,助力培养全面发展的新世纪人才。

加味逍遥散对慢性束缚应激BALB/C小鼠行为学变化的调节研究

目的:研究加味逍遥散对慢性束缚应激BALB/C小鼠行为学变化的影响。方法:将50只8w～10w龄的BALB/C小鼠随机分为正常对照组、模型组、逍遥散组、加味逍遥散低剂量组、加味逍遥散高剂量组5组,每组10只。用特制束缚筒束缚14d,每天6h的方法制备小鼠慢性束缚模型。应激期外小鼠自由饮水和摄食,正常对照组和模型组给予生理盐水1mL/100g,2次/d;逍遥散组、加味逍遥散低剂量组、加味逍遥散高剂量组按1mL/100g体重分别给予0.3g/mL、0.38g/mL、0.76g/mL的中药水煎液,2次/d。给药结束后,采用旷场实验和鼠尾悬挂实验观察小鼠行为学变化。结果:与正常对照组比较,模型组正中央格停留时间延长(P<0.05),6min内不动时间延长(P<0.01),穿格次数减少(P<0.01),修饰次数有所减少,但无显著性差异;与模型组比较,逍遥散组及加味逍遥散低、高剂量组正中央格停留时间缩短(P<0.01),穿格次数增加(P<0.01),6min内不动时间缩短(P<0.01),修饰次数增加,但无显著性差异;加味逍遥散高剂量组与逍遥散组比较,穿格次数增加(P<0.05)。结论:加味逍遥散与逍遥散对慢性束缚应激小鼠行为学均有所改善,但加味逍遥散的调节作用更佳。

医学免疫学与病原生物学中医药自信主题课程思政教学模式的探索

医学免疫学与病原生物学是中医院校医学专业的一门重要基础课程,专业课正确的价值引领是落实立德树人根本任务、培养德才兼备中医药人才的有效途径。文章围绕设定的课程思政目标,深入挖掘思政元素,基于线上线下混合式教学,探索专业教育和思政教育有机融合的路径和方法。通过调查反馈评价课程思政的教学效果和该教学模式的有效性,并对课程思政的实践进行教学反思,可为中医院校其他医学专业课程思政教学改革和教学模式转变提供新的思路。

思维导图在中医院校免疫学课程中的教学实践研究

免疫学是中医药院校本科生的西医基础专业课,学生普遍反映难理解和难以融会贯通,本研究的目的是提高中医药院校本科生免疫学的教学质量。我们在中医药院校免疫学的授课中应用思维导图法,分别从学习思维导图的理论知识、课后总结、加深某一概念的纵向记忆及理解、对易混淆概念横向比较等方面做教学设计,提升教学效果,达到教学相长的目的。思维导图法的应用有效激发了学生的学习积极性和兴趣,提高了学习该课程的主观能动性。思维导图方法是一种颇具成效的教学手段。

思维导图联合微课在中医药院校医学免疫学与微生物学教学中的探索与实践

为解决中医药院校学生在医学免疫学与微生物学课程学习中普遍存在的知识难理解、难记忆问题,提高教学质量,本文以病毒学总论章节为例,将思维导图应用于课前、课中和课后教学全过程,并配合微课作为教学资源,开展思维导图联合微课教学改革。初步实践表明,思维导图联合微课能够有效激发学生学习的主动性,培养创新思维,提高学习成绩,是一种得到学生认可并具有推广潜质的有效教学方法。

多元化教学方法在医学微生物学课程教学中的应用——以病毒学总论为例

在信息化教学背景下,结合线上平台与资源、根据教学内容和学生的学习特点采用适当的教学方法是提高医学微生物学教学质量的重要手段。文章就问题式、讨论式教学法以及思维导图在病毒学总论章节中的应用进行举例介绍,并对多元化教学方法对教学效果的影响进行统计分析。实践表明,与以讲授法为主的传统教学方法相比,多元化教学方法的应用能够有效提高学生的教学认可度与学习成绩。本研究在一定程度上为医学微生物学的教学提供了参考策略。

基于“卫阴”概念的卫分证证治研究

目的:基于“卫阴”概念,探究中医治疗卫表证候的辨治特点。方法:对民国以前古代医案中卫分证的症状表现、用药特点进行数据挖掘,分析其证治特点。结果:通过聚类分析得到与感邪性质、病位相关的6种不同证型。治疗卫分证的药物性寒凉、味甘苦辛者居多,且多归肺脾胃经,甘草、连翘、黄芩使用频次居前3位,养“卫阴”药物以麦冬、甘草、天花粉、芦根、玄参、生地、桑叶、葛根、石斛为主。卫分证的证候表现具有多样性的特点,以中上二焦的病症为多,其治疗以祛邪为主,养护卫阴为辅,同时应根据病性及具体病位的不同选取不同的护阴药物。结论:运用“卫阴”理论辨治卫分证具有重要的临床意义。