环孢菌素A对小鼠T细胞活化影响的血清免疫药理学评价

目的 应用血清免疫药理学技术 ,探讨环孢菌素A(CsA)对T细胞体外活化的影响 ,以进一步揭示CsA免疫调节的分子机制 ,为临床用药提供理论依据。方法 分离小鼠淋巴结细胞 ,分别与CsA、5 %CsA血清预孵后 ,加入多克隆刺激剂继续培养共 2 4h。收获细胞 ,进行双色免疫荧光标记 ,以流式细胞术分析T细胞上CD6 9分子的表达情况。结果 在CsA和 5 %CsA血清作用下 ,ConA活化的T细胞CD6 9表达的百分率分别为 (2 4 15± 3 38) %和 (2 3 6 8±6 89) % ,与相应对照组 [分别为 (6 4 6 7± 5 88) %和 (6 4 35± 10 13) % ]相比较均有显著差异 (P <0 0 1) ;在CsA和5 %CsA血清作用下 ,PDB活化的T细胞CD6 9表达的百分率分别为 (78 86± 7 70 ) %和 (80 0 5± 9 91) % ,与相应对照组 [分别为 (84 79± 6 87) %和 (79 6 8± 4 17) % ]相比较均无显著差异 (P >0 0 5 )。结论 CsA(410nmol/L)和含CsA血清均可强烈抑制ConA刺激的T细胞活化 ,而对PDB刺激的T细胞活化无抑制效应。 5 %CsA血清与CsA单纯药物体外实验的结果相一致 。

放线菌酮体外强烈抑制小鼠活化T淋巴细胞CD69表达

目的 :利用淋巴细胞的早期活化标记物CD6 9的表达 ,探讨放线菌酮 (CHX)对T淋巴细胞体外活化的影响 ,以进一步揭示CHX对免疫系统的影响 .方法 :分离小鼠淋巴结细胞 ,与CHX预孵 1h ,加入多克隆刺激剂继续培养 ,总计培养 2 4h后收获细胞 ,进行双色免疫荧光标记 ,以流式细胞术对T细胞的CD6 9分子表达情况进行分析 .结果 :在CHX(终浓度 10 μmol/L)作用下 ,ConA和PDB活化的T细胞CD6 9表达百分率依次为 12 33%± 4 75 %、13 0 7%± 11 0 5 %,与对照组比较均有显著差异 (P <0 0 1) .结论 :CHX(10 μmol/L)对ConA、PDB活化的T淋巴细胞均显示了强烈的抑制效应 .

通痹灵对多克隆刺激剂作用下小鼠T细胞CD69表达影响的血清免疫药理评价

目的：应用血清免疫药理方法探讨通痹灵对T细胞体外活化的影响，以进一步揭示通痹灵的免疫调节分子机理，为临床用药提供理论依据。方法：分离小鼠淋巴结细胞，分别与CHX、5％CHX血清、CsA、5％CsA血清、5％通痹灵血清预孵后加入多克隆刺激剂继续培养，总计培养24h后收获细胞，进行双色免疫荧光标记，以流式细胞术对T细胞的CD69分子表达情况进行分析。结果：5％通痹灵作用下ConA活化的T细胞CD69表达百分率为（54．67±6．69）％，与相应对照［（64．35 ±10．13）%］比较有显著差异（P<0．05）；药物作用下PDB活化的T细胞CD69表达的百分率为（80．99±6．18）%，与相应对照［（79．68±4．17）％］比较无显著差异（P>0．05）。结论：通痹灵含药血清选择性地抑制ConA刺激的T细胞活化，而对PDB刺激的T细胞活化无影响；推测抑制类风湿关节炎疾病启动与发展中异常的T细胞活化，是通痹灵治疗类风湿关节炎重要机制之一；。

小鼠面神经损伤急性期T细胞CD69表达的研究

目的应用流式细胞技术探讨面神经损伤急性期T细胞功能状态及其病理生理意义,为揭示外伤性面瘫的神经免疫机制提供理论依据。方法制备面神经轴切损伤模型小鼠,分别于损伤后3天、2周分离小鼠肠系膜淋巴结(mesenteric lymph node,MLN)、术侧颈部引流淋巴结(cervical draininglymph node,CDLN)细胞,进行双色免疫荧光标记,以流式细胞术分析T细胞上CD69分子的表达情况。结果手术后3天,面神经损伤组颈部引流淋巴结T细胞CD69表达的百分率与相应手术对照组相比较差异有显著性(P=0.0457);而神经损伤组、手术对照组肠系膜淋巴结T细胞CD69表达的百分率与正常小鼠相比较差异无显著性(P值分别为0.2817、0.2724)。面神经轴切损伤后2周,神经损伤组CDLN的T细胞CD69表达的百分率仍然维持在较高水平,神经损伤组MLN的T细胞CD69表达的百分率出现上调,与相应对照组及术后3天时相比较差异均有显著性(P值分别为0.0082、0.0133)。结论面神经轴切损伤3天、2周时,颈部引流淋巴结存在T细胞活化并上调;在2周时,肠系膜淋巴结也出现低水平的T细胞活化。提示面神经损伤急性期,伴随着一个局部免疫应答向全身免疫应答转化的过程,在一定程度上有利于机体协调控制免疫应答的规模与方向。

放线菌酮对小鼠T细胞活化影响的血清免疫药理评价

目的 :利用淋巴细胞的早期活化标记物CD6 9的表达 ,探讨CHX对T淋巴细胞体外活化的影响。方法 :分离小鼠淋巴结细胞 ,分别与放线菌酮 (CHX)、CHX血清预孵 1h ,加入多克隆刺激剂继续培养 ,总计培养 2 4h后收获细胞 ,进行双色免疫荧光标记 ,以流式细胞术对T细胞的CD6 9分子表达情况进行分析。结果 :在CHX(终浓度10 μmol/L)、CHX血清作用下 ,ConA活化的T细胞CD6 9表达百分率依次为 (12 33± 4 75 ) %、(2 0 39± 6 32 ) % ,与相应对照 [分别为 (6 4 6 7± 3 0 0 ) %、(6 4 35± 10 13) % ]比较均有显著差异 (P <0 0 1) ;相应的 ,药物作用下PDB活化的T细胞CD6 9表达的百分率依次为 (13 0 7± 11 0 5 ) %、(6 10± 4 91) % ,与相应对照 [分别为 (84 79± 6 87) % (79 6 8± 4 17) % ]比较均有显著差异 (P <0 0 1)。结论 :CHX(10 μmol/L)、5 %的CHX血清对ConA、PDB活化的T淋巴细胞均显示了强烈的抑制效应 ,证明T细胞活化过程中CD6 9的表达存在蛋白质的从头合成 ,对“CD6 9表达中CD6 9分子可能储存于细胞浆及其表达的发生并不需要蛋白质的从头合成”这一观点提出质疑。

荧光金示踪技术评价面神经损伤裸鼠模型

目的建立免疫缺陷小鼠周围性面瘫模型并结合荧光金逆行示踪技术进行评价,并与相应野生型小鼠模型比较。建立稳定的免疫缺陷小鼠面神经损伤模型评价系统,为进一步揭示外伤性面瘫的神经免疫机制提供模型基础。方法外科无菌手术方法切断裸小鼠、野生型BABL/c小鼠面神经出茎乳孔主干,分别于脑干取材前2天行面神经断端涂抹荧光金示踪剂。面瘫第14天灌注固定动物后,标本自头侧至尾侧行连续冰冻切片,荧光显微镜下观察面神经运动神经元情况。用ImageProPlus5.1软件计数神经元数量。结果面神经轴切损伤后14天,荧光切片面神经运动神经元核团显示清晰,便于计数;裸小鼠组与野生型组神经元数目有显著性差异(分别为2423±20,2748±60,P=0.0011)。结论荧光金逆行示踪技术结合裸鼠面神经损伤模型评价系统是有效、易行的,为进一步揭示外伤性面瘫中以T细胞行为研究为中心的神经免疫机制提供模型基础。

颞骨骨折治疗与影像诊断分类探讨

目的结合病例分析,就颞骨骨折的手术选择、药物治疗、影像学诊断分类方法等进行探讨。方法选取该院2001年1月～2009年12月期间颞骨骨折患者64例,对手术选择、药物治疗、颞骨骨折影像诊断分类、预后等进行回顾性分析。结果按纵行、横行、混合型、其他分为4类,其中纵行骨折43例,横行骨折15例,混合型骨折4例,其他类型2例。64例病例中,仅有7例行颞骨骨折复位固定,其余经营养神经、改善微循环、激素、高压氧舱等保守治疗,面瘫、听力下降、眩晕等症状大多恢复或明显改善。讨论早期发现、早期诊断、早期治疗是颞骨治疗的关键。除凹陷性骨折采取复位内固定外,药物保守治疗仍然是颞骨骨折并发脑脊液耳鼻漏、面瘫、感音神经听力损失、眩晕、耳鸣的主要治疗方式。在传统颞骨骨折三分类法基础上的四分类法具有优点。

面神经修复及再生的组织工程学研究进展

包括面神经在内的神经缺损重建修复是周围神经外科的一大难题。材料工程学的发展极大地促进了周围神经损伤修复的研究,以许旺细胞为中心的神经再生微环境、组织工程神经桥接材料及组织工程神经评价系统是面神经组织工程的主要研究热点。现就以上领域的研究进展作一综述。

裸鼠面瘫模型诱导型一氧化氮合酶表达分析

目的结合形态学技术分析免疫缺陷小鼠的面神经损伤特点,为进一步深入探讨面神经修复再生的神经免疫病理机制提供实验基础。方法制备周围性面神经外伤模型。分别于术后3 d、2周灌注固定动物,收集脑干切片,免疫组化分析模型小鼠面运动神经元诱导型一氧化氮合酶(inducible nitricoxide synthase,iNOS)表达情况。并结合面神经周围主干锇酸染色情况分析裸鼠面神经损伤特点。结果免疫组化显示裸鼠术后3 d受损伤的面运动神经元iNOS强阳性表达,间以无iNOS表达的"健康"面运动神经元;裸鼠术后14 d术侧面运动神经元的诱导型iNOS已基本无表达。结论面神经轴切损伤早期,损伤的面运动神经元有诱导型iNOS表达,并存在一个时间动力学改变,这可能与面神经损害的发生及神经修复的启动相关。

细胞因子网络与头颈肿瘤发生

细胞因子(cytokine)是一类高活性、多功能的多肽,通过自分泌(autocrine)或旁分泌(paracrine)等方式参与细胞与细胞间的信息传递及功能调节。细胞因子间及其受体间相互作用,协同(synergistic)、抑制或拮抗(Antagonistic),组成复杂的细胞信息调控网络,称为细胞因子网络(cytokine network)。对头颈肿瘤发生进行研究,结合临床头颈肿瘤患者各种细胞因子及其受体水平的变化,细胞因子水平的异常导致的细胞因子网络失衡在头颈肿瘤发生过程中起重要作用。

免疫治疗对母胎交界面NK细胞表面CD69表达水平的影响及其与鼠胚和鼠仔预后的关系(英文)

目的 :研究反复自然流产 (recurrentspontaneousabortion ,RSA)模型CBA/J×DBA/ 2小鼠母胎交界面NK细胞表面CD69分子的表达水平 ,并评价淋巴细胞免疫治疗 (lymphocyteimmunotherapy,LIT)对CD69表达水平的影响及其与鼠胚和鼠仔预后的关系。方法 :评价CBA/J×DBA/ 2、C57BL/ 6×DBA/ 2和BALB/c×DBA/ 2小鼠胚胎和鼠仔的预后 ,绘制出生后 1 - 2 1d鼠仔离乳前生长曲线和Kaplan -Meier生存分析曲线。并且采用PE -CD69和FITC -DX5双色流式细胞术检测在有或无LIT的情况下 ,母胎交界面NK细胞表面CD69分子的表达水平。此外 ,对CD1 6/CD32 +NK细胞亚群等也进行检测。结果 :在孕期母鼠体重平均增长幅度、平均每窝产仔数、新生鼠仔出生第 1d平均体重和胚胎吸收率等方面 ,CBA/J×DBA/ 2小鼠与生殖力正常的对照组相比均有显著差异。在CBA/J×DBA/ 2小鼠中 ,代表活化型NK细胞的CD69+ DX5+ 细胞比率也显著高于对照组。而有效的LIT能够显著降低CD69在母胎交界面NK细胞表面的表达水平 ,并相应地显著降低胚胎吸收率。结论 :CD69+ DX5+ 细胞在胚胎被排斥的机制中可能具有重要作用。

高等医学教育中双语教学的认识与探讨

随着“以人为本，以患者为主体”的生物心理社会医学模式的建立，教育现代化、国际化成为国内教育发展的必然要求，以培养医学人才为目的的高等医学教育也必须顺应世界发展，适时调整培养内容与方法，满足新世纪医学高级专业技术人才培养的需要。双语教学作为时代的需求和产物，

老年突发性耳聋66例早期综合治疗的疗效

目的观察老年突发性耳聋早期综合治疗疗效。方法选取病程在7 d内的老年性突发性耳聋的患者66例(96耳),对照组72例(72耳)。给予糖皮质激素,前列地尔,银杏物提取剂,甲钴胺,纤溶酶,高压氧综合治疗;14 d为1个疗程。结果老年组治愈率13.64%,有效率59.09%,7 d内显效为33.33%;对照组治愈率20.83%,有效率80.56%;7 d内显效为56.89%;不同病程和听力损失程度与疗效的关系亦有统计学意义(P<0.05)。结论老年突发性耳聋要比其他年龄段患者疗效要差,并且显效时间要晚,疗程要长。

巨噬细胞毒素用于降低CBA/J×DBA/2小鼠胚胎吸收率

目的 :研究巨噬细胞毒素降低反复自然流产模型CBA/J×DBA/ 2小鼠胚胎吸收率的免疫机制 .方法 :在小鼠交配前腹腔注射变性蛋白质包被的二氧化硅颗粒 ,做为巨噬细胞毒素以去除巨噬细胞 ,观察胚胎吸收率和淋巴细胞亚群变化 ,进而分析淋巴细胞浸润与妊娠结局的关系 .结果 :二氧化硅预处理组平均每窝活胎数显著增多 (6 3± 1 5vs 3 5± 1 0 ,P <0 0 1) ,胚胎吸收率则显著下降 (18 2 %vs .38 2 %,P <0 0 5 ) .与此相应 ,CD3+ CD6 9+ 、CD3+ CD71+ 细胞比率和CD4 5 +MHC -II+ 、CD80 + MHC -II+ 细胞比率均显著降低 .结论 :体内注射巨噬细胞毒素可以显著降低CBA/J×DBA/ 2小鼠母胎交界面活化型T细胞和某些巨噬细胞亚型的比率 ,并且这种变化与胚胎吸收率的下降相联系 .

通痹灵总碱对大鼠机体细胞免疫的调节作用

[目的]研究通痹灵(TBL)的有效部位总生物碱对细胞增殖及T淋巴细胞转铁蛋白受体(CD71)的影响,探讨通痹灵调节细胞免疫的作用机理。[方法]培养大鼠淋巴细胞,刀豆蛋白(ConA)刺激72 h,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测通痹灵总碱对淋巴细胞增殖的影响;佛波醇酯(PDB)或ConA刺激48 h,流式细胞术检测T淋巴细胞CD71的表达率。[结果]不同浓度的TBL总碱可明显抑制ConA刺激下的淋巴细胞增殖;不同浓度的TBL总碱对PDB和ConA激活的T淋巴细胞CD71表达均有明显的下调作用,而且呈明显的量效关系,对ConA刺激下的CD71表达抑制要强于PDB。[结论]TBL总碱可抑制异常增殖的T淋巴细胞,其作用机制可能是通过抑制转铁蛋白受体来实现的。

淋巴细胞免疫治疗对小鼠自然流产模型母胎界面CD80^+表达及妊娠结局的影响

目的:评价CBA/J×DBA/2小鼠配对组合作为反复自然流产模型的生殖力特点,及其与母胎交界CD80表达间的关系,并研究淋巴细胞免疫治疗(lymphocyte immunotherapy,LIT)对CD80表达水平的影响。方法:对CBA/J×DBA/2小鼠的生殖力特点进行为期120d的观察,并与生殖力正常的4种对照组进行比较。另计算15对CBA/J×DBA/2小鼠孕13d的胚胎吸收率,并用CD80-FITC和CD45-PE双色流式细胞术检测CD80细胞在母胎交界面的构成比。为了明确CD80^+细胞的身份,检测了CD3、DX5(NK细胞)和MHC-Ⅱ在CD80细胞群中的表达水平。此外,检测LIT组与未治疗组CBA/J×DBA/2小鼠胚胎吸收率和CD80细胞的阳性率。结果:CBA/J×DBA/2小鼠的流产特点是为孕10d左右的反复流产。CBA/J×DBA/2小鼠孕13d的胚胎吸收率显著高于BALB/c×DBA/2小鼠(30.8％±16.6％vs.7.7％±6.7％,P<O.01)。与此相应,CBA/J×DBA/2小鼠母胎交界面CD80^+细胞检出率显著高于对照组(11.7％±5.8％vs.3.9％±1.8％,P<O.01)。LIT可有效降低CBA/J×DBA/2小鼠的胚胎吸收率,且胚胎吸收率的下降与母胎交界面CD80^+细胞检出率的下降相关。结论:CBA/J×DBA/2小鼠模型具有围着床期反复自然流产的特点。早期A丕胎吸收与较高的CD80^+细胞检出率相关,提示CD80^+细胞可能是围着床期反复流产的重?

通痹灵总碱对活化的小鼠T淋巴细胞CD69表达的影响

目的:研究通痹灵(TBL)总碱对活化的小鼠T淋巴细胞表达CD69的影响及其可能的免疫调控机制。方法:培养小鼠淋巴细胞,加入不同浓度的TBL总碱预孵1h后,再加佛波醇酯(PDB)或刀豆蛋白(ConA),24 h后,用流式细胞术检测T淋巴细胞CD69的表达率。结果:不同质量浓度的TBL总碱对PDB或ConA激活的T淋巴细胞表达CD69,均有明显的下调作用(对ConA激活的T淋巴细胞的作用要强于PDB激活的T淋巴细胞),呈明显的量效关系。结论:TBL总碱可明显抑制 活化的小鼠T淋巴细胞CD69的表达,为其用于类风湿性关节炎的治疗提供了实验依据。

在反复自然流产模型CBA/J×DBA/2小鼠血清中未检测出抗精子抗体

目的 :评价抗精子抗体 (anti -spermantibody ,AsAb)与反复自然流产 (recurrentspontaneousabortion ,RSA)小鼠模型CBA/J×DBA/ 2生殖力特点的关系 .方法 :对CBA/J×DBA/ 2小鼠的生殖力特点做为期 6 0d的观察 ,与生殖力正常的BALB/c×DBA/ 2小鼠进行比较 ,并检测上述雌鼠血清AsAb水平 .结果 :CBA/J×DBA/ 2小鼠平均每窝产仔数和雌雄同笼至第 1窝鼠仔出生的平均时间均与BALB/c×DBA/ 2小鼠有显著差异 ,分别为 (3 0± 1 1)只与 (6 1± 1 6 )只 ,P <0 0 0 1,和 (33 5± 7 1)d与 (2 5 8± 3 2 )d ,P <0 0 1.在这些CBA/J×DBA/ 2和BALB/c×DBA/ 2组合的雌鼠血清中均未检测出AsAb .结论 :CBA/J×DBA/

吸入性损伤患者气管切开时机的选择

目的:探讨在吸入性损伤患者治疗中气管切开术应用的时机选择和指征。方法:对于153例因吸入性损伤而行气管切开术的患者做回顾性分析,其中轻、中、重度吸入性损伤的患者分别为29、55、69例。按气管切开时机选择的不同将117例行预防性气管切开术的患者分为预防性气管切开组,而36例行紧急气管切开术的患者分为紧急气管切开组。结果:预防性气管切开组烧伤面积平均为(47.76±21.40)TBSA%,其中轻度吸入性损伤13例,中度42例,重度62例,治疗后死亡29例;紧急气管切开术组烧伤面积为(24.34±15.87)TBSA%,其中轻度16例,中度13例,重度7例,治疗后死亡15例。与紧急气管切开组比较,预防性气管切开组患者的烧伤面积大(P<0.01),损伤程度重(P<0.05),而死亡率低(P<0.05)。结论:对于中重度吸入性损伤的患者应尽早行气管切开术,特别是伴有进行性呼吸困难和头颈部重度大面积烧伤的患者。

通痹灵总碱对T淋巴细胞活化CD71表达的影响

目的 :通痹灵总碱 (TBL)是从通痹灵中提取出来的总生物碱部位。本研究旨在探索TBL对T淋巴细胞活化CD71表达的影响 ,探讨通痹灵免疫调控作用的机理。方法 :对清洁级小鼠T淋巴细胞进行培养 ,体外加入通痹灵总碱 ,采用流式细胞仪检测T淋巴细胞CD71的表达率。结果 :TBL(10 0 μg mL)对ConA或PDB激活的大鼠T淋巴细胞活化表达CD3+ CD71+ 抗原有明显的下调作用 (P <0 0 1) ,并且随着剂量的增加 ,其抑制作用加强 (P <0 0 1) ,呈明显的量效关系 ;对ConA活化组的作用要强于PDB。结论 :TBL对ConA和PDB诱导活化T细胞的CD71表达率均有明显的抑制作用 ,而且呈明显的量效关系。提示对TBL在T细胞活化信号传导过程有明显作用 ,在治疗RA的过程中可能可以通过影响上游T淋巴细胞的活化 ,调节其细胞免疫机制来达到治疗RA的目的。