基于网络药理学的山豆根调控白细胞跨内皮迁移通路改善急性咽炎的作用机制

目的基于网络药理学、动物实验及荧光定量PCR技术阐明山豆根改善急性咽炎的分子机制。方法利用中药系统药理学分析平台(Traditional Chinese Medicine systems pharmacology database and analysis platform,TCMSP)数据库收集山豆根的活性成分和作用靶点。通过GeneCards、OMIM、DrugBank和Disgenet数据库获取急性咽炎相关的靶点。筛选获得两者的共同靶标后,利用STRING数据库进行构建蛋白互作网络,采用Metascape平台进行通路分析。同时应用Cytoscape软件构建“中药-疾病-成分-靶点”网络和“中药-疾病-成分-靶点-通路”网络。建立大鼠急性咽炎模型,研究山豆根水提取物对大鼠急性咽炎的影响。利用荧光定量PCR技术研究山豆根对大鼠急性咽炎模型咽部组织关键通路上的关键基因靶点的影响。结果该实验获取山豆根活性成分21个的相关作用靶点509个,获取急性咽炎相关的靶点2167个,山豆根与急性咽炎的共同靶点194个。KEGG通路分析筛选了344条相关信号通路,其中显示IL-17信号通路、NF-kappa B信号通路和白细胞跨内皮迁移通路可能在山豆根改善急性咽炎的过程中起关键作用。动物实验表明,山豆根水提取物低剂量组对急性咽炎治疗效果较好。荧光定量PCR实验结果表明,山豆根低剂量组明显下调了白细胞跨内皮迁移通路ITGB2、PIK3CA、PIK3CD和PTPN11基因的表达水平(P<0.05)。结论山豆根改善急性咽炎具有多成分、多靶点、多通路协同作用的特点。

基于网络毒理学和实验验证探讨山豆根致大鼠肾毒性机制

目的 基于网络毒理学和实验验证,探讨山豆根潜在肾毒性机制。方法 网络毒理学预测山豆根毒性成分作用靶点,定位肾毒相关靶基因,取两者交集靶点,导入STRING平台构建靶点互作图,MetaScape数据库进行GO、KEGG分析,BioGPS数据库筛选大鼠肾毒性关键靶基因,构建“成分-靶点-通路”网络。通过动物实验对山豆根肾毒性机制进行验证,荧光定量PCR法检测肾组织关键基因mRNA表达水平。结果 网络毒理学共筛选出山豆根苦参碱、槐定碱、高丽槐素等20种毒性成分,涉及HSP90AA1、SRC、MAPK1、MAPK3、AKT1等135个肾毒性靶点,KEGG富集得到169条相关信号通路,其毒性机制可能与癌症途径、PI3K-Akt信号通路、HIF-1信号通路、MAPK信号通路等密切相关。结合BioGPS数据库筛选出6个关键靶基因PPARA、RAF1、MAP2K1、SRC、AKT1、MAPK3;动物实验结果表明,山豆根高剂量组大鼠BUN、SCr含量显著升高(P<0.01),肾组织出现明显损伤,荧光定量PCR结果表明山豆根高剂量组均可上调PPARA、RAF1、MAP2K1、MAPK3基因mRNA表达量,下调AKT1基因mRNA表达量(P<0.05)。结论 山豆根致大鼠肾毒性机制是多成分-多靶点-多通路共同作用的结果,本研究也为后续山豆根毒理学探索提供理论基础。

基于NF-κB/STAT信号通路探究朱砂根治疗大鼠急性咽炎的作用机制

目的建立大鼠急性咽炎模型并结合网络药理学,基于核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)/信号传导及转录激活因子(signal transducer and activator of transcription,STAT)信号通路探讨朱砂根Ardisia crenata干预大鼠急性咽炎的作用机制。方法通过网络药理学方法预测朱砂根干预急性咽炎的靶点,构建活性成分-靶点、靶点-通路网络。构建急性咽炎大鼠模型,检测大鼠血清中白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、前列腺素E2(prostaglandin E2,PEG2)和IL-10水平;采用qRT-PCR检测大鼠咽部组织中半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(cystein-asparate protease-3,Caspase-3)、Caspase-7、Caspase-8、蛋白酪氨酸性磷酸非受体型11(protein tyrosine phosphatase nonreceptor 11,PTPN11)、蛋白激酶B1(protein kinase B1,AKT1)和Janus激酶2(Janus kinase 2,JAK2)mRNA表达;采用Western blotting检测大鼠咽部组织中AKT1、JAK2和Caspase-8蛋白表达。结果网络药理学研究显示,朱砂根主要活性成分与急性咽炎有168个交集靶点,主要作用于NF-κB/STAT信号通路。与模型组比较,朱砂根组大鼠血清中IL-6和PEG_(2)水平明显降低(P<0.01),IL-10水平显著升高(P<0.05、0.01);咽部组织Caspase-3、Caspase-7、Caspase-8、PTPN11、AKT1和JAK2 mRNA表达水平均显著降低(P<0.05、0.01),Caspase-8、AKT1和JAK2蛋白表达水平均显著降低(P<0.05、0.01)。结论朱砂根中的活性成分可能通过调控NF-κB/STAT信号通路,干预炎症反应并加速巨噬细胞分化、凋亡,从而治疗急性咽炎。

长叶纽子果根化学成分的研究

目的 研究长叶纽子果根(Ardisia virens Kurz var.annamensis Pitard.)的化学成分。方法 长叶纽子果根体积分数70%乙醇提取物采用硅胶柱、Sephadex LH-20、ODS、制备液相进行分离纯化,根据波谱信息鉴定所得化合物的结构。结果 在长叶纽子果根中分离得到10个化合物,分别鉴定为11-O-咖啡酸岩白菜素(1)、11-O-(3′,4′-二甲基没食子酰基)岩白菜素(2)、11-O-乙酰岩白菜素(3)、岩白菜素-11-O-α-D-半乳吡喃糖苷(4)、百两金皂苷B(5)、朱砂根皂苷D(6)、朱砂根皂苷G(7)、(+)-丁香树脂酚(8)、丁香酸(9)、十八碳癸二烯酸-2,3-二羟丙基酯(10)。结论 化合物1~10为首次从该植物中分离得到。