主动脉弓缩窄术和腹腔注射IPH致小鼠慢性心衰两种模型的比较和评价

目的:比较和评价主动脉弓缩窄术与腹腔注射盐酸异丙肾上腺素(isoprenaline hydrochloride,IPH)两种方法所建立的小鼠慢性心力衰竭(chronic heart failure,CHF)模型的差异及优缺点。方法:将24只6～8周雄性C57BL小鼠随机分为4组,即正常对照组(N组)、假手术组(A组)、药物模型组[腹腔注射15 mg/(kg.d)的IPH,B组]和手术模型组(主动脉弓缩窄术,C组),每组6只小鼠(n=6)。采用主动脉弓缩窄术和腹腔注射IPH建立小鼠CHF模型。分别于术后8周及连续腹腔注射IPH 11 d后8周,测量心脏质量/体质量比(HW/BW)、左室舒张末期内径(LVEDD)、左室收缩末期内径(LVEDS)、左室射血分数(LVEF)和短轴缩短率(FS)。使用PCR及琼脂糖凝胶电泳分析的方法检测心肌组织中心房钠尿肽(atrial natriuretic peptide,ANP)、脑尿钠肽(brain natriuretic peptide,BNP)、肌球蛋白重链(α-MHC)表达的水平,并行病理学检查。结果:主动脉弓缩窄术与腹腔注射IPH均成功地建立小鼠CHF模型。与N组比较,B组LVEDS增高36.06%,LVEF和FS分别降低24.88%和29.22%(P<0.01),单位面积下心肌细胞的数目减少24.80%(P<0.01)。与N组比较,C组的HW/BW明显升高(P<0.01),LVEDD和LVEDS分别增高27.42%和54.81%,LVEF、FS分别降低37.40%和42.17%(P<0.01),单位面积下心肌细胞的数目减少48.39%(P<0.01)。C组较B组HW/BW明显升高(P<0.01),单位面积下心肌细胞的数目减少更为显著(P<0.01)。结论:C组与B组相比,可以更良好地模拟后负荷增高导致的心力衰竭(HF),其病理生理过程与高血压导致的HF更接近,且与N组相比显著性较好,是理想的HF模型。

阿替洛尔对小鼠心肌肥厚干预作用的研究

目的:观察β1受体阻滞剂阿替洛尔(atenolol,ATE)对主动脉弓缩窄术(aortic arches constriction,AAC)诱导的C57BL小鼠心肌肥厚模型的治疗作用。方法:通过AAC建立心肌肥厚小鼠模型,将24只雄性C57BL小鼠随机分为正常对照组、假手术(Sham)组、AAC组和AAT+ATE组,每组6只小鼠(n=6)。给予ATE 4周后,进行心脏超声检查,并测量心脏质量/体质量(HW/BW)、左心室质量/体质量(LVW/BW)、左室舒张末期内径(LVEDD)、左室收缩末期内径(LVEDS)、左室射血分数[LVEF(%)]和短轴缩短率[FS(%)]。应用PCR检测心肌组织中心房钠尿肽(ANP)、脑尿钠肽(BNP)和肌球蛋白重链(α-MHC)基因表达的水平,并行病理学检查。结果:与AAC组比较,正常对照组、Sham组和AAC+ATE组的LVEDD分别降低24.9%、17.7%和18.2%,LVEDS分别降低32.9%、34.1%和26.3%;LVEF(%)分别提高65.6%、75.8%和49.5%,FS(%)分别提高79.7%、100.0%和62.6%(均P<0.05);AAC+ATE组与AAC组相比,LVM/BW和心肌细胞平均横截面积均明显降低(P<0.01);而与正常对照组相比,细胞平均面积明显增大(P<0.05)。AAC+ATE组中ANP、BNP和α-MHC的表达水平显著低于AAC组(P<0.05)。结论:通过阻断β1受体ATE,可以对压力超负荷等原因诱导的心肌肥厚发挥治疗作用。

海莲叶提取物抑制非小细胞肺癌A549细胞增殖、侵袭、迁移并促进细胞凋亡

目的研究海莲叶提取物对非小细胞肺癌A549细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移能力的影响。方法将非小细胞肺癌A549细胞分成Control组(0μg·mL^(-1)海莲叶提取物处理)、BSLE-L组(10μg·mL^(-1)海莲叶提取物处理)、BSLE-M组(20μg·mL^(-1)海莲叶提取物处理)、BSLE-H组(30μg·mL^(-1)海莲叶提取物处理)、BSLE-M+Jagged1-Fc组(20μg·mL^(-1)海莲叶提取物和Notch信号通路激活剂Jagged1-Fc处理)。采用MTT实验检测细胞增殖,平板克隆实验检测细胞克隆形成能力,流式细胞术检测细胞凋亡变化,Transwell小室检测细胞迁移和侵袭能力,Western blotting检测细胞中Bax、Bcl-2、vimentin、E-cadherin、MMP-2、Notch-1、NICD-1和Hes-1蛋白表达变化。结果与Control组比较,BSLE-L、BSLE-M、BSLE-H组细胞存活率和克隆形成数目依次降低,细胞凋亡率依次升高,细胞侵袭数目、迁移数目依次降低,细胞中Bax、E-cadherin蛋白表达水平依次升高,vimentin、MMP-2、Bcl-2、Notch-1、NICD-1和Hes-1蛋白表达水平依次降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。与BSLE-M组比较,BSLE-M+Jag‐ged1-Fc组细胞存活率和克隆形成数目显著升高,细胞凋亡率显著降低,细胞迁移和侵袭数目显著升高,细胞中Bax、E-cadherin蛋白表达水平显著降低,Bcl-2、vimentin、MMP-2、Notch-1、NICD-1和Hes-1蛋白表达水平显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论海莲叶提取物可抑制非小细胞肺癌A549细胞增殖、侵袭、迁移、上皮间质转化(EMT),诱导细胞凋亡,其作用机制与降低Notch信号通路激活水平有关。

胸腔镜下肺癌根治术与常规开胸手术治疗肺癌的疗效比较

目的 比较胸腔镜下肺癌根治术与常规开胸手术治疗肺癌的临床疗效。方法 选取120例肺癌患者,随机分为2组各60例,A组采取胸腔镜下肺癌根治术,B组采取常规开胸手术,比较2组术前与术后7d肺功能、免疫炎症指标,比较2组手术指标、术后恢复情况及并发症情况。结果 术后7d,2组用力肺活量(FVC)、最大通气量(MVV)、第1秒用力肺活量(FEV1)、免疫球蛋白M(IgM)、免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白A(IgA)、CD4^+/CD8^+均显著降低(P<0.05),C反应蛋白(CRP)水平显著升高(P<0.05),B组降低与升高程度更为显著(P<0.05)。2组淋巴结清扫数比较无显著差异(P>0.05)。A组手术时间、术中出血量、术后引流量均显著优于B组(P<0.05),置管时间、住院时间显著短于B组(P<0.05)。A组术后并发症总发生率为6.67%,显著低于B组的21.67%(P<0.05)。结论 相较于常规开胸手术,胸腔镜下肺癌根治术创伤小,患者术后炎症反应轻,并发症少,对机体免疫功能与肺功能影响小,可缩短康复进程。

膈神经钳夹在胸腔镜下肺上叶切除术中的应用效果

目的探讨膈神经钳夹在胸腔镜下肺上叶切除术中的应用效果。方法选择2015年9月至2019年5月于我科行胸腔镜下肺上叶切除并系统纵隔淋巴结清扫术的69例患者为研究对象,将其按治疗方法的不同分为A组(34例,钳夹膈神经5 s)及B组(35例,未钳夹膈神经)。比较两组患者术后胸腔引流量、置管时间、PAL发生情况;比较两组患者术后3 d氧分压、胸腔残腔及术后行负压吸引/人工气腹术/重新放置胸腔引流管情况;比较两组患者术后50 d肺功能及膈膨升情况。结果 A组术后胸腔引流量显著少于B组,置管时间显著短于B组,PAL发生率显著低于B组(P<0.05)。两组患者术后3 d血氧分压比较,差异无统计学意义(P>0.05)。A组中13例患者术后3 d胸腔内有残腔,B组中27例患者术后3 d胸腔内存在残腔;A组术后3 d胸腔内存在残腔患者占比显著低于B组(P<0.05)。A组中有4例患者术后需要行负压吸引/人工气腹术/重新放置胸腔引流管,B组中有27例患者术后需要行负压吸引/人工气腹术/重新放置胸腔引流管;A组术后需要行负压吸引/人工气腹术/重新放置胸腔引流管患者占比显著低于B组(P<0.05)。两组患者术后50 d FEV1、FVC及膈膨升发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论短暂钳夹膈神经可作为胸腔镜肺上叶切除术后减少胸膜腔残腔的一种便捷、安全、有效的选择。

胸腔镜肺段切除术治疗老年早期非小细胞肺癌近期疗效及对患者肺功能的影响研究

目的:研究胸腔镜肺段切除术治疗老年早期非小细胞肺癌(NSCLC)的近期疗效及对患者肺功能的影响。方法:收集老年NSCLC患者69例,根据患者手术方式将其分为段切组(胸腔镜肺段切除术,n=33)与叶切组(胸腔镜下肺叶切除术,n=36),观察两组手术效果。结果:段切组中,13例患者肿瘤位于左肺,10例患者肿瘤位于右肺;叶切组中,16例患者肿瘤位于左肺,20例患者肿瘤位于右肺。病理检查提示,两组病理类型比较有统计学差异(P<0.05),其中全切组患者以微浸润性腺癌为主,叶切组以浸润性腺癌为主,两组病理分期比较无统计学差异(P>0.05);两组淋巴结清扫个数、纵膈淋巴结清扫站数及纵膈淋巴结清扫个数比较均无统计学差异(P>0.05);两组手术时间比较无统计学差异(P>0.05),段切组患者术中出血量、术后总引流量、胸腔引流量、术后应用抗生素时间、ICU停留时间及术后住院时间均显著少于/短于叶切组(P<0.05);两组术后并发症比较无统计学差异(P>0.05);Log Rank检验提示,两组3年生存情况比较无统计学差异(P>0.05)。结论:胸腔镜肺段切除术能保留更多的肺组织,术后残腔小,能减少术后引流量,降低术后并发症率,利于老年NSCLC患者术后早期恢复,且远期疗效与胸腔镜肺叶切除术相似。

非小细胞肺癌GATA4启动子甲基化检测及其对细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨GATA4启动子甲基化对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞系A549的增殖和凋亡的影响。方法采用甲基化特异性PCR(MSP)法检测人正常肺上皮细胞系BEAS-2B和人NSCLC细胞系A549中GATA4启动子的DNA甲基化水平;采用Real-time PCR检测细胞GATA4的mRNA水平。采用DNA甲基化抑制剂5-Aza-2′deoxycytidine处理细胞,观察细胞GATA4 mRNA的表达水平;采用CCK-8检测细胞增殖率;采用Western blot检测细胞增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)、cleaved-caspase 3和caspase 3;用流式细胞术检测细胞凋亡。结果A549细胞GATA4启动子甲基化率显著高于BEAS-2B细胞[(3.383±0.614)%比(35.53±1.89)%,t=16.14,P<0.01];A549细胞GATA4 mRNA水平明显低于BEAS-2B细胞(1.000±0.000比0.358±0.027,t=23.98,P<0.01);抑制A549细胞GATA4的DNA甲基化后,其GATA4 mRNA水平升高(1.000±0.000比3.100±0.188,t=11.17,P<0.01);DNA甲基化抑制剂5-Aza-2′deoxycytidine抑制A549细胞的增殖,且PCNA的表达降低(0.998±0.003比0.721±0.020,t=13.74,P<0.01)、cleaved-caspase 3/caspase 3的比值增高(0.998±0.003比1.682±0.051,t=13.50,P<0.01)、细胞的凋亡率增加[(6.222±0.399)%比(14.990±0.690)%,t=11.00,P<0.01]。结论NSCLCGATA4启动子甲基化水平增高,导致GATA4 mRNA表达降低,诱导细胞增殖并抑制其凋亡。

肺韧带处理方式对单侧右部肺癌行胸腔镜下右肺上叶切除术患者余肺代偿性膨胀的影响

目的探讨肺韧带的处理方法对胸腔镜下行右肺上叶切除术的肺癌患者的术后余肺代偿性膨胀情况的影响。方法选取肺癌行胸腔镜下右肺上叶切除术的患者98例,随机分为2组。观察组患者术中松解下肺韧带,对照组患者则不松解。比较2组患者术后病理检查结果、手术时间与术后恢复情况、余肺膨胀情况。结果2组患者手术时间、术后引流量、引流时间与平均住院时间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。观察组患者术后7d内余肺膨胀情况优于对照组。结论胸腔镜下行右肺上叶切除的肺癌患者在手术中松解下肺韧带对术后余肺代偿性膨胀有积极影响。

miR-204通过抑制OGT的表达调控非小细胞肺癌细胞的增殖和迁移

目的:探究miR-204和O-连接N-乙酰氨基葡萄糖转移酶(O link N-acetylglucosamine transferase,OGT)对非小细胞肺癌(Non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞增殖和转移的影响,并深入分析其可能机制。方法:采用Oncomine及KM-Ploter数据库分析OGT在肺癌组织中的表达及与肺癌患者预后的关系;采用慢病毒转染人非小细胞肺癌A549及永生化人肺支气管上皮细胞BEAS-2B,分别构建OGT稳定下调和过表达的细胞系,利用CCK-8、平板克隆和裸鼠皮下成瘤实验检测细胞增殖的情况,划痕实验、Transwell实验和裸鼠尾静脉注射肺转移模型检测细胞转移的情况。利用数据库分析可能参与OGT调控的microRNA,并用双荧光素酶报告基因验证。利用TCGA数据库分析miR-204在肺癌中的表达情况,并在30例肺癌组织及其对应癌旁组织中分析miR-204与OGT之间的相关性。结果:OGT在肺癌组织中呈高表达,且与患者的不良预后相关(HR=1.22,P <0.01);OGT的表达上调肺癌细胞的增殖和转移;miR-204可以负向调控OGT的表达,且miR-204在肺癌组织中表达水平显著低于癌旁组织,在肺癌组织中miR-204的水平与OGT的表达水平呈负相关(R^2=-0.4729,P <0.01)。结论:在非小细胞肺癌中,miR-204的降低通过上调OGT的表达促进肺癌的增殖和转移。