盐酸克伦特罗与鲱鱼精DNA相互作用的研究

建立了紫外吸收光谱研究盐酸克伦特罗(CLB)与鲱鱼精DNA(hsDNA)相互作用的分析方法,初步探讨CLB与hsDNA相互作用的机理。在pH=7.00的磷酸盐缓冲溶液(PBS)中CLB与hsDNA存在相互作用。在温度为20℃时,CLB与hsDNA的结合常数K为1.23×104 L/mol,CLB与hsDNA相互作用的焓变△H=-13.67kJ/mol;熵变△S=31.67J/(mol·K),自由能△G=-22.99kJ/mol,确定了CLB与DNA的结合焓驱动占主导地位,结合方式可能为静电沟槽式结合。

扇贝多肽对H_2O_2诱导HaCaT细胞氧化损伤的作用

目的了解扇贝多肽对H2O2诱导的HaCaT细胞氧化损伤的保护作用及其机制。方法取对数生长期HaCaT细胞,随机分为正常对照组（细胞正常培养）、模型组（200μmol/L的H2O2作用12h）、扇贝多肽不同浓度组（低、中、高浓度,分别用1.42、2.84、5.68mmol/L的扇贝多肽预处理2h后,再给予200μmol/L的H2O2作用12h）,应用Hochest33258染色方法检测各组细胞凋亡率,CCK8检测细胞存活率,以二氢荧光黄双乙酸盐（DCFH-DA）为荧光探针、流式细胞术检测细胞内的活性氧（ROS）含量,蛋白印迹法检测生长阻滞和DNA损伤诱导修复基因45a（Gadd45a蛋白）的表达。结果与正常对照组比较,模型组的细胞凋亡率明显升高（F=439.80,q=38.24,P〈0.01）,细胞存活率下降（F=191.40,q=214.10,P〈0.01）,细胞内ROS含量增加（F=121.10,q=31.02,P〈0.01）,Gadd45a蛋白表达升高（F=66.59,q=14.57,P〈0.01）;与模型组比较,扇贝多肽各浓度组细胞凋亡率明显降低（q=9.60～25.82,P〈0.01）,细胞存活率升高（q=13.47～54.86,P〈0.01）,细胞内ROS减少（q=4.20～12.14,P〈0.01）,Gadd45a蛋白表达降低（q=4.04～15.55,P〈0.01）;扇贝多肽各浓度组间比较,随扇贝多肽浓度升高,细胞凋亡率下降,细胞存活率升高,细胞内ROS含量降低,Gadd45a的表达降低,差异有显著性（q=3.96～23.36,P〈0.05）。结论 1.42～5.68mmol/L扇贝多肽能够清除细胞内的ROS,抑制Gadd45a蛋白的表达,从而保护H2O2诱导的HaCaT细胞氧化应激损伤。

扇贝多肽对H_2O_2损伤HaCaT细胞的保护作用

[目的]建立H2O2诱导HaCaT细胞氧化应激损伤的体外模型，探讨扇贝多肽（PCF）对H2O2损伤HaCaT细胞的保护作用及其作用机制。[方法]采用不同浓度的H2O2（50、100、200、300、500μmol／L）作用HacaT细胞12h后，采用CCK-8法检测细胞存活率；用不同浓度（1．42、2．84、5．68mmol／L）的PCF分别处理细胞12h后．加入H2O，（300μmol／L）继续作用12h，采用CCK-8法检测细胞活力，采用酶生化法法测定细胞上清液中LDH活性以及细胞质中GSH—Px、T—AOC和CAT水平。l结果l与正常组相比，50～500μmol／L浓度的H2O2依赖性地引起HaCaT细胞氧化损伤，300μmol／L的H2O，使存活率降低到56％（P〈0．01）；与模型组相比，不同浓度的PCF均可保护H2O2诱导的氧化损伤，增加细胞存活率，降低细胞LDH的释放量，提高GSH—Px、T—AOC和CAT含量，增强细胞抗氧化作用。[结论]扇贝多肽能对抗H2O2诱导的氧化应激，对细胞受损具有保护作用，其机制可能与提高抗氧化酶活力有关。