缺锌对经MNNG诱导的HEEC氧化应激和甲基化的影响

目的探讨缺锌对经N-甲基-N′-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)诱导的人正常食管上皮细胞(HEEC)氧化应激和甲基化的影响。方法将细胞分为正常对照组、富锌组、阳性对照组和缺锌组,并分别干预12、24、48 h。比较各组丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平,以及O 6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)、MLH1基因甲基化状态及MGMT蛋白表达水平。结果TPEN对HEEC的半数抑制浓度为1.0μmol/L。4组各时间点MDA、GSH-Px水平比较,差异有统计学意义(P<0.05)。4组12 h时SOD水平比较,差异有统计学意义(P<0.05)。4组MGMT、MLH1基因呈现部分甲基化状态。4组24 h时MGMT蛋白表达水平比较,差异有统计学意义(P<0.05),而在12、48 h时比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论缺锌会致使经MNNG诱导的HEEC出现氧化应激、MGMT和MLH1基因甲基化和MGMT蛋白异常表达。

叶酸对MNNG诱导的食管上皮细胞MAPK信号通路调控的干预研究

目的探究叶酸对N-甲基-N'-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)诱导的人食管上皮细胞MAPK信号通路中关键因子表达情况的影响,为食管癌的营养防治提供理论依据。方法紫外分光光度法测定食物中亚硝酸盐的含量;采用Western Blot检测MAPK通路中关键因子ERK1/2、p38及其磷酸化蛋白表达情况。结果①抽取的桂林当地两市场米粉、酸笋、酸豆角中均含有少量亚硝酸盐,但其含量未超出国家标准;②经MNNG和不同浓度叶酸作用于人食管上皮细胞后,与对照组相比,除24h p38蛋白表达外,MNNG+叶酸中剂量组细胞ERK1/2、p38及其磷酸化蛋白表达水平均明显增高(t_(ERK1/2,12)=6.497,t_(ERK1/2,24)=18.873,t_(ERK1/2,48)=18.000,t_(p-ERK1/2,12)=82.452,t_(p-ERK1/2,24)=25.404,t_(p-ERK1/2,48)=28.206,t_(p38,12)=8.966,t_(p38,48)=22.808,t_(p-p38,12)=18.618,t_(p-p38,24)=44.156,t_(p-p38,48)=47.600;P<0.05);在作用不同时间时,随叶酸浓度增加细胞ERK1/2、p38及其磷酸化蛋白表达水平均降低(F_(ERK1/2,12)=26.892,F_(ERK1/2,24)=240.256,F_(ERK1/2,48)=26.210,F_(p-ERK1/2,12)=47.849,F_(p-ERK1/2,24)=318.176,F_(p-ERK1/2,48)=133.843,F_(p38,12)=4.533,F_(p38,24)=135.239,F_(p38,48)=156.389,F_(p-p38,12)=48.534,F_(p-p38,24)=3504.359,F_(p-p38,48)=115.241;P<0.05);在不同浓度叶酸作用,除中低剂量组ERK1/2蛋白表达外,不同时间组细胞ERK1/2、p38及其磷酸化蛋白表达水平有明显变化(F_(ERK1/2),高=165.046,F_(p-ERK1/2,低)=35.323,F_(p-ERK1/2),中=48.377,F_(p-ERK1/2,高)=8.083,F_(p38,低)=36.762,F_(p38,中)=60.923,F_(p38,高)=29.482,F_(p-p38,低)=169.324,F_(p-p38,中)=65.286,F_(p-p38,高)=29.256;P<0.05),低剂量组细胞各蛋白呈先增加后减少趋势,其余剂量组细胞呈现先减少后增加趋势。结论叶酸对MNNG诱导的人食管上皮细胞MAPK信号通路中关键因子ERK1/2、p38及其磷酸化蛋白表达具有一定的干预作用,在一定程度上对食管癌的防治提供了科学理论依据。