依托咪酯通过下调含WW结构域的E3泛素蛋白连接酶2表达抑制非小细胞肺癌A549细胞增殖并诱导其凋亡的实验研究

目的探讨依托咪酯(ETO)对非小细胞肺癌(NSCLC)A549细胞增殖和凋亡的影响及含WW结构域的E3泛素蛋白连接酶2(WWP2)在其中发挥的作用机制。方法分别采用0、1、2和3 mg/L的ETO处理人正常肺上皮细胞系BESA-2B和人NSCLC细胞系A549,细胞计数试剂盒法检测细胞活力;将A549细胞随机分为对照组、ETO(3 mg/L)组、ETO+NC组和ETO+WWP2-OE组,后2组分别于ETO处理后转染空载体pcDNA3.1-NC或WWP2过表达载体pcDNA3.1-WWP2,集落形成试验检测细胞增殖能力;TUNEL染色检测细胞凋亡;实时荧光定量聚合酶链反应法检测各组细胞中WWP2的mRNA表达;STITCH数据库选择与ETO直接相互作用的蛋白质;蛋白质印迹法检测各组细胞中WWP2、增殖、凋亡和磷酸酶与张力蛋白同源物(PTEN)/磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)通路相关蛋白表达。结果ETO以剂量依赖性方式显著降低A549细胞活力(F=147.923,P<0.001);而对正常肺上皮BESA-2B细胞活力无影响(F=1.427,P=0.126)。不同浓度(0、1、2、3 mg/L)ETO处理A549细胞后,集落形成数量逐渐减少[0、1、2、3 mg/L ETO组分别为(898±38)、(785±48)、(635±36)、(388±20)个],细胞凋亡率逐渐升高[0、1、2、3 mg/L ETO组分别为(2.23±0.65)%、(7.63±0.35)%、(13.24±0.47)%、(18.93±0.36)%],呈剂量依赖性(F=218.732、352.786,均P<0.001)。STITCH数据库预测ETO可通过上调WWP2蛋白表达和下调PTEN蛋白表达与WWP2和PTEN相互作用。与对照组相比,ETO组细胞中WWP2的mRNA和蛋白表达降低,集落形成数量减少,细胞凋亡率升高,增殖细胞核抗原(PCNA)、细胞增殖抗原Ki67、B淋巴细胞瘤基因2(Bcl-2)和PTEN蛋白表达降低,Bcl-2相关X蛋白(Bax)和含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved caspase-3)蛋白表达升高,磷酸化PI3K(p-PI3K)/PI3K和磷酸化Akt(p-Akt)/Akt比值降低(均P<0.01);与ETO+NC组比较,ETO+WWP2-OE组细胞中WWP2的mRNA和蛋白表达升高,集落形成数量增多,细胞凋亡率降低,PCNA、Ki67、Bcl-2和PTEN蛋白表达增多,Bax和Cleaved caspase-3蛋白表达减少,p-PI3K/PI3K和p-Akt/Akt比值升高(均P<0.01)。结论ETO可抑制A549细胞增殖并促进细胞凋亡,其作用机制可能与调控WWP2的下调和PTEN/PI3K/Akt通路的激活有关。

右美托咪定用于气管异物患儿气管拔管的镇静效果

目的观察术前给予右美托咪定对气管异物取出术患儿气管拔管的镇静效果。方法气管异物取出术患儿60例,随机均分为两组,分别在全麻诱导前10min内静脉输注右美托咪定0.5μg/kg(D组)或生理盐水(C组)。术中丙泊酚2mg·kg-1·h-1、瑞芬太尼0.1μg·kg-1·h-1维持麻醉。记录拔管前1min、拔管时、拔管后1、5min时的HR、MAP、RR、Ramsay镇静评分的变化,以及拔管期间呛咳和躁动情况。结果 D组HR、RR、MAP、呛咳评分和躁动评分低于C组(P<0.05),Ramsay镇静评分高于C组(P<0.05)。结论术前给予右美托咪定可为气管异物患儿苏醒期提供较好的镇静,减少拔管期间躁动和呛咳。

羟考酮与舒芬太尼对宫颈癌根治术镇痛衔接效果的临床观察

目的比较羟考酮与舒芬太尼对宫颈癌根治全麻术后镇痛衔接的有效性和安全性。方法采用随机双盲对照研究,选取宫颈癌根治全麻手术患者68例,随机分为S组(舒芬太尼镇痛衔接,n=35)和O组(羟考酮镇痛衔接,n=33)。手术结束前30 min,S组给予舒芬太尼(腔镜手术0.1μg/kg或剖腹手术0.15μg/kg),O组给予羟考酮(腔镜手术0.1 mg/kg或剖腹手术0.15 mg/kg)。记录术后意识恢复时间、拔管时间、RSS躁动评分、呛咳次数、Ramsay评分及拔管即刻(T0)与拔管后30 min(T1)、1 h(T2)、2 h(T3)、4 h(T4)和术后12 h(T5)、24 h(T6)的静态NRS评分及术后24 h内的不良并发症。结果与S组比较,O组患者意识恢复时间短[(4.28±3.35 vs.5.53±2.25)min,P=0.027],拔管时间短[(5.92±3.67 vs.8.09±2.49)min,P=0.001],苏醒期RSS躁动评分低(0.38±0.49 vs.0.83±0.63,P<0.001),呛咳次数少(0.96±0.78 vs.1.34±0.93,P=0.026),Ramsay评分低(2.3±0.58 vs.2.63±0.85,P=0.017);O组患者T3和T4的静态NRS评分低于S组(2.64±0.63 vs.3.14±0.66;2.86±0.81 vs.3.69±0.75),差异均有统计学意义(P<0.001)。O组患者恶心发生率和呕吐发生率低于S组(9.09%vs.20%;3.03%vs.11.43%)。结论羟考酮和舒芬太尼均能在宫颈癌根治全麻术后的镇痛衔接中提供满意的镇痛效果,羟考酮的镇痛时间长于舒芬太尼,且苏醒快,不良并发症少。

普瑞巴林联合B超引导胸椎旁神经阻滞治疗带状疱疹后神经痛30例

目的分析普瑞巴林联合B超引导下胸椎旁神经阻滞治疗带状疱疹后神经痛的有效性与安全性。方法选择2017年1月至2018年8月陕西省杨凌示范区医院疼痛科收治的60例胸背段带状疱疹后神经痛病人为研究对象,随机数字表法分为对照组和观察组,各30例。对照组采用单纯口服普瑞巴林,第1~2天每次75 mg,2次/天;第3天开始每次150 mg,2次/天。疗程4周,治疗期间停用其他镇痛药。观察组采用口服普瑞巴林联合B超引导下胸椎旁神经阻滞治疗,普瑞巴林用法同对照组,超声引导下向每个受累神经根分别注射混合药液5 mL(复方倍他米松1 mL+腺苷钴胺1.0 mg+2%利多卡因2 mL+0.9%氯化钠溶液稀释至10 mL),每周1次,连续4周。比较两组治疗前及治疗后1周、2周、3周、4周、5周后的视觉模拟评分法(VAS)评分和匹兹堡睡眠质量指数(PSQI),治疗后5周的疼痛缓解度,治疗有效率以及不良反应发生情况。结果对照组和观察组治疗后较治疗前的VAS评分和PSQI均降低,差异有统计学意义(P<0.05);对照组与观察组治疗前VAS评分和PSQI差异无统计学意义(P>0.05);观察组治疗后1周、2周、3周、4周、5周后VAS评分和PSQI均明显低于对照组(P<0.05);两组治疗后5周疼痛缓解度差异有统计学意义(P<0.05);观察组治疗后5周治疗总有效率86.7%明显高于对照组56.7%(P<0.05);两组不良反应差异无统计学意义(P>0.05)。结论采用普瑞巴林联合B超引导下胸椎旁神经阻滞可以有效缓解带状疱疹后遗神经痛,改善病人睡眠质量,安全、精准、有效。

预防性应用不同剂量羟考酮对妇科肿瘤剖腹手术术后急性疼痛的影响

目的:评价预防性应用不同剂量羟考酮对妇科肿瘤剖腹手术术后急性疼痛的影响。方法:采用随机双盲对照研究,选取妇科肿瘤全麻剖腹手术患者60例,随机分为两组:A组(n=30)和B组(n=30)。术毕前30 min给予预防性镇痛,A组羟考酮0.10 mg/kg,B组羟考酮0.15 mg/kg。分别记录术后意识恢复时间、拔管时间、RSS躁动评分、Ramsay评分、术后1 h(T1)、术后6 h(T2)、术后12 h(T3)、术后24 h(T4)的静态NRS评分及术后24 h的不良反应。结果:B组患者与A组相比,RSS躁动评分和T1、T2的静态NRS评分低,差异均有统计学意义(P<0.05)。两组患者的意识恢复时间、拔管时间、Ramsay评分和24 h内的不良反应均无统计学差异。结论:预防性应用0.15 mg/kg盐酸羟考酮注射液能够有效减轻妇科肿瘤剖腹手术术后急性疼痛的程度,且不影响患者术后苏醒,安全性较高。

盐酸羟考酮注射液用于门诊无痛胃肠镜检查及治疗的临床观察

目的:观察盐酸羟考酮复合丙泊酚用于门诊无痛胃肠镜的麻醉效果。方法:门诊ASAⅠ-Ⅱ级无痛胃肠镜检查及治疗的患者96例,随机分为2组,即丙泊酚复合盐酸羟考酮组(A组)45例、丙泊酚复合芬太尼组(B组)51例,记录入室后(T1)、置镜前(T2)、镜子完全置入即刻(T3)、出镜后(T4)4个时间点的MAP、HR、RR、SPO2及意识恢复时间、呼吸抑制发生率、恶心呕吐发生率、体动例数、检查结束15min后Ramsay评分,丙泊酚用量等。结果:两组在4个时间点HR相比均无显著性差异(P>0.05),两组MAP在T2,T3及T4时间点与T1时间点相比均具有显著性差异(P<0.05)。B组的RR、SPO2在T3时间点与T1时间点相比具有显著性差异(P<0.05),与A组T3时间点相比也具有显著性差异(P<0.05)。A组与B组相比意识恢复快,丙泊酚用量少,呼吸抑制发生少,镇静镇痛效果好。结论:丙泊酚复合盐酸羟考酮可安全用于门诊无痛胃肠镜检查及治疗。

地佐辛超前镇痛对乳腺癌根治术患者围术期免疫功能及应激反应的影响

目的探讨地佐辛超前镇痛对乳腺癌根治术患者围术期免疫功能及应激反应的影响。方法选取2014年6月至2015年5月在陕西省肿瘤医院进行单侧乳腺癌改良根治术的女性患者80例，使用随机数字表法分为地佐辛组和对照组，各40例。诱导前15min地佐辛组给予地佐辛5mg静脉注射作为超前镇痛，对照组给予5ml 0．9％氯化钠注射液。记录2组患者的手术时间、术中出血量，使脂流式细胞仪检测2组患者麻醉前30min、手术开始后2h、术后24、48、120h的CD3＋、CD4＋、CD8＋T细胞亚群和自然杀伤（NK）细胞（CD16＋ CD56＋）百分比并计算CD4＋／CD8＋比值，于麻醉前30min、术后2、12、24、48h使用放射免疫法检测患者血浆肾素、血管紧张素Ⅱ、醛同酮和皮质醇水平。结果地佐辛组患者术后24hCD3＋、CD4＋以及CD4＋／CD8＋比值均明显高于对照组，差异均有统计学意义[（52．3±4．8）％比（47．8±4．4）％、（27．4±2．5）％比（24．9±2．6）％、（1．12±0．18）比（1．01±0．15），均P〈0．05]；术后2h和术后24h的NK细胞水平均高于对照组，差异均有统计学意义[（14．8±2．0）％比（13．8±1．5）％、（14．4±2．2）％比（13．0±1．8）％，均P〈0．05]。术后12和24h血浆肾素、血管紧张素Ⅱ、醛同酮、皮质醇浓度均明显低于财照组，差异均有统计学意义[术后12h：（0．59±0．16）μg／L比（0．72±0．15）μg/L、（45±11）μg/L比（59±12）μg/L、（236±20）μg/L比（259±24）μg/L、（260±31）μg/L比（300±30）μg/L，术后24h：（0．67±0．15）μg/L比（0．89±0．16）μg/L、（43±10）μg/L比（57±8）μg/L、（221±25）μg/L比（267±28）μg/L、（265±30）μg/L比（286±30）μg/L，均P〈0．05]。结论乳腺癌根治手术患者同术期使用地佐辛超前镇痛后对T淋巴细胞亚群和NK细胞有保护作用，有利于患者免疫功能的恢复，可减轻手术创伤所产生的应激反应。

达克罗宁胶浆在乳腺癌手术喉罩全麻中的应用

目的:观察达克罗宁胶浆对喉罩全身麻醉行乳腺癌手术的患者喉罩置入时血流动力学及苏醒期咽喉舒适度的影响。方法:择期全身麻醉下行乳腺癌手术患者120例随机分成两组,每组60例。A组将石蜡油均匀涂抹至喉罩表面,快速诱导后置入。B组将盐酸达克罗宁胶浆均匀涂抹至喉罩表面,快速诱导后置入。两组均采用静吸复合全身麻醉,术中麻醉用药均相同。观察两组患者喉罩置入前后的心率、血压变化,麻醉苏醒期呛咳、呕吐发生率,以及术后24h咽痛发生率。结果:A组患者置入喉罩后心率、血压均高于置入喉罩前,差异有统计学意义(P<0.05)。B组患者置入喉罩后心率、血压与置入喉罩前比较差异无统计学意义(P>0.05)。B组麻醉苏醒期呛咳、呕吐发生率及术后24h咽痛发生率均低于A组(P<0.05)。结论:在喉罩全麻行乳腺癌手术中使用达克罗宁胶浆,可减轻喉罩置入时的血流动力学波动及术后咽喉部应激反应。

纳美芬对老年妇科肿瘤患者术后呼吸抑制的拮抗作用

目的:探讨纳美芬对老年妇科肿瘤患者术后呼吸抑制拮抗作用的有效性及安全性。方法:将行根治性手术的妇科肿瘤患者84例随机分为3组,A组(空白对照组)在手术结束待自主呼吸恢复后给予生理盐水;B组(纳洛酮组)给予纳洛酮;C组(纳美芬组)给予纳美芬,待病人清醒后拔除喉罩。比较观察3组患者的血流动力学变化,以及意识恢复时间、拔管时间、定向力恢复时间,拔管后5min意识状况评分,拔管30min后镇痛评分等指标。结果:应用纳美芬拮抗组和纳洛酮拮抗组意识恢复时间、拔管时间及定向力恢复时间均明显短于对照组(P<0.05),纳美芬拮抗组和纳洛酮拮抗组之间无显著性差异(P>0.05)。3组在用药时、用药后5min、10min、30min等4个时间点的血流动力学均无显著性差异(P>0.05)。Ramsay评分及VAS评分3组无显著性差异(P>0.05)。结论:纳美芬对老年妇科肿瘤患者术后呼吸抑制的拮抗作用效果确切,安全有效。

右美托咪定联合舒芬太尼用于宫颈癌患者术后镇痛的临床研究

目的探讨并研究右美托咪定联合舒芬太尼在宫颈癌术后镇痛中的应用。方法选取陕西省肿瘤医院2015年6月至2016年3月收治的80例行宫颈癌手术的患者,根据患者采用的术后镇痛方案分为对照组和试验组,各40例。对照组采用舒芬太尼进行术后镇痛,试验组采用舒芬太尼联合右美托咪定进行术后镇痛,比较两组患者的镇痛效果。结果两组患者各时间点的镇痛评分、生命体征差异不显著(P>0.05),试验组各时间点的镇静评分低于对照组(P<0.05)。试验组不良反应总发生率低于对照组(P<0.05)。结论右美托咪定联合舒芬太尼对宫颈癌患者术后具有良好的镇痛效果,血流动力学相对稳定,患者较为满意,临床应用安全有效。

羟考酮对腹腔镜妇科肿瘤手术全麻苏醒期疼痛的临床效果研究

目的评价不同剂量羟考酮缓解腹腔镜妇科肿瘤手术全麻苏醒期疼痛的临床疗效。方法选取2018年2月至2019年2月在陕西省肿瘤医院行腹腔镜妇科肿瘤全麻手术患者84例,采用随机、单盲、对照研究,随机分为A组(n=28)、B组(n=27)和C组(n=29)。手术结束前30 min,A组给予羟考酮0.05 mg/kg,B组给予羟考酮0.1 mg/kg,C组给予羟考酮0.15 mg/kg。比较3组术后3 h的VAS评分情况;记录3组术毕时(T0)、拔管即刻(T1)、拔管后5 min(T2)以及拔管后30 min(T3)的平均动脉压和心率变化;观察3组的苏醒期指标及并发症发生率。结果与A组相比,B、C两组患者术后3 h的VAS评分均降低,差异有统计学意义(P<0.001);B、C两组患者在T1、T2和T3的平均动脉压、心率及Riker镇静-躁动评分均降低,呛咳次数减少,差异有统计学意义(P<0.05);与A、B两组相比,C组患者意识恢复时间和拔管时间延长,差异有统计学意义(P<0.05)。3组患者术后3 h内的并发症发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论手术结束前30 min静脉注射0.1 mg/kg盐酸羟考酮注射液可有效减轻腹腔镜妇科肿瘤手术全麻苏醒期疼痛,缓解苏醒期躁动,维持生命体征平稳,且不影响全麻苏醒,不增加并发症。

脂氧素A4后处理对大鼠全脑缺血再灌注时细胞凋亡的影响

目的评价脂氧素A4时处理对大鼠全脑缺血再灌注时细胞凋亡的影响。方法雄性成年sD大鼠180只，体重200～250g，采用随机数字表法，将其分为3组：假手术组（S组）、缺血再灌注组（I／R组）和脂氧素A4后处理组（L组）。I／R组和L组采用四血管阻塞法建立大鼠全脑缺血再灌注损伤模型。L组于再灌注即刻侧脑室注射脂氧素A4100ng（用生理盐水稀释至5μl），s组和I／R组侧脑室注射生理盐水5μl。分别于再灌注2、6、12、24和72h时，处死6只大鼠，取脑组织，行HE染色，光镜下观察病理学结果，采用免疫组化法测定海马CA1区caspase-3表达。分别于再灌注2、6、12、24和72h时，处死6只大鼠，取海马组织，采用流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果与s组比较，I／R组和L组再灌注各时点海马CA1区caspase-3表达上调，海马组织细胞凋亡率升高（P〈0．01）；与I／R组比较，L组再灌注各时点海马CA1区caspase-3表达下调，海马组织细胞凋亡率降低（P〈0．01），病理学损伤减轻。结论脂氧素A4后处理减轻大鼠全脑缺血再灌注损伤的机制与下调caspase-3表达，减少细胞凋亡有关。

丙泊酚联合依托咪酯用于甲状腺癌手术麻醉诱导效果评价

目的探讨丙泊酚联合依托咪酯用于甲状腺癌手术全麻诱导期的效果。方法选取实施插管全麻手术治疗的甲状腺癌患者150例,随机分为A组(单纯丙泊酚麻醉诱导)、B组(丙泊酚+依托咪酯麻醉诱导,容积比1∶1)及C组(丙泊酚+依托咪酯麻醉诱导,容积比2∶1),每组50例。观察3组麻醉诱导前(T0)、诱导后1 min(T1)、气管插管即刻(T2)及插管后10 min(T3)这4个时间点的收缩压(systolic blood pressure,SBP)、舒张压(diastolic blood pressure,DBP)、心率(heart rate,HR)及脑电双频指数(bispectral index,BIS)的变化,并观察麻醉诱导时间、麻醉诱导期及术后不良反应。结果T1、T2、T3,B组、C组的SBP、DBP以及HR均高于A组(P<0.05)。与T0比较,A组T1、T2、T3的SBP、DBP和HR均降低(P<0.05)。与T0比较,B组、C组T1的SBP、DBP和HR均降低(P<0.05),与T0比较,T2、T3的SBP降低(P<0.05)。3组BIS不同时刻比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。C组麻醉诱导入睡时间早于A组和B组(P<0.05)。B组、C组麻醉诱导期不良反应发生率均低于A组(P<0.05)。B组、C组麻醉诱导期肌颤发生率较A组差异无统计学意义(P>0.05)。3组术后不良反应差异无统计学意义(P>0.05)。结论丙泊酚联合依托咪酯较单纯丙泊酚用于甲状腺癌手术全麻诱导期优势更明显,且容积比为2∶1的丙泊酚依托咪酯混合液血流动力学更平稳,不良反应少,更安全、有效。

PTD4-Cu,Zn-SOD原核重组表达载体的构建

目的 构建蛋白质转导结构域4-铜锌超氧化物歧化酶（PTD4-Cu,Zn-SOD）原核重组表达载体.方法 利用基因重组技术,设计Cu,Zn-SOD特异性引物和PTD4寡核苷酸序列,Cu,Zn-SOD基因进行PCR反应,产物进行鉴定、回收和纯化,以pET16b为载体,经Xho Ⅰ和BamH Ⅰ双酶切反应、连接反应和质粒转化,构建pET16b-Cu,Zn-SOD原核重组表达载体,再分别将PTD4基因和pET16b-Cu,Zn-SOD载体经Nde Ⅰ和Xho Ⅰ双酶切反应、连接反应和质粒转化,构建pET16b-PTD4-Cu,Zn-SOD原核重组表达载体,并进行限制性内切酶谱分析和基因测序.结果 成功构建了长度为6 207 bp的pET16b-PTD4-Cu,Zn-SOD原核重组表达载体,用Nde Ⅰ和BamH Ⅰ双酶切,得到约5.7 kb的载体片段和约510 bp的PTD4-Cu,Zn-SOD基因片段,与预期结果一致.pET16b-PTD4-Cu,Zn-SOD原核重组表达载体基因测序结果与预期的基因序列相比,碱基序列均正确.结论 成功构建了PTD4-Cu,Zn-SOD原核重组表达载体.

椎间孔镜下椎间孔扩大成形术治疗腰椎管狭窄症疗效分析

目的探讨经皮椎间孔镜下椎间孔扩大成形神经根减压术治疗单侧神经根症状的腰椎管狭窄症的临床疗效。方法单节段腰椎管狭窄症患者120例,采用椎间孔镜下椎间孔扩大成形术治疗者60例为观察组,行后路椎板切除椎管减压+椎弓根螺钉内固定治疗者60例为对照组;记录2组术中出血量、手术时间、住院时间、术中及术后并发症发生情况,记录术前和术后1 d及术后1、3个月视觉疼痛模拟(visual analogue scale, VAS)评分和Oswestry残疾指数(Oswestry disability index, ODI)评分,应用MacNab疗效标准评价临床疗效。结果观察组术中出血量[(21±2)mL]少于对照组[(300±69)mL](P<0.05),手术时间[(75±12)min]、住院时间[(6.0±0.8)d]均短于对照组[(160±35)min、(15.0±3.4)d](P<0.05);观察组术后1 d、1个月、3个月VAS评分[(2.74±0.83)、(2.15±0.72)、(2.27±0.58)分]、ODI评分[(33.85±5.93)、(32.56±6.28)、(31.74±5.28)分]均较术前[(6.71±0.73)、(63.82±7.13)分]降低(P<0.05),与对照组VAS评分[(2.61±0.62)、(2.09±0.37)、(1.75±0.44)分]、ODI评分[(45.70±5.33)、(34.64±6.15)、(32.41±3.82)分]比较差异无统计学意义(P>0.05);观察组治疗优良率(75.0%)、有效率(85.0%)与对照组(81.7%、91.7%)比较差异均无统计学意义(P>0.05);观察组5例术后出现神经反跳症状,1例因术中出血较多改行脊柱后路椎板减压手术;对照组2例术后发生足下垂,3例出现脑脊液漏。结论单侧神经根症状的腰椎管狭窄症患者采用经皮椎间孔镜下椎间孔扩大成形神经根减压手术治疗安全、微创,近期疗效确切。

开放楔形胫骨高位截骨术治疗膝关节内侧间室骨关节炎近期疗效观察

目的探讨膝关节内侧间室骨关节炎患者行开放楔形胫骨高位截骨术治疗的近期疗效及安全性。方法膝关节内侧间室骨关节炎患者17例,均行开放楔形胫骨高位截骨术治疗。记录手术时间、术中出血量、住院时间及术后并发症发生情况。术后随访,记录骨折愈合时间,比较术前及术后3个月患侧膝关节内外侧间室高度比、胫股角、疼痛视觉模拟评分(visual analogue scale, VAS)、美国特种外科医院(Hospital for Special Surgery, HSS)膝关节评分、美国膝关节学会评分(Knee Society Score, KSS)。结果 17例患者手术时间(61.2±29.7)min,术中出血量(65.0±21.0)mL,住院时间(9.6±2.7)d,骨折愈合时间(3.2±1.4)个月。术后3个月患侧膝关节内外侧间室高度比(0.37±0.19)大于术前(0.26±0.11)(P<0.05),胫股角[(168.10±2.47)°]小于术前[(179.10±5.20)°](P<0.05),VAS评分[(1.54±0.42)分]低于术前[(7.02±1.41)分](P<0.05),HSS膝关节评分[(80.35±5.01)分]、KSS评分[(82.35±9.39)分]高于术前[(54.28±5.41)、(60.48±8.95)分](P<0.05)。术后未发生下肢血栓、感染或神经损伤等并发症,1例伤口愈合不良者经换药后痊愈。结论开放楔形胫骨高位截骨术治疗膝关节内侧间室骨关节炎创伤小,并发症少,可有效缓解疼痛,改善关节功能,近期疗效满意。

蛋白质转导4型-铜锌超氧物歧化酶融合蛋白在人星形胶质细胞中穿膜能力和保护作用的研究

目的观察蛋白质转导4型-铜锌超氧物歧化酶融合蛋白（protein transduetion domain4-Cu,Zn superoxidedismutase fusion protein, PTD4-Cu,Zn-SOD）能否穿膜进入人星形胶质细胞、能否减轻人星形胶质细胞的缺氧损伤。方法①Westem blot：从干预时间（15、30、60min）和干预浓度（0．5、1．0、2．0μmol／L）两个方面观察融合蛋白能否穿膜。②实验分组：制备细胞缺氧损伤模型，按完全随机法分为对照组、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）组（SOD组）和PTD442u，Zn-SOD组（PTD4-SOD组），对照组加DMEM（dulbecco’s modified eagle’s medium，DMEM）培养基（不含血清），其余两组分别加入含有Cu，Zn-SOD和PTD4-Cu，Zn-SOD终浓度为2μmol／L的DMEM培养基，三组干预时间均为1h，用AnnexinV／PI凋亡试剂盒流式测凋亡，观察融合蛋白能否减轻细胞缺氧损伤。结果①对照组各组未发现明显的蛋白条带，SOD组各个干预时间点（15、30、60min）与对照组比较，差异无统计学意义（P〉0．05）；PTD4-SOD组在15、30min两个时间点与对照组比较，差异无统计学意义（P〉0．05）；在干预60min时与对照组比较，差异有统计学意义（P〈0．05）。②对照组各组未发现明显的蛋白条带，SOD组的各个剂量（0．5、1．0、2．0μmol／L）与对照组比较，差异无统计学意义（P〉0．05）；PTD4-SOD组在0．5、1．0μmol／L两个浓度与对照组比较，差异无统计学意义（P〉0．05）；在浓度为2μmol／L时与对照组比较，差异有统计学意义（P〈0．05）。③对照组的凋亡率为（27．03±0．50）％，SOD组凋亡率为（23．29±0．58）％，和对照组比较，差异有统计学意义（P〈0．05）；而PTD4-SOD组凋亡率为（12．06±0．19）％，与对照组比较，差异有统计学意义（P〈0．05）；PTD4-SOD组和SOD组比较，差异有统计学意义（P〈0．01）。结论①PTD4-Cu，Zn-SOD能进入体外培养的人星形胶质细胞内；细胞内融合蛋白的量随着培养的时间和加入融合蛋白浓度的增加而增加。②融合蛋白PTD4-Cu，Zn-SOD能减轻人星形胶质细胞缺氧损伤后的凋亡。

槲皮素对大鼠全脑缺血/再灌注后学习记忆损伤的保护机制

目的观察槲皮素对大鼠全脑缺血,再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)损伤后神经行为学、海马组织细胞凋亡和凋亡相关蛋白表达的影响,探讨槲皮素减轻全脑I/R损伤的机制。方法采用随机数字表法将72只SD大鼠分为4组(每组18只):假手术+vichcle组(S组)、I/R+vichcle组(I/R组)、I/R+槲皮素5mg·kg·d^-1组(Q5组)及I/R+槲皮素10mg·kg·d^-1组(Q10组),用4-VO法建立全脑I/R模型。从造模前3d开始,Q5组和Q10组分别以5mg·kg·d^-1和10mg·kg·d^-1的剂量给予0.05%、0.10%的槲皮素溶液灌胃,S组和I/R组则给予等容量的溶剂,每天1次,持续至观察结束。再灌注后第8天正式开始Morris水迷宫实验,记录各组大鼠第8天、第9天、第10天的逃避潜伏期和第11天的穿环指数,再灌注后24h TUNEL法和Annexin V-FITC/PI双染流式细胞仪检测海马CA1区细胞凋亡,Western blot检测海马组织Bcl-2、Bcl-xl、survivin、cleaved caspase-3、磷酸化蛋白激酶B(phosphorylated protein kinase B,p-Akt)和磷酸化-Bad(phosphorylated-Bad,p-Bad)的表达。结果与I/R组比较,Q5组和Q10组大鼠逃避潜伏期缩短(P<0.05),在目标象限游泳的时间延长(P<0.05),穿环指数亦明显提高(P<0.05);I/R组海马CA1区可见大量胞核黄染的阳性细胞,Q5组和Q10组可见少量阳性细胞,凋亡细胞比例较I/R组明显降低(P<0.05);与I/R组比较,Q5组和Q10组Bcl-2、Bcl-xl、survivin、p-Akt和p-Bad表达水平明显升高(P<0.05),cleaved caspase-3表达水平则明显降低(P<0.05)。结论槲皮素增加大鼠全脑I/R脑组织中p-Akt、p-Bad、Bcl-2、Bcl-xl、survivin的表达,抑制cleaved caspase-3的表达,抑制细胞凋亡,提高全脑I/R大鼠的学习和记忆能力。

PTD4．Cu，Zn—SOD融合蛋白的制备

目的制备蛋白质转导结构域4-铜锌超氧化物歧化酶（PTD4-Cu，Zn-SOD）融合蛋白。方法分别将pET16b-Cu，Zn-SOD蛋白和pET16b-PTD4-Cu，Zn-SOD重组质粒转化到大肠杆菌BL21感受态细胞E.coli BL21（DE3）中；加入诱导剂异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（终浓度0.84 mmol/L）孵育4 h，诱导Cu，Zn-SOD和PTD4-Cu，Zn-SOD融合蛋白表达；经过溶菌酶和超声裂解细菌，取上清液，行15% SDS-PAGE电泳分析目的蛋白的表达情况。利用Ni-NTA His结合树脂在天然条件下纯化获得Cu，Zn-SOD蛋白和PTD4-Cu，Zn-SOD融合蛋白，采用Western blot法鉴定目的蛋白。结果Western blot结果显示目的蛋白纯度为90%，可见分子量约为19 kDa的Cu，Zn-SOD蛋白条带和分子量约为20 kDa的PTD4-Cu，Zn-SOD融合蛋白条带。结论成功制备了PTD4-Cu，Zn-SOD融合蛋白。

单一切口髓内钉内固定治疗漂浮膝的疗效观察

目的探讨单一切口髓内钉内固定治疗漂浮膝的临床疗效。方法回顾性分析自2015-07—2018-04收治的漂浮膝8例,均采用单一切口顺行胫骨髓内钉,逆行股骨髓内钉内固定治疗,记录患者年龄,骨折分型(Fraser分型),手术总时间、术中出血量,术后3个月进行Karlstrom评分,Karlstrom评分优良率。结果全部患者均获骨性愈合,手术时间(105.6±12.8)min,术中出血量(80.6±21.4)ml,术后住院时间(8.0±2.1)d,1例切口感染经换药治愈。术后3个月膝关节Karlstrom评分:优4例,良3例,可1例。结论采用单一切口交锁髓内钉内固定治疗漂浮膝具有损伤小、恢复快等优点,是一种有效的治疗漂浮膝的方法。